Доклад на тему тетрациклины
Обновлено: 25.06.2024
Содержат в своем составе четыре конденсированных циклических шестичленных кольца, почему и называются тетрациклинами. К этой группе относятся продуцируемые микроорганизмами тетрациклин и окситетрациклин, а также полусинтетические - метациклин (рондомицин), доксициклин (вибрамицин). Природные тетрациклины в настоящее время используются нечасто.
Тетрациклины имеют широкий спектр противомикробного действия: грамположительные и грамотрицательные микроорганизмы, возбудители особо опасных инфекций (чума, холера, туляремия, бруцеллез и т.д.). бациллярной и амебной дизентерии, рнккетсии, спирохеты, некоторые простейшие, крупные вирусы. Механизм их противомикробного действия связывают с угнетением синтеза внутриклеточного белка. Они прекращают фиксацию на рибосомальной мембране активированных аминокислот, ингибируют многие ферментные системы, образуя хелатные соединения с двух- и трехвалентными ионами металлов (кальция, магния, железа и т.д.).
Действуют тетрациклины и на вне-, и на внутриклеточно расположенные микроорганизмы. Устойчивость к ним развивается медленно, но она почти полностью перекрестна для всех препаратов этой группы. Перекрестной устойчивости с антибиотиками других групп нет.
Тетрациклины не разрушаются в желудочно-кишечном тракте, и большая их часть всасывается из желудка и тонкого кишечника в кровь, где связывается с белками плазмы крови, тетрациклин - на 20- 30%, полусинтетические (метациклин, доксициклин) - на 70-90%, что удлиняет период циркуляции последних в организме. Значительная часть препарата выделяется с желчью и может снова всасываться (энтерогепатический цикл). Максимальная концентрация в крови создается через 2-4 ч. Примерно половина всасывающегося количества метаболизируется. Выводятся тетрациклины почками и кишечником. После однократного приема длительность антибактериального действия природных тетрациклинов 6-8 ч, полусинтетических - 12 и более. При тяжелых инфекциях препараты этой группы вводят инъекционно.
Тетрациклины хорошо проникают в ткани. Вместе с ионами кальция могут откладываться в костях, дентине и эмали зубов. Это особенно следует учитывать при назначении тетрациклинов детям и беременным женщинам. Тетрациклины легко проникают через плаценту и частично выделяются молочными железами, в результате. откладываясь в костях и зачатках зубов, они могут нарушать перинатальный остеогенез и формирование твердых тканей зуба. Применяют тетрациклины при бронхолегочных инфекциях различной этиологии, ангине, коклюше, дизентерии, сыпном и возвратном тифе, особо опасных инфекциях, заболеваниях кишечника, печени. желчного пузыря (выделяются с желчью), почек, гнойно-септических поражениях и т.д.
Использование тетрациклинов нередко приводит к осложнениям. Имея широкий спектр противомикробного действия, они вызывают гибель не только патогенной, но и сапрофитной флоры кишечника, в результате возможен дисбактериоз и суперинфекции, чаще всего вызываемые грибами Candida и стафилококками. Гибель кишечной палочки приводит к возникновению гиповитаминоза, и, как следствие, возникают стоматит, глоссит, "географический язык". хейлит. Для профилактики кандидамикоза рекомендуется вместе с тетрациклинами назначать противогрибковые антибиотики - нистатин и леворин. витамины группы В и включать в диету кисломолочную продукцию. У некоторых пациентов через 5-7 дней лечения возникает аноректальный синдром с явлениями колита, проктита, вульвовагинита, тенезмами. В основе этих осложнений лежат местнораздражающие свойства тетрациклинов, гиповитаминоз и дисбактериоз. Аллергические реакции эта группа антибиотиков вызывает реже, чем b -лактамы. Местнораздражающее действие тетрациклинов может быть причиной осложнений со стороны слизистой оболочки полости рта: сухость и жжение во рту, гингивит, язвенный стоматит, глоссит (язык становится красным, отечным, блестящим, на боковых поверхностях видны отпечатки зубов). При длительном использовании тетрациклинов возрастает вероятность токсического влияния на печень и кровь. Применение этих препаратов в период обызвествления зубов может приводить к гипоплазии эмали (исчерченные желто-коричневыми полосами эмаль и дентин, предрасположенность зубов к кариесу). Поэтому нельзя назначать тетрациклины детям до 12 лет.
Характеристика частично гидрированных производных нафтацена. Рассмотрение тетрациклина, окситетрациклина, их полусинтетических производных: метациклина (рондомицина), докисциклина (вибрамицина). Изучение требований к качеству, основных методов анализа.
| Рубрика | Химия |
| Вид | реферат |
| Язык | русский |
| Дата добавления | 04.11.2015 |
| Размер файла | 767,2 K |
Студенты, аспиранты, молодые ученые, использующие базу знаний в своей учебе и работе, будут вам очень благодарны.
Карагандинский государственный медицинский университет
Кафедра фармацевтических дисциплин с курсом химии
Дисциплина: Фармацевтическая химия
Антибиотики-тетрациклины (частично гидрированные производные нафтацена). Тетрациклины, окситетрациклин, их полусинтетические производные: метациклин (рондомицин), докисциклин (вибрамицин). Требования к качеству, методы анализа.
Подготовила: Аязбаева М.М 4-002 фармация
Проверила: Власова Л.М
гидрированный нафтацен окситетрациклин вибрамицин
Тетрациклины являются антибактериальными средствами. Классифицируют тетрациклины в зависимости от способа получения: А. Природные (биосинтетические) антибиотики
Тетрациклин, окситетрациклин. Б. Полусинтетические антибиотики
Метациклин (Рондамицин), доксициклин (Вибрамицин). Общие свойства тетрациклинов следующие:
бактериостатический тип действия. Тетрациклины наиболее активны в отношении размножающихся микроорганизмов;
широкий спектр противомикробного действия;
высокая активность в отношении внутриклеточных микроорганизмов;
большая липофильность, обеспечивающая препаратам высокую степень всасывания из желудочно-кишечного тракта, способность преодолевать биологические барьеры и накапливаться в тканях;
способность связывать, в хелатные комплексы двухвалентные ионы - железа, кальция, магния, цинка.
антибактериального действия препаратов данной группы неодинакова. По этому признаку среди них следует различать:
а)тетрациклины короткого действия (6-8 ч) - тетрациклин и окситетрациклин;
б)тетрациклины длительного действия (12-24 ч) - метациклин и доксициклинПолучение тетрациклинов
Впервые получен в 1948, Дуггартом из актиномицета ауреомицин , выделенного из почв штата Миссури. В СССР анологичный антибиотик получен в 1952 г. Окситетрациклин отличается от тетрациклина наличием гидроксильной группировки в положении 5. Получают из биотехнологиями из культуральной жидкости микроорганизмов Streptomyces aureofaciens и Streptomyces rimosus . Питательной средой служит жидкость содержащий кукурузный экстракт ,кукурузную муку, бромид натрия, роданид бензила, роданид и нитрат аммония , металлы Mg. Mn Fe Cu Zn в виде сульфатов ,подсолнечное масло. Меняя состав среды можно направлять биосинтез по по пути преимущественного образования того или иного антибиотика. В химическом отношении препараты являются амфотерными соединениями и легко растворяются в кислотах и щелочах. Основные свойства обусловлены наличием диметиламиногрупппы, а кислотные свойства обусловлены фенольными и енольными гидроксилами; с многозарядными катионами образуют хелаты. В качестве общих реактивов , позволяющих отличать препараты друг от друга, применяется конц серная и разведенная хлороводородная кислота . В качестве цветных реагентов можно использовать соли меди и цинкка. Тетрациклины могут окислятся , образуя окрашенные продукты с такими реагентами , как селенистая кислота , хлорамин Б(нефармакопейные реакции) Возможно получение азокрасителя в реакции с диазосоединениями ,которые присоединяются в 9 положение:
Основой тетрациклинов является частично гидрированный цикл тетрацена (нафтацена):
Tetracyclinum (Tetracycline) .Тетрациклин.
Получение: Методом биотехнологии.
Описание : желтый кристаллический порошок без запаха, горького вкуса. Гигроскопичен. Легко разрушается в растворах крепких щелочей. При хранении на свету темнеет.
Растворимость :очень мало растворим в воде, трудно растворим в 95% спирте.
Подлинность: по ГФХ к 0,05г препарата добавляют 2 мл концентрированной серной кислоты; появляется фиолетовое окрашивание, прибавляют 1 мл воды, окраса становится темно-желтой; при добавлении 1 капли раствора хлорида окисного железа окраска переходит в коричневую или красно коричневую:
По ФС используют удельный показатель поглощения при длине волны 380 нм, он должен быть в пределах 380-419 раствор сравнения 0,1 М хлороводородная кислота.
Чистота: по ФС методом ТСХ устанавливают присутствие специфических примесей(эпитетрациклины) Методом УФ - спектрофотометрии определяют присутствие светопоглощающих примесей- при 430нм величина оптической плотности не должно превышать 0,5. Это же можно установить методом ВЭЖХ. Методом ГЖХ устанавливают наличие остаточных растворителей.
Также по ГЖХ определяют удельное вращение, кислотность или щелочность, воду по К. Фишеру. Проводят испытание на токсичность .
Количественное определение: по ФС- метод неводного титрования 0,1М хлорной кислотой в среде смеси с муравьиной , ледяной уксусной кислоты и диоксана (5:10:10), точку эквивалентности устанавливают патенциометрически.
Хранение : с писок Б; в сухом защищенном от света месте, при комнатной температуры.
Применение: антибиотик широкого спектра действия. Применяется при пневмонии, дизентерии, сыпном и возвратном тифе, гонорее.
Форма выпуска: таблетки покрытые оболочкой по 0,05; 0,1; 0,25г; мазь глазная 1% в тубах по 3,7 и 10г.
Описание: светло-желтый кристаллический порошок без запаха. При хранении на свету темнеет.
Растворимость: мало растворим в воде, хорошо растворим в кислотах и щелочах.
К 0,05 г. препарата прибавляют 5 мл концентрированной серной кислоты, в результате появляется пурпурно-красное окрашивание.
К 1мл суспензии препарата прибавляют 2 капли раствора ,состоящего из одной части хлорида железа и 9 частей 95% спирта, в итоге появляется коричневое окрашивание . Это обусловлено наличием фенольных гидроокислов.
Кроме того применяют и другие цветные реакции, описанные выше.
Чистота: по ФС оптическая плотность 0,2% раствора препарата при 430 нм должна быть не более 0,25, а при 490 нм- не более 0,2. Методами ВЭЖХ и ТСХ выясняют присутствие специфических примесей эпитетрациклинов. Методом ГЖХ устанавливают наличие остаточных растворителей. По ГФХ также определяют удельное вращение, кислотность или щелочность, токсичность.
-По ГФХ- методом диффузии в агар с тест-микробом.
-Методом спектрофотометрии в 0,01 М растворе хлороводородной кислоты при 353нм
-Обратной турбидиметрией с тест-культурой золотистого стафилококка
Хранение : Список Б ,в сухом ,защищенном от света месте, при комнатной температуре.
Применение: антибиотик широкого спектра действия. Применяется при пневмонии, дизентерии, сыпном тифе, гонорее.
Выпускается в форме многокомпонентных мазей и таблеток.
Они были созданы из природных тетрациклинов для уменьшения токсичности препаратов. Их получают из окситетрациклина, изменяя структуру молекулы в положении 6. Дезоксилирование приводит к получению из окситетрациклина доксициклина, а последующее превращение метильной группы в метиленовую дает другой препарат- метациклин.
Dioxycyclini hydrohloridum. Диоксициклина гидрохлорид).
Описание: Желтый кристаллический порошок со слабым запахом этилового спирта.
Растворимость: легко, но медленно растворим в воде, легко растворим в метаноле (1:4) , мало растворим в этаноле, практически не растворим в эфире и хлороформе.
Подлинность : 1. Устанавливают по ИК-спектру в сравнение с приложенным к статье рисунком. 2. По удельному показателю поглощения (290-310нм) при длине волны 349 нм.
3. реакцией с концентрированной серной кислотой (желтое окрашивание) и хлоридом железа(3) - красно-коричневое окрашивание. 4 . реакцией на хлориды. Также можно использовать метод ТСХ в сравнение со стандартным веществом - свидетелем.
Чистота: этот же метод ТСХ используется для определения специфических примесей эпитетрациклинов. Проводят испытание на наличие светопоглощающих примесей, измеряя оптическую плотность 1% раствора препарата в системе растворителей хлороводородная кислота- метанол (1:99), она не должна превышать 0,1. Методом ГЖХ определяют наличие примеси этанола (4-6%), воду - методом К.Фишера (1,4-2,8%).
Количественное определение: методом диффузии в агар с тест-микробом Bacillus subtillis.
Хранение: список Б, в сухом защищенном от света месте, при комнатной температуре.
Применение: антибиотик широкого спектра действия. Применяется при пневмонии, дизентерии, сыпном и возвратном тифе, гонорее.
Форма выпуска: капсулы по 0,05; 0,1;0,2г
Methacyclini hydrochloridum. Метациклина гидрохлорид
Описание : желтый порошок, без запаха ,горького вкуса.
Растворимость: трудно и медленно растворим в воде и метаноле (1:40), практически нерастворим в хлороформе и эфире.
Подлинность: 1. Устанавливают по ИК-спектру в сравнение с приложенным к статье рисунком.2. при длине волны 345 нм ос стандартным раствором устанавливают относительную оптическую плотность метациклина, которая должна быть в пределах от 96 до 104%.
3.реакцией на хлориды.
4. используют реакции, свойственные этой группе препаратов.
Чистота: проводят испытания на наличие светопоглощающих примесей, измеряя оптическую плотность 1% раствора препарата в системе растворителей хлороводородная кислота-метанол (1:99), она не должна превышать 0,1. Содержание хлоридов определяют меркуриметрически (не менее 7% и не более 7,8%), индикатор - дифенилкарбазон.
Количественное определение: методом диффузии в агар с тест - микробом
Хранение : список Б, в сухом, защищенном от света месте, при комнатной температуре.
Применение: антибиотик широкого спектра действия. Применяется при пневмонии, дизентерии, сыпном и возвратном тифе и гонорее.
Форма выпуска: капсулы по 0,15 и 0,3 г.
Как антибиотики широкого спектра действия тетрациклины применяются при многих инфекционных заболеваниях. В первую очередь тетрациклины показаны при бруцеллезе, риккетсиозах (сыпной тиф, лихорадка Ку и др.), чуме, холере, туляремии. Тетрациклины назначают при заболеваниях, вызываемых кишечной палочкой (перитониты, холециститы и др.), дизентерийной палочкой (бациллярная дизентерия), спирохетами (сифилис), хламидиями (трахома, орнитоз, мочеполовой хламидиоз и др.), микоплазмами (возбудителями атипичной пневмонии).
При применении тетрациклинов нередко возникают побочные эффекты аллергической и неаллергической природы. Наиболее частым проявлением аллергических реакций является кожная сыпь и крапивница, в редких случаях могут возникнуть отек Квинке и анафилактический шок.
Из побочных эффектов неаллергической природы следует отметить раздражающее действие на слизистые пищеварительного тракта (тошнота, рвота, боли в животе, метеоризм, поносы) при пероральном применении, а при внутривенном введении в случае попадания на стенку вены - образование тромбофлебитов.
Тетрациклины оказывают гепатотоксическое действие, особенно выраженное при нарушении функций печени.
Антибиотики данной группы оказывают общее катаболическое действие: угнетают синтез белка, способствуют выведению из организма аминокислот, витаминов и других соединений.
Тетрациклины депонируются в костной ткани, в том числе в тканях зубов, и образуют труднорастворимые комплексы с кальцием, в связи с чем нарушается образование скелета, происходит окрашивание и повреждение зубов. По этой причине тетрациклины не следует назначать детям до 12 лет и беременным.
1. Чупак -Белоусов В.В Фармацевтическая химия . Курс лекций . Книга первая -3курс -М: Издательство БИНОМ, 2012 стр 209-214
2. Фармацевтическая химия . учеб/пособие пол ред. А.П Арзамасцева.- 3-е издательство испр.-М.: ГОЭТАР -Медиа 2006 стр 268
Подобные документы
Общая характеристика лекарственных средств, производных барбитуровой кислоты. Химическое строение таблеток бензонала и порошка тиопентала натрия. Хроматографический анализ производных барбитуровой кислоты. Реакции идентификации лекарственных средств.
курсовая работа [830,6 K], добавлен 13.10.2017
Препараты фенотиазинового ряда, характеристика, токсикологическое значение и метаболизм. Изолирование производных фенотиазина из биологического материала. Качественное обнаружение производных фенотиазина в экстракте и их количественное определение.
реферат [29,7 K], добавлен 07.06.2011
Связь между структурой и фармацевтическим действием. Кислотно-основные свойства производных 5-нитрофурана. Применение, формы выпуска и хранение лекарственных средств, содержащих производные фурана. Противопоказания и возможные побочные явления.
курсовая работа [684,0 K], добавлен 24.05.2014
Фенотиазины как исторически первый класс антипсихотических средств, по своей химической структуре представляющие трициклические молекулы, их классификация и типы. Связь "структура-действие". Фармацевтический анализ фенотиазина и его производных.
реферат [401,3 K], добавлен 10.05.2011
Хиназолины и основные методы их синтеза. Химические свойства хиназолинов и их производных. Общие синтетические подходы для получения 4-оксохиназолинов. Взаимодействие антраниловой кислоты с изоцианатами. Процесс получения новых производных хиназолина.
дипломная работа [1,4 M], добавлен 23.07.2015
Характеристика антибиотиков, их классификация по разным признакам. Обзор антибиотиков – производных бетта-лактамидов тиазолидина и дигидротиазина (пенициллинов и цефалоспоринов). Описание их свойств, методик идентификации и количественного определения.
курсовая работа [2,2 M], добавлен 21.08.2011
Рассмотрение понятия и свойств пластификаторов. Желатинизирующие и нежелатинизирующие пластификаторы для полимеров. Изучение основ производства и использования сложных эфиров, углеводородов и их производных, растительных масел и продуктов их модификации.
Тетрациклины (англ. tetracyclines )— группа антибиотиков, относящихся к классу поликетидов, близких по химическому строению и биологическим свойствам. Представители данного семейства характеризуются общим спектром и механизмом антимикробного действия, полной перекрёстной устойчивостью, близкими фармакологическими характеристиками. Различия касаются некоторых физико-химических свойств, степени антибактериального эффекта, особенностей всасывания, распределения, метаболизма в макроорганизме и переносимости.
Содержание
Представители
-
г. — открыт первый представитель данной группы антибиотиков — хлортетрациклин (торговые названия ауреомицин, биомицин) — выделен из культуральной жидкости лучистого гриба Streptomyces aureofaciens; первые экспериментальные и клинические работы, характеризующие активность, относятся к 1948 г. г. — открыт окситетрациклин (террамицин) — выделен из культуральной жидкости другого актиномицета Streptomyces rimosus; в медицинской практике начали использовать уже в 1950 г. г. — химическим путём, посредством восстановительного дегалоидирования хлортетрациклина, получен полусинтетический антибиотик тетрациклин; в 1953 г. был выделен из культуральной жидкости Streptomyces aureofaciens.
Другие важные тетрациклины:
- полусинтетические производные окситетрациклина — доксициклин, метациклин.
- производные тетрациклина — гликоциклин, морфоциклин.
- комбинированные лекарственные формы с олеандомицином — олететрин, олеморфоциклин.
- а также миноциклин.
Строение
Основой молекулы тетрациклиновых антибиотиков является полифункциональное гидронафтаценовое соединение с родовым названием тетрациклин. В химическом отношении различие между хлортетрациклином и окситетрациклином состоит в том, хлортетрациклин в 7-м положении содержит хлор, а окситетрациклин в 5-м положении — гидроксильную группу. В отличие от хлортетрациклина и окситетрациклина тетрациклин не имеет атома хлора в 7-м положении и гидроксильной группы в 5-м положении.
Физико-химические свойства
Тетрациклины представляют собой жёлтые кристаллические вещества, устойчивые в твёрдом состоянии. Они обладают амфотерными свойствами, на чём основана способность этих антибиотиков образовывать соли с органическими и неорганическими кислотами, щелочными и щелочноземельными металлами. Образуют нерастворимые комплексы с катионами многовалентных металлов, борной кислотой, солями α-оксикарбоновых кислот (глюконовая, яблочная, лимонная и др.). В определённых условиях растворы тетрациклинов флюоресцируют.
Тетрациклины хорошо растворимы в этиленгликоле, пиридине, кислотах и щелочах, значительно хуже в органических растворителях, плохо растворимы в воде.
| Антибиотик | Растворимость в воде в мг/мл при 28° | |
|---|---|---|
| свободное основание | хлоргидрат | |
| тетрациклин | 1,7 | 10,9 |
| окситетрациклин | 0,6 | 6,9 |
| хлортетрациклин | 0,55 | 8,6 |
В сухом виде тетрациклины стабильны, устойчивость тетрациклинов в растворах зависит от pH среды. Они наиболее устойчивы в кислой среде, в щелочной их активность быстро снижается. Самым лабильным в щелочных средах является хлортетрациклин. В кислой среде наиболее устойчив тетрациклин.
| Антибиотик | Температура в °C | Время, в течение которого антибиотик инактивируется на 50 % при pH раствора | ||||
|---|---|---|---|---|---|---|
| 1,0 | 2,5 | 7 | 8,5 | 13,0 | ||
| тетрациклин | 22—25 | — | 12 дней | 3 дня | 12 ч. | — |
| 37 | — | — | >24 ч. | — | — | |
| 100 | 1 мин. | 15 мин. | — | — | 7 мин. | |
| окситетрациклин | 22—25 | >30 дней | — | 7 дней | — | — |
| 37 | ~4,5 дня | 5½—12 дней | 26 ч. | 33 ч. | — | |
| 100 | 4,5 мин. | — | — | — | 2 мин. | |
| хлортетрациклин | 22—25 | — | 14 дней | 10 ч. | 4 ч. | — |
| 37 | — | 24 ч. | 4—5 ч. | — | — | |
| 100 | 2 мин. | — | — | — | 0,3 мин. | |
| Антибиотик | Время в ч. | % при pH | |
|---|---|---|---|
| 7,0 | 8,0 | ||
| тетрациклин | 10 | 2 | 36 |
| 24 | 42 | 82 | |
| окситетрациклин | 10 | 34 | 25 |
| 24 | 66 | 75 | |
| хлортетрациклин | 10 | 65 | 95 |
| 24 | 95 | 99,7 | |
| Антибиотик | pH | Температура в °C | Продолжительность сохранения активности в днях |
|---|---|---|---|
| тетрациклин | 3-5,2 | 20-37 | 6 |
| окситетрациклин | 1-2,5 | 5-25 | 30 |
| хлортетрациклин | 2,9 | 4 | 23 |
Большой интерес представляют карбоксамидные производные тетрациклинов, полученные на основе аминометилирования исходного продукта. Они характеризуются рядом ценных свойств, к основным из которых относится высокая растворимость в воде при широком колебании значений pH (2,0 — 8,5). Соединением этого типа является тетрациклин для парентерального применения — ролитетрациклин (синонимы: реверин, велациклин, пирролидинометилтетрациклин и др.), который в первые часы после внутривенного или внутримышечного введения создаёт в крови более высокие концентрации, чем тетрациклина гидрохлорид.
Антибактериальное действие
Тетрациклины являются антибиотиками широкого спектра действия. Высокоактивны in vitro в отношении большого числа грамположительных и грамотрицательных бактерий. В высоких концентрациях действуют на некоторых простейших. Мало или совсем неактивны в отношении большинства вирусов и плесневых грибов. Недостаточно активны в отношении кислотоустойчивых бактерий.
Антибиотические спектры индивидуальных тетрациклинов очень близки между собой, несколько отличаясь in vitro в отношении ряда микроорганизмов. Активность их в отношении грамположительных бактерий в большинстве случаев уменьшается в ряду хлортетрациклин-тетрациклин-окситетрациклин. Многие штаммы грамотрицательных бактерий (Proteus spp., E. coli, Aerobacter и др.) несколько более чувствительны к тетрациклину, чем к хлортетрациклину. Из трёх тетрациклинов окситетрациклин является наиболее активным амёбоцидным агентом. Он превосходит хлортетрациклин по действию на некоторые риккетсии (Rickettsia akari, R. burneti) и подавляет рост Ps. aeruginosa и Mycobacteruim в концентрациях более низких, чем другие тетрациклины. Наибольшие различия в чувствительности к трём тетрациклинам обнаружены среди штаммов грамотрицательных бактерий.
Цифры, характеризующие сравнительную антимикробную активность тетрациклинов in vitro, в значительной степени зависят от методов её определения. Так, при посеве испытуемого штамма штрихом на агар с известной концентрацией антибиотика (метод диффузии в агар) их активность примерно одинакова при pH агара 7,8; при pH 6,0 более активен хлортетрациклин. Меньшая антимикробная активность хлортетрациклина в ряде случаев связана в значительной степени с его более низкой стабильностью в питательных средах.
Несмотря на определённые количественные различия в действии отдельных тетрациклинов на некоторые виды микробов in vitro, они не имеют существенного практического значения. Как правило, в клинике при лечении тех или иных заболеваний выявить преимущественную активность одного из тетрациклинов перед другими не удаётся.
В обычно применяемых концентрациях тетрациклины действуют бактериостатически. Их бактерицидное действие на некоторые микроорганизмы проявляется лишь при концентрациях, в 30-60 раз превышающих бактериостатические.
| Микроорганизм | Концентрация тетрациклина в мкг/мл | |
|---|---|---|
| бактериостатическая | бактерицидная | |
| Aerobacter aerogenes | 0,8 | 50 |
| Bacillus subtilis | 0,2 | 0,4 |
| Escherichia coli | 1,6 | 50 |
| Klebsiella pneumoniae | 0,4 | 12,5 |
| Salmonella typhi | 1,6 | 50 |
| Shigella sonnei | 0,8 | 50 |
| Staphylococcus aureus | 0,2 | 12,5 |
| 'Streptococcus pyogenes' | 0,2 | 6 |
| Антибиотик | Связанная часть в % при концентрации | |
|---|---|---|
| 10 мкг/мл | 5 мкг/мл | |
| тетрациклин | 23 | 25 |
| окситетрациклин | 22 | 24 |
| хлортетрациклин | 64 | 69 |
Вопрос об антимикробной активности связанной белками части тетрациклинов окончательно не выяснен. Имеются данные о том, что in vitro антибактериальное действие тетрациклинов в присутствии сыворотки снижается, а связанная белками часть биологически не активна. Вместе с тем in vivo связь тетрациклинов с белками является непрочной и, по-видимому, обратимой.
Тетрациклины действуют на вне- и внутриклеточно расположенные микроорганизмы. Влияние антибиотиков этой группы на внутриклеточно расположенного возбудителя подтверждено экспериментально и в клинике при лечении инфекций, вызываемых бруцеллами и крупными вирусами.
Степень чувствительности бактерий к тетрациклинам зависит от их функционального состояния. Молодые, быстро размножающиеся культуры более чувствительны к действию антибиотиков, чем находящиеся в фазе покоя. При переходе из фазы покоя в фазу интенсивного деления чувствительность микробов к тетрациклинам резко повышается. Действие на размножающихся бактерий сопровождается заметными изменениями морфологии клеток. У бактерий, находящихся в стадии покоя, морфологических изменений при контакте с тетрациклинами не отмечено.
Механизм действия
В основе антибактериального действия тетрациклинов лежит подавление белкового синтеза.
Тетрациклины являются специфическими ингибиторами как EF-Tu-промотируемого, так и неэнзиматического связывания аминоацил-тРНК с A-участком бактериальной 70S рибосомы. Тетрациклины подавляют также кодон-зависимое связывание аминоацил-тРНК с изолированной 30S субчастицей бактериальной рибосомы. В соответствии с этим, место специфического связывания тетрациклинов с рибосомой обнаружено на 30S субчастице рибосомы, хотя при более высоких концентрациях они могут связываться также и с 50S субчастицей, обнаруживая побочные действия. Интересно, что когда тройственный комплекс Aa-tRNA•EF-Tu•GTP взаимодействует с 70S рибосомой в присутствии тетрациклиновых антибиотиков, то ГТФ гидролизуется и EF-G•GDP освобождается, но аминоацил-тРНК не остаётся связанной. По-видимому, антибиотик, будучи связан где-то в районе тРНК-связывающего A-участка на 30S субчастице рибосомы, ослабляет сродство участка к тРНК, приводя к её плохому удержанию после ухода EF-Tu. Хотя тетрациклины не действуют на эукариотические клетки из-за непроницаемости их мембран для антибиотика, в эукариотических бесклеточных системах они тоже оказываются сильными ингибиторами, подавляя связывание аминоацил-тРНК с 80S рибосомами.
Устойчивость микроорганизмов к тетрациклинам
Устойчивость микроорганизмов к тетрациклинам in vitro развивается медленно, по пенициллиновому типу. Общим правилом для большинства видов микроорганизмов является медленное нарастание устойчивости при первых 10-18 пассажах и более быстрое и неравномерное — в дальнейшем. При пассажах на агаре удаётся получить бо́льшую устойчивость, чем в бульоне — жидкой питательной среде. Скорость возрастания устойчивости зависит от индивидуальных особенновтей штамма. С трудом, очень медленно и незначительно адаптируются к тетрациклинам бруцеллы, Klebsiella и некоторые другие микроорганизмы. Резистентные формы, как правило, утрачивают устойчивость после ряда пересевов на среды, не содержащие антибиотика.
В условиях in vitro резистентность микробов к одному из тетрациклинов сопровождается перекрёстной устойчивостью к другим антибиотикам этой группы, что объясняется близостью их химического строения и механизма действия. Практически не обнаруживаются штаммы микроорганизмов, сохранившие чувствительность к одному из тетрациклинов при развитии устойчивости к другому. У штаммов, резистентных к тетрациклинам, нередко отмечается устойчивость к левомицетину. Чаще всего устойчивые к тетрациклинам штаммы обнаруживаются среди стафилококков и возбудителей желудочно-кишечных инфекций; так например, у больных хронической дизентерией устойчивые штаммы выделяются в 2 раза чаще, чем у больных острой дизентерией. Также наблюдается увеличение числа штаммов гемолитических стрептококков и пневмококков устойчивых к тетрациклинам, которые, однако, сохраняют высокую чувствительность к пенициллину и эритромицину.
Возникновение устойчивости к тетрациклинам не всегда находится в прямой зависимости от продолжительности лечения и применяемой дозы препарата. У одних больных устойчивые стафилококки начинают выделяться вскоре после начала лечения, у других даже при длительном применении антибиотиков чувствительность возбудителя не изменяется. Несмотря на более частое обнаружение устойчивых штаммов у длительно лечившихся больных, установить непосредственную зависимость между интенсивностью применения тетрациклинов и частотой выделения резистентных бактерий не всегда удаётся.
Тетрациклиноустойчивые штаммы микроорганизмов различных групп с большей частотой выделяются у госпитализированных больных по сравнению с амбулаторными, чему способствуют контакт и последующее заражение множественноустойчивыми штаммами от больных и обслуживающего персонала — носителей таких штаммов.
Основной путь предотвращения распространения тетрациклиноустойчивых штаммов микроорганизмов является использование для лечения сочетаний антибиотиков с различным механизмом антимикробного действия. Синергидными чаще всего являются комбинации тетрациклинов с олеандомицином, эритромицином. В отношении ряда возбудителей установлено усиление антибактериального эффекта при сочетании тетрациклина со стрептомицином. Следует учитывать, что результаты, полученные при изучении комбинаций тетрациклинов с другими антибиотиками in vitro, не всегда подтверждаются в клинике. Сочетания тетрациклина с пенициллином с отчётливым антагонизмом in vitro оказываются иногда синергидными в условиях организма больного.
Тетрациклины — группа противомикробных препаратов из отряда поликарбонильных веществ (поликетидов). Обладают широким спектром действия, подавляют рост и размножение патогенной флоры, снижают риск осложнений при бактериальных заболеваниях.
Важные факты:
- Тетрациклины – антибиотики из группы поликетидов
- Первый препарат тетрациклинового ряда открыли в 1945 году из культуральных жидкостей грибов Streptomyces aureofaciens
- Тетрациклины не действуют на вирусы, но действуют на внутриклеточные бактерии (хламидии, микоплазмы) и рикеттсии
- Тетрациклины — бактериостатические антибиотики
- Тетрациклины действуют только на активно делящиеся бактерии. Они бессильны против спор или гибернирующих бактерий
- Тетрациклины активны в отношении некторых простейших (Entamoeba histolytica, Giardia lamblia, Leishmania major, Trichomonas vaginalis , and Toxoplasma gondii), в частности Plasmodium Falciparum — возбудитель малярии
- Терапевтический эффект – подавляют синтез белка внутри клетки бактерий, что роднит их с другими поликетидными антибиотиками — макролидами
История
Тетрациклины относятся делятся на три поколения, а первый представитель был обнаружен 1945 году — всего 2 года спустя внедрения первого антибиотика пенициллина. Во время изучения свойств почвенных грибов рода Streptomyces были обнаружены их антибактериальные свойства.
Первым препаратом из тетрациклиновой группы стал хлортетрациклин, но сейчас он используется только в ветеринарной практике. В 1952 году впервые произвели антибиотик тетрациклин, который и дал название всей группе препаратов. Получили его химическим путем, благодаря реакции хлортетрациклина. Очищенную молекулу выделили из среды культивирования актиномицет (Streptomyces aureofaciens).
К концу ХХ века, ученые изобрели другие полусинтетические тетрациклины: метациклин, миноциклин, тигециклин, которые обладают хорошей терапевтической активностью в борьбе с грамположительными и грамотрицательными бактериями. В настоящий момент, тетрациклиновые антибиотики не так часто используются на практике, по причине появления резистентных форм возбудителей, наличии других групп противомикробных препаратов с лучшей активностью.
Строение
Основной молекулой тетрациклинов считается полифункциональное гидронафтаценовое соединение с конденсированной четырехциклической системой – тетрациклин. Проще говоря все тетрациклины состоят из 4 циклов к которым могут присоединяться боковые радикалы разной сложности. Самый простой пример антибактериального вещества тетрациклинового ряда это 6-диокси-6-диметилтетрациклин.
Тетрациклины первого и второго поколения отличаются незначительно.
Так разница между хлортетрациклином и доксициклина в атоме хлора и гидроксильной группе. Различие между хлортетрациклином и окситетрациклином заключается в том, что первый в 7-м положении содержит хлор, а окситетрациклин в 5-м положении — гидроксильную группу.
В строении тетрациклинов выделяют две области — верхнюю и нижнюю. В зависимости от радикала и его позиции в области меняются и спектр действия и способность тетрациклина оказывать антибиктериальное дествие. Многие радикалы обеспечивают антипротозойную и даже противогрибковую активность этих антибиотиков.
Нижняя группа радикалов у тетрациклинов
Внешне тетрациклины имеют вид кристаллического порошка желтого цвета, плохо растворяются в воде, лучше в различных солевых и гидрохлоридных растворах. Окситетрациклин обладает небольшой липофильностью, тетрациклин – средней, а наиболее высокой — метациклин и доксициклин. Данные показатели определяют период всасывания препаратов при внутреннем приеме.
Классификация
Три поколения тетрациклинов
Основой классификации тетрациклинов стал принцип их получения. Согласно современным представлениям, выделяют 3 поколения этих анибактериальных средств:
- Первое поколение включает такие антибиотики, как Хлортетрациклин, террациклин и тетрациклин
- Второе поколение включает такие антибиктериальные вещества: Доксициклин, Метациклин и Миноциклин
- Третье поколение представлено тигециклином, а также двумя исследуемыми антибактериальными веществами: Омадациклин и Эравациклин
Разделение тетрациклинов на поколения скорее условно и не отражает приобретенных свойств или спектр действия, как в случае цефалоспоринов. Таже классификация может быть представлена так:
- Природные получают в результате биосинтеза: тетрациклин, хлортетрациклин, окситетрациклин, демеклоциклин.
- Полусинтетические — путем химической трансформации природных: лимециклин, меклоциклин, метациклин, ролитетрациклин, глицециклин.
- Синтетеческие -тигециклин и другие представители третьего поколения
Напомню, что подобная классификация есть также у макролидов и пенициллинов.
По продолжительность действия:
- Короткое – период полувыведения 6-8 часов: тетрациклин, хлортетрациклина, окситетрациклин.
- Промежуточное – выводятся до 12 часов: демеклоциклин, тигециклин.
- Длительное – действуют до 16 часов и больше: доксициклин, миноциклин, тигециклин.
Механизм
Тетрациклины – антибиотики широкого спектра действия с выраженным бактериостатическим эффектом и высоким уровнем вторичной резистентности ко многим патогенным микроорганизмам. Терапевтический эффект тетрациклиновых антибиотиков достигается за счет блокирования синтеза белков внутри клеток бактерий, что исключает их дальнейшее размножение и распространение.
Тетрациклины — специфические ингибиторы присоединения аминоацил-т-РНК к рибосоме (mRNA binding site на картинке внизу). Этот эффект достигается за счет связывания 30S субъединицы рибосомы. В результате блокируется наращивание полипептидной цепи — один из первичных компонентов в процессе синтеза белка.
Структура бактериальной рибосомы
Препараты из этой группы обладают амфотерными свойствами, хорошо растворяются в щелочах и этиленгликоле, плохо – в воде. После перорального, внутривенного применения быстро проникают в кровоток, проявляются в высоких концентрациях. Проникают во все ткани и органы, накапливаются в желчи, синовиальной, цереброспинальной жидкости. Метаболизируются печенью, выводятся с мочой и желчью.
Неантибактериальные свойства
Тетрациклины, как и другие поликетиды, обладают рядом неантибактериальных свойств. Их способность ингибировать металлпротеиназы используется в лечении ревматоидного артрита, аутоимунного воспаления и некоторых метастатических новообразований.
Спектр действия
Антибиотики из группы тетрациклинов проявляют высокую активность ко многим грамположительным и грамотрицательным бактериям. При высоких концентрациях оказывают действие на некоторые простейшие, но совсем не чувствительны к кислотоустойчивым бактериям. Бактериостатический и бактерицидный эффект тетрациклины проявляют к следующими бактериями:
- аэробные грамположительные бактерии: Staphylococcus, Streptococcus
- грамотрицательные бактерии: Neisseria gonorrhoeae, Bordetella pertussis, Escherichia coli, Salmonella, Shigella
- анаэробные бактерии: Clostridium
- Mycoplasma pneumoniae
- Brucella
- Chlamydia
- Listeria monocytogenes
Антибиотики тетрациклинового ряда часто применяются в комплексном лечении язвы желудка, которая вызвана бактерией Helicobacter pylori. Высокая активность наблюдается при их сочетании с препаратами висмута трикалия дицитрата, ингибиторами протонной помпы.
Ограничения спектра
Неэффективны тетрациклины при кишечных инфекциях, причиной которых выступает сальмонелла, шигелла, кишечные палочки. Особенностью тетрациклинов считается тот факт, что как только бактерии вырабатывают устойчивость к какому-либо антибиотику из группы тетрациклинов, резистентность распространяется на все прапараты этой группы. В таких случаях врач отменяет прием лекарства или дополняет терапию антибиотиками других фармакологических групп.
Формы приемы
Тетрациклины выпускаются в разных фармакологических формах для перорального и местного применения:
- Пероральные формы
- Формы для инъекций
- Мази на основе тетрациклина
- Глазные капли
Внутренний прием показан при болезнях органов системы дыханий, мочеполовой системы. Мази предназначены для лечения бактериальных заболеваниях кожи, слизистых оболочек. Для повышения терапевтического действия, врач может комбинировать внутренние и наружные препараты. В период терапии тетрациклиновыми антибиотиками важно контролировать состояние пациента, поскольку они способны вызывать побочные реакции организма. Принимать тетрациклины следует только по назначению врача, изучению инструкции по применению.
Безопасность при беременности
Тетрациклины противопоказаны при беременности
Тетрациклины для системного приема противопоказаны при беременности и кормлении грудью и входят в черный список препаратов берееменной.
Системные тетрациклины противопоказаны детям до 8 лет.
Побочные реакции
В целом тетрациклины хорошо переносятся при условии непродолжительного приема (до недели). Следующие побочные реакции ассоциированы с приемом тетрациклинов:
- тошнота
- рвота
- понос
- зуд прямой кишки или влагалища
- опухший язык
- черный или волосатый язык
- боль или раздражение в горле
Некоторые побочные эффекты могут быть серьезными. Если вы испытываете какие-либо из этих симптомов, немедленно обратитесь к врачу:
- Головная боль
- помутнение зрения, двоение в глазах или потеря зрения
- кожная сыпь
- крапивница
- отек лица, горла, языка, губ и глаз
- затрудненное дыхание или глотание
- жесткость или отек суставов
- необычное кровотечение или синяк
- боль в груди
- возвращение лихорадки, боли в горле, озноба или других признаков инфекции
Тетрациклины ассоциированны с таким серьезным и потенциально летальным побочным эффектом, как псевдомембранозный колит.
Немедленно обратитесь к врачу если обнаружите водянистый или кровянистый стул, спазмы желудка или повышение температуры во время лечения или в течение двух или более месяцев после прекращения лечения тетрациклинами.
Добавить комментарий Отменить ответ
Этот сайт использует Akismet для борьбы со спамом. Узнайте, как обрабатываются ваши данные комментариев.
В животноводстве с лечебной и профилактической целью, а также для стимуляции роста и откорма животных все шире используют антибиотики.
Тетрациклины имеют широкий спектр противомикробного действия (грам-положительные и грамотрицательные микробы, риккетсии, крупные вирусы, простейшие). В низких концентрациях они действуют бактериостэтически, а в больших — бактериолитически. Тетрациклины очень эффективны, так как легко резорбируются, а поэтому действуют противомикробно в межклеточной жидкости. Противомикробное действие проявляется в небольших концентрациях (разведения, близкие к 1:10 8 ) и активность их не снижается в присутствий органических веществ.
Механизм противомикробного действия тетрациклинов довольно сложный и ведет к нарушению образования белков. Но это действие, губительное для одноклеточных и простейших, у млекопитающих животных и птиц благодаря компенсаторным реакциям проявляется активизацией образования животного белка.
Тетрациклины широко применяют для ускорения роста и откорма животных. Основанием для этого служит то, что их ростостимулирующее влияние сильнее, закономернее и длительнее, чем большинства других антибиотиков. Кроме того, он сопровождается повышением устойчивости организма животных к воздействию внешних факторов, улучшением течения беременности и рядом других благоприятных явлений.
В настоящее время используются:
Экспериментальные данные разных исследователей указывают на то, что бактерицидные концентрации тетрациклина и окситетрациклина в отношении большинства возбудителей инфекционных болезнен очень сходны. Некоторые грамположительные микробы несколько чувствительнее к хлортетрациклину; большинство грамотрицательных микробов чувствительнее к тетрациклину, а амебные, Pseudomonas и риккетсии наиболее чувствительны к окситетрациклину.
Анализ экспериментальных и клинических данных показывает, что у основных препаратов тетрациклинового ряда нет большой разницы в химиотерапевтическом и химиопрофилакгическом действии. Хлортетрациклин активнее других соединений при инфекционном атрофическом рините свиней, тейлериозе крупного рогатого скота и экспериментальном бруцеллезе. При инфекционных болезнях вымени, глаз, инфицированных ранах, болезнях половых органов и дыхания, а также при диспепсиях быстрее действует окситетрациклин. Окситетрациклин и тетрациклин по сравнению с хлортетрациклином дают более высокий процент выздоровления при инфекционном синусите птиц, мыте, анаплазмозе крупного рогатого скота, агалактии овец, чуме собак, при риккетсиозных и многих других заболеваниях.
Тетрациклиновые препараты все чаще используют с профилактической целью, вотношении тех же заболеваний, при которых их применяют в лечебных целях; профилактическое действие каждого препарата бывает при этом значительно выше.
Тетрациклины, применяемые в малых дозах в качестве стимуляторов роста животных (эти дозы в 50— 80 раз меньше лечебных), влияют профилактически, но очень медленно (через 15— 30 дней) и к тому же только в отношении возбудителей желудочно-кишечных заболеваний.
После резорбции концентрация тетрациклинов в печени и почках бывает выше, чем в крови, в легких, сердце, селезенке и лимфатических узлах, еще меньше в молочной железе и В нервной ткани.
Анализируя данные исследователей по изучению токсичности и побочного влияния антибиотиков разных групп (пенициллины, тетрациклины, левомицетин, макролиды), отмечаем, что неблагоприятное влияние на животных наиболее выражено у хлортетрациклина. При длительном применении в терапевтических дозах он вызывает существенные дегенеративные изменения в почках и в печениу животных, имевших незначительные патологические процессы в этих органах; другие тетрациклины такого отрицательного влияния не оказывают.
Ветеринарные специалисты широко применяют препараты хлортетрациклина как высокоэффективные фармакологические средства. Но в настоящее время хорошо освоено производство препаратов тетрациклина и окситетрациклина, которые не менее эффективны, чем хлортетрациклин, и лишены многих сторон отрицательного его действия.
Оба антибиотика производят в виде основания и хлористоводородных солей. Первые плохо растворяются в воде, используют их внутрь и наружно, а вторые растворяются умеренно и чаще всего их применяют внутримышечно.
В настоящее время установлено, что целесообразно сочетание антибиотиков с веществами разного механизма действия. Например, тетрациклин для внутреннего применения молодняку при желудочно-кишечных заболеваниях хорошо действует с витамином Bi2 (1—0,2); тиамином (0,01), рибофлавином (0,004) и аскорбиновой кислотой (0,1); тиамином (0,005) и цианкоболамином (0,05); с нитрофуранами и сульфаниламидами.
Прием тетрациклинов с медикаментами, содержащими железо, магний, алюминий, кальций, а также содой снижают их адсорбцию
Большого внимания заслуживают продукты химического преобразования тетрациклинов-морфоциклин, метациклин, доксициклин, миноциклин, демеклоциклин.
Одной из задач совершенствования тетрациклиновых соединений является замедление поступления их в кровь.
Библиографический список:
2. Дежаткина, С.В. Применение соевой окары в питании кур / С.В. Дежаткина, Н.В. Силова, В.В. Ахметов // Материалы V Международной научно-практической конференции: Аграрная наука и образование на современном этапе развития: опыт, проблемы и пути их решения. - Ульяновск ГСХА, 2013. - С. 34-37.
4. Дежаткина, С.В. Соеваяокара в питании кур /С.В. Дежаткина, Н.В. Силова //Материалы конференции: Наука в современных условиях: от идеи до внедрения. - 2013. – №. 1. - С. 60.
5. Кондратьева, В.Н. Учебно-методическое пособие при изучении фармакологии /В.П. Кондратьева, Н.В. Силова: учебное пособие для студентов специальности Ветеринария. Ульяновск: УГСХА. - 2011. – 102 с.
9. Силова Н.В. Токсико-фармакологическая характеристика лерстила:автореф. дис. …к.б.н.: 16.00.04 /Н.В. Силова.- Ульяновск, 2007. – 21 с.
11. Силова, Н.В. Аллергизизирующие свойства лерстила/Н.В. Силова // Материалы II-ой Международной научно-практической конференции: аграрная наука и образование на современном этапе развития: опыт, проблемы и пути их решения. - Ульяновская государственная сельскохозяйственная академия, 2010. - С. 177-178.
13. Силова, Н.В. Учебно-методическое пособие по внеаудиторной работе при изучении фармакологии/ В.П. Кондратьева, Н.В. Силова. -Ульяновск: ГСХА, 2011.- 40 с.
14. Силова, Н.В. Изменения липидной активности печени при добавлении в рацион птиц соевой окары/ Н.В. Силова// Материалы VI Международной научно-практической конференции: Аграрная наука и образование на современном этапе развития: опыт, проблемы и пути их решения.- Ульяновск: ГСХА, - 2015. -С. 35-36.
15. Рахматуллин, Э.К. Ветеринарная и клиническая фармакология. Токсикология /Э.К. Рахматуллин, Н.В. Силова: учебно-методический комплекс для студентов специальности Ветеринария. Ульяновск: УГСХА. - 2010. – Ч.1. – 124 с.
16.Ермолаев В.А., Липатов А.М, Шишков Н.К. Способы введения лекарственных веществ различным видам животных. Методические указания.- Ульяновск, 1995.-14с.
17. Дежаткина, С.В. Влияние соевой окары на морфологический и биохимический статус организма кур-несушек /С.В. Дежаткина, Н.В. Шаронина, Дежаткин М.Е. //Материалы 7-й Международной научно-практической конференции: Аграрная наука и образование на современном этапе развития: опыт, проблемы и пути их решения. - Ульяновск, 2016. - С. 119-125.
19. Рахматуллин, Э.К. Биохимическое обоснование действия лерстила при диспепсии телят/ Э.К. Рахматуллин,Н.В. Силова//Ветеринарный врач. - 2007. № 1. - С. 40-42.
22. Любин, Н.А. Элективные курсы в системе уровневого высшего профессионального образования и среднего специального образования. / Н.А. Любин, Э.К.Рахматуллин, С.В.Дежаткина и др.- Ульяновск: УГСХА, 2010. –192 с.
23. Тушина, А.Д. Токсикологическая характеристика и судебно-химическое значение пестицидов /А.Д.Тушина, Н.В. Шаронина, Н.К. Шишков, А.З. Мухитов // Международный студенческий научный вестник. 2016. № 4-3.- С. 340-341.
30. Шабулкина, Е.Ю.Изменение морфологических показателей крови при травматическом ретикулите у крупного рогатого скота /Е.ЮШабулкина, Н.В. Шаронина, Н.К. Шишков, А.З. Мухитов // Международный студенческий научный вестник. 2016. № 4-3.- С. 284-286.
31. Шишков, Н.К. Магнитное зондирование при травматическомретикулите у коров/ Н.К. Шишков, А.З. Мухитов, Н.В. Шаронина // Инновационная наука. 2016. № 2-5 (14). С. 142-144.
32. Шишков, Н.К. Профилактика травматизма у крупного рогатого скота / Н.К. Шишков, А.З. Мухитов, Н.В. Шаронина // Символ науки. 2016. № 2-3. С. 182-184.
Читайте также: