Лабораторная диагностика микозов реферат
Обновлено: 04.07.2024
С учетом клинико-патогенетических особенностей вызываемого микоза, тканевого тропизма, своеобразия паразитарного морфогенеза и уровня патогенности возбудители микотических инфекций могут быть условно подразделены на ряд групп: возбудители кератомикозов, дерматофиты, грибы с “истинным” паразитарным диморфизмом, условно-патогенные дрожжеподобные и плесневые грибы -возбудители “оппортунестических” инфекций.
Содержание работы
Введение:
Микозы
Возбудители микозов
Глубокие микозы
Классификация:
Дрожжевые
Мицелиальные
Диморфные
Морфология.
Краткая характеристика некоторых микозов:
Кокцидиоидоз
Гистоплазмоз
Актиномикоз
Нокардиоз, мадуромикоз
Кандидоз
Патогенез.
Диагностика.
Профилактика.
Лечение.
Понятие о микотоксикозе.
Заключение.
Литература.
Файлы: 1 файл
микробиология.docx
- Микозы
- Возбудители микозов
- Глубокие микозы
Краткая характеристика некоторых микозов:
- Кокцидиоидоз
- Гистоплазмоз
- Актиномикоз
- Нокардиоз, мадуромикоз
- Кандидоз
Понятие о микотоксикозе.
Микозы - широкораспространенная группа инфекций, вызванных большим числом видов( более 200 ) различных патогенных и условно-патогенных грибов.
Грибы принадлежат к эукариотным микроорганизмам растительного происхождения. Помимо высокого уровня клеточной организации, микроорганизмов этой группы характеризуют морфологическое разнообразие, сложные жизненные циклы, половые и бесполые циклы размножения. Грибы могут существовать в виде олноклеточных микроорганизмов (дрожжи, дрожжеподобные грибы), однако чаще им свойственен мицелиальный тип строения.
Большинство грибов является свободно живущими обитателями различных естественных субстратов окружающей среды, и только немногие из них могут выступать в качестве возбудителей инфекционных заболеваний человека.
Особенности метаболизма, химического состава и морфо- функциональной организации грибов определяют своеобразие инфекций, вызываемых этими микроорганизмами. Так, наличие в составе клеточной стенки гриба хитина и сравнительно крупные размеры их основных клеточных форм затрудняют инактивацию возбудителя факторами иммунитета хозяина. Одной из черт такого своеобразия является резистентность возбудителей микозов к действию антибактериальных антибиотиков.
Грибы, вызывающие инфекции, в таксономическом отношении распределены в различных семействах, подклассах и классах этой обширной группы несовершенных растений.
С учетом клинико-патогенетических особенностей вызываемого микоза, тканевого тропизма, своеобразия паразитарного морфогенеза и уровня патогенности возбудители микотических инфекций могут быть условно подразделены на ряд групп: возбудители кератомикозов, дерматофиты, грибы с “истинным” паразитарным диморфизмом, условно-патогенные дрожжеподобные и плесневые грибы -возбудители “ оппортунестических” инфекций.
Краткий анализ современного состояния сложной проблемы микозов показывает:
- резкое увеличение за последние время частоты и тяжести грибковых инфекций, в том числе с хроническим течением, и глубоких микозов;
- значение иммунодефицитных состояний в возникновении, патогенезе, течении и исходе заболевания, в особенности в связи с врожденными иммунодефицитами и пандемии ВИЧ-инфекции;
- большой удельный вес микозов в проблеме так называемых
“оппортунестических” инфекций;
- влияние, как это не парадоксально, достижений в других областях медицины (успехи антибиотико- и гормонотерапии, комбинированная терапия, транспланталогия, ряд хирургических вмешательств) на увеличение частоты и длительности течения микозов. Необходимо также отметить, что появление длительно живущих лиц с глубокими нарушениями деятельности иммунной системы создает условия для появления патогенных свойств у грибов, ранее не считавшихся потенциальными возбудителями микозов.
- трудности лечения микозов в связи с многообразием различных по свойствам видов грибов и локализацией патологического процесса;
Проблема микозов на сегодняшний день стоит достаточно остро. Во-первых грибковые поражения обезображивают кожу больного, во-вторых при заболевании происходит аллергизация организма(за исключением кератомикозов), в-третьих поражаются многие органы и ткани( системные микозы), происходит образование гранулем, нарушающих функции многих органов.
Возбудители микозов — растительные паразиты, которых насчитывают около 100 000 видов. Грибы составляют обширную группу низших растений, лишенных хлорофилла, поэтому для поддержания существования им требуются готовые органические вещества. Питание осуществляется двумя способами:
• сапрофитический — питание за счет мертвых остатков (пример: обычные лесные грибы); отчасти к ним относятся дрожжеподобные грибы рода кандида;
• паразитический — питание за счет соков живых растений и животных (примером являются дерматофиты).
Возбудители системных микозов, проникая в кровеносное русло, могут вызвать так называемый грибковый сепсис, который нередко заканчивается летально. Проблема кератомикозов в большинстве случаев косметическая, тогда как субкутанные микозы помимо обезображивания кожных покровов приводят к тяжелым формам аллергий.
Имеется около 500 видов грибов, патогенных для человека. К этой группе относится большинство дерматофитов — возбудителей грибковых заболеваний. Они поражают главным, образом кожу и ее придатки — волосы, ногти, в редких случаях другие органы и ткани. Местом их обитания является больной человек и патологический материал, выделяемый им.
Распространению грибковых заболеваний во многом способствуют наши условия существования, а именно, теплота и влажность, отсутствие вентиляции, а также многие детергенты и мыла, удаляющие липидный слой кожи вместе с аутохтонными бактериями, естественными антагонистами грибов.Грибы попадают в наш организм также и при медицинских манипуляциях. Снижение естественной резистентности организма вследствие таких заболеваний как злокачественные новообразования, сахарный диабет, иммуносуп-пресивная терапия, а также длительное применение антибиотиков широкого спектра действия, кортикостероидов, длительные инфузии плазмозамещающих растворов, и иммунодефициты, имеющие особое значение при системных микозах, приводят к инвазивному росту экзогенных и эндогенных грибов. Необходимо отметить, что в любом случае состояние макроорганизма оказывает определяющее влияние на возникновение, течение и исход заболевания, независимо от того, является ли возбудитель патогенным или условно-патогенным микроорганизмом.
Глубокие микозы
Группа глубоких микозов включает заболевания, которые в основном распространены в странах Южной Америки, Африке, США, на территории Европы, в том числе и в России (встречаются лишь спорадические немногочисленные случаи заболеваний этой группы), за исключением актиномикоза, который в настоящее время отнесен к псевдомикрзам. Глубокие микозы:
В группу глубоких микозов входят бластомикоз североамериканский, бластомикоз келоидный, споротрихоз, хромомикоз и целый ряд других. Характерной чертой глубоких микозов можно считать их слабую контагиозность, распространение возбудителей этих заболеваний в почве, на растениях как сапрофитов, преимущественно в тропическом климате.
Существует несколько классификаций возбудителей микозов. Вызывающие заболевания у людей микромицеты разделяют по морфологическим признакам, степени патогенности, спосоьбности вызывать поражения тех или иных органов и систем и пр. По морфологическим признакам выделяют дрожжевые, мицелиальные (плесневые) и диморфные возбудители микозов. Наиболее распространенными возбудителями микозов среди дрожжевых микромицетов являются Candida spp. Другие, например, Cryptococcus spp., актуальны для отдельных категорий иммуноскомпрометированных больных или встречаются очень редко.
1. Candida spp.;
2. Cryptococcus spp.;
3. Blastoschizomyces spp.;
4. Geotrichum spp.;
5. Malassezia spp.;
6. Rhodotorula spp.;
7. Saccharomyces spp.;
8. Trichosporon spp.;
1. Дерматомицеты (Trichophyton, Microsporum и Epidermophyton spp.);
2. Aspergillus spp.;
3. Зигомицеты (Rhizopus, Rhizomucor, Mucor, Cunninghamella, Absidia spp. и пр.);
4. Гиалогифомицеты (Fusarium, Acremonium, Paecilomyces, Scedosporium, Scopulariopsis, Trichoderma spp. и др.);
5. Феогифомицеты (Aiternaria, Cladophialophora, Curvularis spp., Bipolaris spicifera, Exophiala dermatitidis и др.);
1. Sporothrix schenckii;
2. Blastomyces dermatitidis;
3. Coccidioides immitis;
4. Histoplasma capsulatum;
5. Paracoccidioides brasilienis;
6. Penicillium marneffei;
7. Pneumocystis jiroveci (carinii);
8. Emmonsia crescens;
9. Lacazia loboi.
Мицелиальные грибы составляют основную часть возбудителей микозов. Дерматомицеты (Epidermophyton, Microsporum и Trichophyton spp.) – наиболее распространенные возбудители поверхностных микозов кожи, ногтей и волос. Среди мицелиальных возбудителей инвазивных микозов наиболее часто встречаются Aspergillus spp., реже – светлоокрашенные гиалогифомицеты (Fusarium, Acremonium, Paecilomyces spp., и др.) и темноокрашенные меланинсодержащие феогифомицеты (Alternaria spp., Bipolaris specifera, Cladophialophora spp. и др.). Зигомицеты (Rhizopus, Rhizmucor, Mucor, Cunninghamella, Absidia spp. и пр.) отличаются широким редкосептированным мицелием и вызывают чрезвычайно тяжелые инвазивные микозы с очень высокой летальностью.
Диморфные грибы в природных условиях существуют в мицелиальной форме, но в организме человека приобретают признаки дрожжевых микробов.
Морфологическая классификация возбудителей микозов имеет существенное клиническое значение. Например, большинство дрожжевых возбудителей микозов чувствительны к флуконазолу. С другой стороны, зигомицеты малочувствительны к большинству применяемых в настоящее время антимикотиков.
Клетки грибов имеют разнообразную величину и форму. Наиболее частыми формами молодых клеток являются круглая, яйцевидная и удлиненная в виде трубочки. Полиморфные, грушевидные, булавовидные, веретенообразные клетки отмечаются в более зрелых культурах. Клеточная стенка грибов многослойна, толщина ее достигает 1 мк. Иногда она двухконтурная, поверхность ее обычно ровная, реже – волнистая, шероховатая или бугристая. Стенка отделяет клетку гриба от внешней среды, служит ее защитой, придает ей определенную форму и является осмотическим барьером с избирательной проницаемостью для различных химических веществ. Клетки болезнетворных грибов обладают органоидами, обеспечивающими их жизнедеятельность.
Развиваясь и размножаясь, клетки грибов образуют мицелий или псевдомицелий. Мицелий – это сплетение ветвящихся нитей гриба (гифов), представляющих собой трубку диаметром от 1 до 10 мк. Длина же составляющих мицелий клеток варьирует от 4 до 70 мк и более. Мицелий может быть разделен перегородками. Ветвление осуществляется боковыми выростами, возникающими у некоторых грибов через правильные промежутки то с одной, то с другой стороны.
Размножаются грибы вегетативно, т.е. любая часть мицелия может дать новый организм, а также спорами, образующимися половым и бесполым путем. Споры грибов являются средством не только размножения, но и сохранения во внешней среде. Они обычно появляются в большом количестве и подразделяются на эндоспоры (возникающие внутри) и экзоспоры (возникающие на мицелии). Количество спор, образуемых различными грибами, варьирует в широких пределах – от 4 до 80 тысяч в одной плодоносной ветви (спорангии). Дрожжеподобные грибы образуют так называемый псевдомицелий, который представляет собой скопление удлиненных клеток, располагающихся иногда в длинные цепочки с боковыми ответвлениями.
КРАТКАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА НЕКОТОРЫХ МИКОЗОВ:
Кокцидиоидоз
Кокцидиоидоз – это тяжелое заболевание, характеризующееся разнообразными по клинической картине поражениями кожи и некоторых внутренних органов.
Заболевание было впервые описано в 1892 г. в Буэнос-Айресе. Однако его грибковая природа окончательно установлена в 1900 г. Кроме человека возбудитель кокцидиоидоза может поражать и многих теплокровных животных. Кокцидиоидоз распространен в США (особенно в юго-западных штатах), а также почти во всех странах Латинской Америки. Значительно реже он выявляется в Италии, Греции и других странах Европы с сухим жарким климатом. В США ежегодно кокцидиоидозом заболевают около 100 тыс. человек. В эндемичных районах он выявляется у 27% больных СПИДом, и поэтому его относят к СПИД-ассоциированным (индикаторным) инфекциям.
Возбудитель кокцидиоидоза – двухфазный дрожжеподобный гриб. В природе он встречается в мицелиальной (заразной), а в тканях человека – в сферулярной (незаразной) форме. Сферулы – это крупные шарообразные клетки размером от 200 до 500 мк, заполненные спорами.
Заражение людей может происходить при вдыхании пыли, содержащей споры гриба, через кожные покровы (если нарушена их целостность, т.е. имеются ссадины, раны, порезы), в которые проникают споры гриба из почвы.
Различают первичный и вторичный кокцидиоидоз. Первичный протекает как острое заболевание после 10–20-дневного инкубационного периода, может напоминать бронхит или пневмонию, с кашлем (обычно сухим), иногда с кровохарканьем. Процесс заканчивается выздоровлением через несколько недель.
Вторичный кокцидиоидоз отличается длительным и тяжелым течением, глубокими разрушениями тканей и органов, с распадом очагов, образованием свищей и исхуданием. Поражения легких сильно выражены и напоминают туберкулезные. Кожные покровы больного обычно покрываются абсцессами и язвами. В процесс вовлекаются также костная ткань, желудочно-кишечный тракт, мозговые оболочки. Такая форма заболевания почти всегда имеет смертельный исход.
В настоящее время лечение кокцидиоидоза проводится антибиотиком амфотерицином В (фунгизон).
Микозы – инфекции, вызываемые микроскопическими грибами, подразделяют на глубокие, подкожные и поверхностные. Первые два типа встречаются относительно редко, в то время как поверхностные микозы широко распространены и могут проявиться у любого человека, независимо от возраста.
В настоящее время список потенциальных возбудителей микозов включает уже более 500 видов грибов. Микроскопические грибы (микромицеты) значительно отличаются от других возбудителей инфекций, что влечет за собой особые подходы к диагностике и лечению грибковых инфекций. Для диагностики микозов используют данные клинической картины, микроскопического и культурального исследования (посева на грибы).
Культуральная диагностика микозов основана на выделении возбудителя из исследуемого материала. Сроки культивирования различны для разных видов грибов (от 2-4 дней до 4 недель). Для получения адекватного результата необходимо исключить применение противогрибковых препаратов, местных антисептиков не менее чем за 7-10 дней. Использование косметических средств может исказить результаты исследования, в связи с чем рекомендовано воздержаться от их применения за 2 суток до сдачи биоматериала.
Фарингомикоз
Микотическое поражение слизистой оболочки зева и ротовой полости – фарингомикоз – чаще всего вызывают грибы рода Candida, в частности, Candida albicans. При фарингомикозе отмечают присутствие творожистого белого налета на слизистой оболочке полости рта, часто - ощущение першения или жжения, неприятный запах, иногда - поверхностные изъязвления, эрозии, боль.
Кандидоз полости рта, обусловленный C . А lbicans
Ростовая трубка C . albicans
Отомикоз
Отомикоз - грибковая инфекция уха, которая может поражать структуры наружного и среднего уха. Отомикоз не имеет специфичных симптомов. Он может проявляться зудом, болью, шумом и заложенностью в ухе, снижением слуха по типу кондуктивной тугоухости, истечением выделений из наружного слухового прохода. Возбудителями отомикозов, чаще всего, являются грибы рода Aspergillus.
Колония Aspergillus fumigatus
Вагинальный кандидоз
Вагинальный кандидоз – микоз слизистой оболочки влагалища, возникающий при ее колонизации штаммами дрожжеподобных грибов Candida. В острой стадии отмечаются покраснение, отек и зуд вульвы; болезненность, жжение и зуд во влагалище; обильные, творожистого вида выделения из половых путей; в хронической - сухость и атрофия слизистой оболочки, экскориации, выраженная лихенизация.
Микозы кожи и ее придатков.
Микозы кожи (дерматомикозы) – группа заболеваний, в основе которых лежит инфицирование кожи, ногтей, волос вызываемое болезнетворными грибками. Общими проявлениями служат шелушение, мокнутие, воспалительные явления кожи, наслоение чешуек, сильный зуд, утолщение и изменение структуры кожи, ногтей, волос. При расчесах – присоединение вторичной инфекции и нагноение.
Микоз гладкой кожи. Микроспория.
Трихофития волосистой части головы.
Онихомикозы
Онихомикоз – инфицирование ногтей на ногах и руках представителями различных классов патогенной и условно-патогенной грибковой микробиоты. Клиническая картина онихомикоза зависит от причины, вызвавшей микоз. Поражённые грибком ногти меняют цвет и прозрачность, теряют гладкость, утолщаются, становятся ломкими и шероховатыми, расслаиваются, начинают крошиться. При этом подногтевое и околоногтевое пространство может оставаться неизмененным либо краснеть, отекать и поражаться вторичной патогенной флорой.
Причиной онихомикоза является патогенный или условно-патогенный грибок. Развитие онихомикоза провоцируют травмы, в том числе при маникюре и педикюре, плоскостопие, варикоз, гипергидроз, эндокринные и иммунологические нарушения, заболевания крови, патология сосудов, длительный приём гормональных препаратов, антибиотиков и цитостатиков, ношение тесной обуви и отказ от соблюдения общепринятых норм личной гигиены. Заболевание развивается не сразу, ему предшествует поражение кожных покровов подошв и ладоней, и только потом возбудитель внедряется в ноготь.
На здоровую кожу возбудитель попадает с заражённых предметов быта или при контакте с инфицированным человеком. Затем грибок распространяется по коже при прикосновениях к загрязненным участкам. Колонизация подногтевого пространства грибком приводит к бессимптомному размножению возбудителя, достижению им критической массы и проникновению из-под свободного края ногтевой пластинки в роговые слои ногтя при любом провоцирующем воздействии (например, при травме ногтя или околоногтевых тканей). Попав в ногтевую пластинку, грибок размножается, формируя в ткани ногтя туннели, ходы и каналы. Степень поражения ногтевой пластинки зависит от химической структуры ногтя и от вирулентности грибка.
Грибы в доме человека
Грибы-микромицеты широко распространены в окружающей среде, в том числе внутри жилых помещений. Среди микроскопических грибов, обнаруживаемых в помещениях, можно выделить виды, которые могут обладать 1) патогенными, 2) аллергенными, 3) токсическими, 4) биоразрушающими свойствами.
Патогенные и условно-патогенные грибы способны вызывать грибковые заболевания у людей с пониженным, а в ряде случаев и с нормальным иммунитетом. Аллергенные свойства грибов проявляются при вдыхании спор грибов или употреблении в пищу продуктов, содержащих грибковые метаболиты, и выражаются в виде респираторных и, реже, нереспираторных симптомов. Некоторые вещества, выделяемые грибами, обладают токсическим действием и способны угнетать центральную нервную, а также дыхательную систему.
Биоразрушающее действие грибов, обусловленное их способностью усваивать различные субстраты, в том числе дерево, бетон, полимерные материалы, может представлять серьезную опасность для строительных конструкций, а сами грибы-биодеструкторы – проявлять патогенные, аллергенные и токсические свойства.
Грибы как причина аллергических заболеваний
Грибы обладают выраженными аллергенными свойствами. Наиболее часто встречается сенсибилизация к плесневым грибам, проявляющаяся различными респираторными симптомами (кашель, насморк, бронхиальная астма и т.п.) при вдыхании спор грибов. Нереспираторные проявления микогенной аллергии встречаются реже, хотя некоторые виды грибов, поражающие плодоовощную продукцию и зерновые ( Phoma , Fuzarium , Penicillium expansum ,) вносят значительный вклад в общее число аллергии к грибам. Сенсибилизация в таком случае происходит при употреблении в пищу продукции, зараженной грибами (ягод, фруктов, овощей, а также продуктов их переработки). Аллергенные компоненты грибов способны проникать в непораженные части плода без изменения их вкуса и часто сохраняются при кулинарной обработке. Гниль яблок и цитрусовых, темные пятна на свекле и моркови, поражения картофеля и томатов – с такими продуктами людям, склонным к аллергии, нужно быть осторожными. Хлеб, мука, крупы могут сохранять виды грибов, присутствовавших на вегетативных частях растений (фузарии, нейроспора, фитопатогены). Молоко, кефир, творог обычно содержат дрожжеподобные грибы, а пиво, вино, сыры – продукты их жизнедеятельности.
Прецизионная диагностика инвазивных микозов нелегка. Это объясняется не только трудностями в получении культуры грибов, но и в интерпретации результатов исследований, поскольку грибами, как дрожжевыми, так и мицелиальными, возможны колонизация слизистых оболочек, контаминация исследуемых образцов. В связи с этим диагностика инвазивных микозов базируется на комплексном подходе, включающем не только результаты микологических (культуральных) и серологических (определение антигена грибов) исследований, но и клинические симптомы грибковой инфекции, данные вспомогательных методов исследований (компьютерная или магнитно-резонансная томография, ультразвуковое исследование).
Европейско-американской кооперированной группой по изучению инвазивных микозов у иммунокомпрометированных больных разработаны критерии диагностики инвазивных микозов. Они представлены в 2001 г. на Международной конференции по антимикробным препаратам и химиотерапии (ICAAC, Chicago), а в 2002 г. в печати. Определены критерии доказанного, вероятного и возможного инвазивного микоза, которые рекомендуется использовать при клинических и эпидемиологических исследованиях
Доказанный инвазивный микоз, вызванный мицелиальными грибами: обнаружение мицелия грибов в биоптатах либо аспиратах при гистологическом или цитологическом исследовании или выделение культуры из образцов, полученных в асептических условиях из стерильного в норме очага, который по результатам клинического и радиологического исследований связан с инфекцией, за исключением исследований мочи и со слизистых оболочек.
Доказанный инвазивный микоз, вызванный дрожжевыми грибами: обнаружение дрожжевых клеток (грибы рода Candida могут формировать псевдомицелий или истинный мицелий) в биоптатах или аспиратах, за исключением образцов со слизистых оболочек, или выделение культуры из образцов, полученных в асептических условиях из стерильного в норме очага, который по результатам клинического и радиологического исследований связан с инфекцией, за исключением исследований мочи, образцов из пазух носа и со слизистых оболочек, или обнаружение при микроскопии и специфическом окрашивании (в капле туши, окраска муцикармином) дрожжевых клеток либо положительного антигена Cryptococcus spp. в цереброспинальной жидкости.
Фунгемия, обусловленная мицелиальными грибами: выделение гемокультуры грибов, за исключением Aspergillus spp. и Penicillium spp., включая Penicillium marneffei, в сочетании с клиническими симптомами инфекционного процесса, совместимыми с выделенным возбудителем.
Фунгемия, обусловленная дрожжевыми грибами: выделение гемокультуры грибов рода Candida или иных дрожжевых грибов у пациентов с клиническими признаками инфекции, связанными с данным возбудителем.
Комплекс диагностических исследований при инвазивных микозах
При микологическом исследовании стерильных аспиратов или биоптатов принимают во внимание выделение не только культуры грибов, но и обнаружение при микроскопии мицелия или псевдомицелия. В гистологических препаратах аспергиллы трудно дифференцировать от Fusarium spp., Sceclosporium apiospermum и некоторых других мицелиальных грибов. Для дифференциальной диагностики следует проводить иммуногистохимическое исследование с антителами к аспергиллам.
Иная интерпретация результатов в случае обнаружения мицелиальных грибов в крови. Высокая частота выделения мицелиальных грибов характерна для Fusarium spp. и составляет 40—60 %. Aspergillus обнаруживают крайне редко, в большинстве случаев это рассматривается как контаминация, за исключением Aspergillus terreus.
Выделение Aspergillus terreus из крови больных с гемобластозами может свидетельствовать об истинной аспергиллемии, а при наличии клинических симптомов инфекции является основанием для назначения антимикотиков.
Критерии инвазивного микоза
| Показатель | Критерии |
| Факторы, индуцирующие возникновение инвазивного микоза (макроорганизм) | Нейтропения ( *При отсутствии инфекции, обусловленной микроорганизмами, способными вызвать аналогичную радиологическую картину, включая образование полостей (Mycobacterium spp., Legionella spp., Nocardia spp.). |
При выявлении в крови или иных стерильных биосубстратов дрожжевых грибов обязательно следует проводить идентификацию до вида и определять чувствительность к противогрибковым препаратам, при выделении мицелиальных (плесневых) грибов — только идентификацию до вида, чувствительность не определяют.
В клинической практике чувствительность мицелиальных грибов не исследуют по причине несовершенства стандартов по определению чувствительности таких грибов к антимикотикам. Более того, только в одном исследовании продемонстрирована корреляция между чувствительностью Aspergillus spp. и результатами лечения инвазивного аспергиллеза у больных с гемобластозами. Ни в одном из исследований, проведенных в последующем, не получено подобных результатов.
Идентификация грибов до вида, особенно полученных из стерильных локусов, необходима прежде всего для выбора антимикотика и проведения адекватной противогрибковой терапии. Так, Candida krusei устойчивы к флуконазолу и менее чувствительны, чем дрожжевые грибы другого вида, к амфотерицину В; Aspergillus terreus, Scedosporium apiospermum (Pseudallescheria boydii), Trichosporon beigelii, Scopulariopsis spp. резистентны к амфотерицину В; Mucorales резистентны к итраконазолу, вориконазолу, Candida glabrata проявляет дозозависимую чувствительность к флуконазолу, и при выделении этого вида гриба, даже чувствительных штаммов, дозу флуконазола следует увеличить (взрослым назначают 800 мг вместо 400 мг); Candida lusitaniae устойчивы к амфотерицину В.
Идентификация грибов до вида также важна для проведения эпидемиологического анализа в стационаре — определения возбудителей вспышек инфекции и по возможности источника инфекции. Описаны вспышки инфекции, вызванные такими редкими грибами, как С. lusitaniae, С. krusei, С. lipolytica.
На основании видовой идентификации грибов можно предположить инвазивный микоз или колонизацию грибами слизистых оболочек. Например, Aspergillus niger существенно реже, чем Aspergillus fumigatus, являются причиной инвазивного аспергиллеза у больных острыми лейкозами. Выделение из жидкости бронхоальвеолярного лаважа Aspergillus niger чаще всего расценивается как колонизация дыхательных путей, а из мокроты — как контаминация из воздуха и требует дополнительных исследований при подтверждении диагноза инвазивного аспергиллеза.
Выделение Cryptococcus neoformans у иммунокомпрометированных больных из респираторного тракта (смывы, лаваж) является диагностически значимым. Если идентификация дрожжевых грибов из жидкостей, полученных из дыхательных путей (смывы из трахеи, бронхов, бронхоальвеолярный лаваж) иммунокомпрометированных больных, не относится к обязательным исследованиям, то проведение скрининга по выявлению Cryptococcus neoformans из этих образцов является необходимым.
Обнаружение кандид в моче у больных с нейтропенией и лихорадкой, как правило, считается проявлением диссеминированной кандидозной инфекции.
В своевременной диагностике инвазивного аспергиллеза успешно пользуются коммерческим тестом по выявлению циркуляции специфического антигена грибов Aspergillus spp. галактоманна (полисахаридный водорастворимый компонент клеточной стенки гриба).
Галактоманн может быть определен двумя методами: методом латекс-агглютинации (Pastorex Aspergillus, фирмы BioRAD) и методом иммуноферментного анализа (Platelia Aspergillus, фирмы BioRAD).
Преимуществом иммуноферментного метода является более низкий порог чувствительности определения уровня галактоманна в крови — 1 нг/мл и менее, а с помощью латекс-агглютинации — 15 нг/мл. Диагностическое значение имеет определение галактоманна в крови (не менее чем в 2 образцах), цереброспинальной жидкости, бронхоальвеолярном лаваже. Чувствительность метода иммуноферментного анализа составляет около 90 %, специфичность 90—99 %, у реципиентов аллогенного костного мозга данные показатели ниже и равны соответственно 60—70 % и 80—90 % вследствие профилактического применения противогрибковых препаратов (антимикотики снижают пороговый уровень галактоманна).
В 40 % случаев выявление галактоманна в крови опережает проявления инвазивного аспергиллеза, определяемые при компьютерном исследовании легких, а в 70 % опережает клинические симптомы инфекции.
Диагностическую значимость тест по выявлению антигена Aspergillus имеет в том случае, если исследование проводят неоднократно. Определение антигена Aspergillus в крови следует проводить при лихорадке на фоне лечения антибиотиками широкого спектра действия у больных с нейтропенией 2 раза в неделю; при пневмониях, которые возникают или сохраняются на фоне антибактериальной терапии; при обнаружении очагов в легочной ткани (компьютерная томография).
Редактор: Искандер Милевски. Дата обновления публикации: 18.3.2021
Клиническая картина грибковых заболеваний кожи весьма полиморфна, поэтому во всех случаях диагноз должен быть подтвержден лабораторными методами исследования. Для лабораторной диагностики микозов используют микроскопический, люминесцентный, культуральный, иммунологический (аллергологический и серологический) методы исследования, а также эксперименты на животных.
Оглавление
Введение…………………………………………………………………………3
1. Микозы………………………………………………………………………..4
2. Организация работы микробиологической лаборатории………………….5
3. Взятие и доставка патологического материала…………………………… 6
4. Методы микробиологической диагностики грибковых инфекций………..7
4.1. Микроскопия…………………………………………………………..….7
4.1.1. Неокрашенные препараты……………………………………..…7
4.1.2. Окрашенные препараты……………………………………….….7
4.2. Культуральное исследование………………………………………..….7
4.3 Люминесцентное обследование……………………………………..…..9
4.4. Иммунологическое исследование……………………………………..10
Заключение…………………………………………………………………..…11
Список литературы………………………………………….…………………12
Файлы: 1 файл
реферат диагностика микозов.docx
Автор работы: студентка
Клементьева Л. И.
Преподаватель: Бичина Н. Ю.
2. Организация работы микробиологической лаборатории………………….5
3. Взятие и доставка патологического материала…………………………… 6
4. Методы микробиологической диагностики грибковых инфекций………..7
4.1.1. Неокрашенные препараты……………………………………..…7
4.2. Культуральное исследование………………………………………..… .7
4.3 Люминесцентное обследование……………………………………..…. .9
4.4. Иммунологическое исследование……………………………………..10
Заключение…………………………………………………… ……………..…11
Список литературы………………………………… ……….…………………12
Микозы – широко распространенная и трудноизлечимая группа инфекций, вызванных большим числом видов различных патогенных и условно-патогенных грибов.
Клиническая картина грибковых заболеваний кожи весьма полиморфна, поэтому во всех случаях диагноз должен быть подтвержден лабораторными методами исследования. Для лабораторной диагностики микозов используют микроскопический, люминесцентный, культуральный, иммунологический (аллергологический и серологический) методы исследования, а также эксперименты на животных.
В своём реферате я хочу подробно рассказать об этих лабораторных методах диагностики микозов.
Микозы – широкораспространённая группа инфекционных заболеваний, вызванных большим числом видов ( более 200) патогенных и условно- патогенных грибов. Микоз развивается медленно, рецидивирует чаще, чем бактериальная инфекция, и не оставляет после себя длительного иммунитета. Иногда грибковые инфекции сопровождаются лишь небольшим воспалением, но часто вызывают образование хронических абсцессов, язв или опухолеподобных гранулем, состоящих из соединительной ткани. Микозы могут иметь прогрессирующее течение и даже стать причиной смерти.
2. Организация работы микробиологической лаборатории
Устройство и режим работы микологической лаборатории должны обеспечивать предупреждение рассеивания патологического материала в окружающей среде, чтобы избежать заражения, аллергизации и распространения инфекции среди сотрудников и больных.
Лаборатория должна иметь определенный набор помещений, включая комнату (или специально оборудованное место) для приема и регистрации анализов, бокс-посевную для посева и работы с культурами, комнату с автоклавами для стерилизации и уничтожения патологического материала и культур, моечную, препараторскую, кладовую, гардероб для одежды, туалет. Пол и стены помещений, где проводится лабораторная диагностика микозов, должны выдерживать мытье дезинфицирующими растворами. Лаборатория укомплектовывается легко подвергающейся дезинфекции мебелью, включая шкафы для чистой лабораторной посуды, реактивов, питательных сред; соответствующим оборудованием и инструментами.
Для работы с патологическим материалом и культурами грибов лабораторные столы следует покрывать стеклами с частично окрашенной в черный цвет обратной стороной: на черном фоне лучше видны обычно светлые культуры грибов, а также мелкие частицы исследуемого материала. Часть стекла окрашивается в белый цвет, так как на белом фоне хорошо видны оттенки пигмента у исследуемых колоний. Иногда для этих целей под стекла подкладывают листы черной и белой бумаги.
Воздух в лаборатории стерилизуют дезинфицирующими аэрозолями или ультрафиолетовыми лучами.
Все посевы производят вблизи огня спиртовки или газовой горелки с обжиганием инструмента и краев пробирки. Засеянные пробирки и другие емкости должны иметь четкие надписи с указанием даты посева, номера анализа, вида и штамма возбудителя.
3. Взятие доставка патологического материала
Успех лабораторного исследования микозов во многом зависит от правильного взятия патологического материала. Поскольку грибы способны поражать различные органы человека, при подозрении на микоз необходимо исследовать различный патологический материл. В дерматологической практике чаще всего приходится иметь дело с микозами, при которых исследованию на грибы подлежат кожные чешуйки, волосы, ногти. При подозрении на глубокие и системные микозы может возникнуть необходимость лабораторной диагностики на грибы мокроты, промывных вод, мочи, фекалий, гноя, отделяемого слизистых оболочек, крови, кусочков органов и биопсированной ткани.
Необходимо помнить, что любой изучаемый в лаборатории материал потенциально опасен. Взятие патологического материала следует производить в асептических условиях, в халатах и марлевых масках. Одежду больного при взятии материала защищают клеенчатой пелериной и салфеткой. Взятие материала с ног производят на специальной скамейке, покрытой клеенкой. Пелерины, салфетки после каждого использования обеззараживают кипячением в течение 15 мин или погружением в дезраствор (5% раствор хлорамина на 3 ч или 5% осветленную хлорную известь –на 2 ч). Патологический материал или культуры переносят в специальной таре (металлические или пластмассовые ящики с крышками, биксы), которую внутри и снаружи ежедневно обрабатывают дезрастворами.
4. Методы микробиологической диагностики грибковых инфекций
Микроскопия — один из основных методов выявления возбудителей микозов. Позволяет проводить экспресс- диагностику микозов и получать результат в течение 1-2 ч, тогда как для выделения культуры возбудителя необходимы недели. Для экспресс – диагностики препараты часто необходимо окрашивать специальными красителями, так как простая окраска гематоксилином и эозином часто не позволяет выявить клетки грибов.
4.1.1. Неокрашенные препараты
Микроскопия методом висячей или раздавленной капли. Метод позволяет выявить структуры грибов в клинических образцах без предварительного окрашивания.
Обработка 10% едким кали (КОН). Метод используют в первую очередь для визуализации структур возбудителей в фрагментах кожи и её придатках (ногти, волосы), отделяемом очагов поражения и влагалища. В указанных образцах содержится большое количество клеток, в которых КОН разрушает кератин, оставляя неизменёнными клетки грибов.
4.1.2. Окрашенные препараты
• Окраска по Граму. В мазках из клинического материала грибы представлены грамположительными клетками. Клетки Cryplococcus neoformans плохо воспринимают красители, что можно использовать как дифференциально- диагностический признак при микроскопии окрашенных мазков СМЖ.
• Окраска нигрозином или тушью по Бурри мазков СМЖ позволяет выявить капсулированные клетки Cryptococcus neoformans. Для идентификации этого микроорганизма можно использовать муцикармин или конго красный.
• Окраска по Романовскому – Гимзе или Райту мазков крови и костного мозга позволяет выявить дрожжевую форму Histoplasma capsulatum в цитоплазме фагоцитов.
• Окраска метенаминовым серебряным по Гомори. Метод включает предварительную обработку гистологических препаратов хромовой кислотой с последующим нанесением красителя (клетки грибов тёмно-серые или чёрные).
• Окраска по Гридли. Метод включает предварительную обработку препаратов хроматом лейкофуксина с последующим нанесением фуксинового альдегида и метанилового жёлтого (клетки грибов розово-пурпурные на жёлтом фоне).
• Окрашивание перйодной кислотой и реактивом Шиффа (по Мак-Манусу). 1,2-Гликольные группировки полисахаридов клеточных стенок грибов сначала окисляются перйодной кислотой до альдегидов, реагирующих с сульфитом лейкофуксина реактива Шиффа; клетки окрашиваются в насыщенно розовый или красный цвет.
4.2. Культуральное исследование
Культуральное исследование является высокочувствительным и специфическим методом лабораторной диагностики микозов. Его необходимо производить независимо от результатов микроскопии, так как культуральный метод позволяет иногда выявлять возбудителя при отрицательных данных микроскопии; он дает возможность определять род и вид возбудителя и, следовательно, проводить адекватную терапию и профилактику заболевания. Особенно полезен культуральный метод для диагностики латентных форм микозов, носительства дерматофитов здоровыми людьми.
Используют плотные и жидкие питательные среды (Сабуро, сусло-агар, Чапека и др.). Инкубация в термостате (22 – 28 .С) длительная (3 – 4 недели). Чистую культуру гриба идентифицируют по совокупности признаков: форме колоний, их цвету, консистенции, микроскопической картине (характер мицелия, расположение спор, конидиеносцев) и другим признакам.
4.3. Люминесцентное обследование
В 1925 г. Было обнаружено, что волосы, пораженные некоторыми дерматофитами, дают характерное свечение в ультрафиолетовых лучах, пропущенных через фильтр Byда. Стекло Byда состоит из сульфата бария, содержит около 9% окиси никеля; оно пропускает лучи длиной 365 нм. В качестве источника ультрафиолетовых лучей можно использовать различные приборы. Природа свечения точно не установлена. Волос продолжает светиться после гибели гриба и после попыток экстрагировать флюоресцирующий материал горячей водой или холодным раствором бромида натрия. Интенсивность и характер свечения зависят от рН раствора. Полагают, что флюоресцирующая субстанция появляется в процессе взаимодействия гриба и растущего волоса.
Люминесцентный метод можно использовать как для диагностики и контроля над эффективностью лечения у отдельных больных, так и в эпидемиологических очагах. Компактные передвижные установки удобны для обследования контактных людей в школах, детских садах и т. п.
4.4. Иммунологическое исследование
Используют для выявления специфической перестройки организма и серологической диагностики грибковых заболеваний. Для обнаружения специфических антител в сыворотке пробы проводят следующие серологические реакции: агглютинации, преципитации, связывания комплемента, иммунофлюоресценции с соответствующими антигенами.
Аллергическое состояние организма больного выявляют с помощью аллергических кожных проб. Аллергены наносят на скарифицированную кожу по Пирке или втиранием в кожу по Моро, внутрикожно по Манту, а также уколом в кожу. С помощью этих проб выявляют аллергические реакции как немедленного, так и замедленного типа, что позволяет оценить состояние гуморального и клеточного иммунитета.
Сопоставление результатов серологических и аллергических реакций оказывается полезным как для диагностики, так и для прогноза течения микозов.
Проблема микозов на сегодняшний день стоит достаточно остро. Во-первых, грибковые поражения обезображивают кожу больного, во-вторых, при заболевании происходит аллергизация организма, в-третьих, поражаются многие органы и ткани (системные микозы), происходит образование гранулем, нарушающих функции многих органов.
Современная медицина разработала средства, которые замедляют размножение грибков, но пока нет таких, которые бы полностью уничтожали их. Поэтому любая тема, касающаяся грибковых инфекций на сегодняшний день, будет важна.
В процессе работы с рефератом я изучила методы микробиологической диагностики микозов и убедилась, что данная тема актуальна на сегодняшний день, ведь от правильной постановки диагноза зависит точное лечение.
Системные, или глубокие микозы – группа инфекционных заболеваний, вызванных грибковым поражением не только кожи, но и других органов. Некоторые из них (кокцидиоидоз и гистоплазмоз) относятся к особо опасным инфекциям, в связи с их высокой заразностью и тяжестью клинических проявлений.
Системное поражение организма грибками может проявляться патологией кожи, органов пищеварения, дыхания, лихорадкой, снижением веса, психическими расстройствами и многими другими признаками.
Большинство системных микозов вызвано грибками, которые в норме живут во внешней среде и на коже человека, не приводя к патологии. Однако при снижении защитных сил организма возбудитель активизируется, проникает в кровоток и вызывает поражение внутренних органов.
В последние годы глубокие микозы встречаются все чаще. Это связано с распространением факторов риска инфекции:
- химиотерапия и облучение у онкологических больных;
- применение иммунодепрессантов и глюкокортикоидов;
- длительное лечение антибиотиками;
- ВИЧ-инфекция и СПИД;
- аутоиммунные болезни (склеродермия, псориаз, ревматоидный артрит, сахарный диабет, синдром Рейно и другие).
Заболевание имеет хронический характер, его признаки развиваются постепенно. На ранних стадиях возможно бессимптомное течение.
Виды глубоких микозов
Классификация глубоких микозов основана на виде возбудителя и включает следующие формы:
- бластомикоз и криптококкоз;
- гистоплазмоз;
- кокцидиоидоз;
- споротрихоз;
- мукороз;
- аспергиллез;
- пенициллиоз;
- хромомикоз;
- риноспоридиоз;
- цефалоспориоз;
- кладоспориоз;
- келоидный микоз;
- мицетомы грибковой природы.
К глубоким псевдомикозам относятся актиномикоз и нокардиоз.
Принято считать, что возбудители большинства этих заболеваний вызывают глубокий эндемический микоз, то есть встречаются только на отдельных участках территории Земли. К ним относятся бластомикоз, кокцидиоидоз, паракокцидиоидоз, гистоплазмоз, пенициллиоз, хромомикоз. Они встречаются в некоторых регионах Америки, Юго-Восточной Азии, Африки, Австралии. Однако в связи с увеличением миграции населения эти болезни могут возникать и у жителей других районов.
Симптомы глубокого микоза не всегда зависят от его причины. У больных появляется кашель, лихорадка, боль в костях и суставах, боль в груди, правом подреберье, увеличение лимфатических узлов. При поражении мозга и его оболочек нарушается сознание и развивается кома.
Причины возникновения
Возбудители системных микозов часто живут в почве эндемичных участков. При контакте с пылью и землей они попадают в дыхательные пути человека. При последующей миграции населения инфекция распространяется в более благополучные страны.
В окружающей среде такая форма грибка трансформируется в мицелиальную. При проникновении ее с пищей, водой или воздухом она способна вызвать заболевание у другого человека.
Во многих случаях для активации грибков в организме необходимо снижение иммунной защиты человеческого организма. Эти условия возникают при длительном и необоснованном приеме антибиотиков, цитостатиков, противовоспалительных гормонов. На этом фоне может не только развиться инфекция, попавшая извне, но и внутренние сапрофитные грибки, безвредные для здорового человека (актиномицеты, аспергиллы, кандида, плесневые грибки).
Одна из главных причин развития системных микозов в нашей стране – синдром приобретенного иммунодефицита. В таком случае инфекция протекает очень тяжело, плохо поддается лечению и нередко служит причиной неблагоприятного исхода.
Кроме того, встречаются случаи заражения персонала лабораторий, работающего с культурой грибков.
Способы диагностики микозов
Эти инфекции встречаются в общей практике нечасто, поэтому диагностика обычно затруднена. Кроме того, эти заболевания имеют схожие внешние признаки с другими поражениями кожи, разнообразные общие проявления и нередко сочетаются с кожным туберкулезом и пиодермиями.
Основа диагностики – распознавание тканевой формы грибка, имеющей особенности у каждого возбудителя. Для этого необходимо получить срез ткани, например, при биопсии, окрасить его специальными веществами и изучить под микроскопом.
Получение культуры возбудителя, то есть выращивание его на питательной среде, крайне затруднено и проводится лишь в специализированных лабораториях.
Дополнительные методы диагностики:
- биопсия кожи;
- определение антигенов и антител к грибку в сыворотке крови;
- рентгенография легких и костей;
- люмбальная пункция;
- пункция костного мозга.
Лечение
Терапия системных грибковых инфекций зависит от общего состояния пациента, вида возбудителя, формы и тяжести течения болезни, сопутствующих заболеваний, переносимости лекарств.
Лечение глубоких микозов основано на применении фунгицидных препаратов.
Кетоконазол может использоваться внутрь и в виде лосьона или других наружных форм для профилактики кандидоза у больных с иммунодефицитом. При кандидозном эндокардите может понадобиться хирургическая операция – замена пораженного клапана на искусственный.
Лечение аспергиллеза проводят, используя амфотерицин В и итраконазол. При аллергическом варианте болезни, сопровождающемся приступами бронхиальной астмы, дополнительно назначаются глюкокортикоидные гормоны. При тяжелом поражении легких, сопровождающемся кровохарканьем, выполняют операцию – удаление доли или всего легкого.
Амфотерицин В или кетоконазол используются для лечения гистоплазмоза, криптококкоза, кокцидиоидомикоза, паракокцидиоидомикоза, бластомикоза. Только амфотерицин В применяется в терапии мукоромикоза и споротрихоза.
Дополнительно проводится патогенетическая и симптоматическая терапия, направленная на снятие интоксикации и поддержание жизненных функций организма:
- инфузии солевых растворов, гемодеза, плазмы;
- витамины и общеукрепляющие средства;
- бронхолитики;
- обезболивающие и другие.
В случае тяжелой дыхательной недостаточности, вызванной грибковой пневмонией, показана кислородотерапия или искусственная вентиляция легких.
Профилактика глубоких микозов
Способы предупреждения системных микозов можно разделить на 3 группы.
Находясь в эндемичных районах Америки, Юго-Восточной Азии или Африки, следует соблюдать правила личной гигиены. Путешествуя в природных условиях, нужно избегать контакта с пылью или водой из рек и прудов. Если после возвращения на родину человек почувствовал ухудшение самочувствия, у него появился кашель, боли в груди, лихорадка, нужно обязательно проконсультироваться у инфекциониста, сообщив ему о районе своей поездки.
Чтобы повысить сопротивляемость организма к грибковой инфекции, следует избегать необоснованного применения антибиотиков и гормональных препаратов. Во время лечения по поводу злокачественной опухоли нужно соблюдать все предписания врачей по профилактике инфекций.
ВИЧ-инфицированным людям нужно регулярно наблюдаться у инфекциониста и получать при необходимости антиретровирусную терапию.
Читайте также: