Технология производства пробиотиков реферат

Обновлено: 02.07.2024

Изобретение относится к медицинской промышленности, в частности к производству препаратов, применяемых в качестве лекарственных средств при дисбактериозе, химиотерапии, заболеваниях желудочно-кишечного тракта. Производят культивирование производственных штаммов соответствующих микроорганизмов в реакторах из нержавеющей стали при температуре (371) o С при перемешивании и аэрации в питательной среде на гидролизатах белковых субстратов с добавками аммиака, глюкозы в течение 6-7 ч при рН среды 5,5-8,0. Затем розлив полученной микробной массы в ампулы или флаконы, ее замораживание ниже эвтектической зоны и последующую лиофильную сушку, перед розливом осуществляют концентрирование микробной массы на керамических фильтрах с отсечением 0,2-0,4 мкм при подаче микробной массы тангенциально поверхности фильтрации. Изобретение позволяет уменьшить сроки лиофильной сушки, увеличить срок хранения продукта, а также снизить энергетические затраты.

Изобретение относится к медицинской промышленности, в частности к производству препаратов-пробиотиков, применяемых в качестве лекарственных средств при дисбактериозе, химиотерапии, заболеваниях желудочно-кишечного тракта, а также в качестве профилактического средства.

Наиболее близким к заявляемому по технической сущности и достигаемому результату, выбранным в качестве прототипа, является способ получения пробиотиков, описанный в книге Руководство по вакцинному и сывороточному делу, под ред. П.Н. Бургасова, Медицина, 1978, 440 стр.

Способ получения пробиотиков (колибактерина, лактобактерина, бифидумбактерина) включает культивирование производственных штаммов соответствующих микроорганизмов в реакторах из нержавеющей стали при температуре 371 o С при перемешивании и аэрации в питательной среде на гидролизатах белковых субстратов с соответствующими добавками в течение 6-7 часов при рН среды 5,5-8,0. Микробную массу далее разливают в ампулы или флаконы для лиофильной сушки. Предварительное замораживание микробной массы ведут под контролем криогидратных температур, устанавливая глубину замораживания ниже эвтектической зоны. Обезвоживание замороженного субстрата в сублимационных камерных установках осуществляют при остаточном давлении до 5-10 мм рт. ст. до остаточной влажности готового продукта 2-4%.

Известный способ получения пробиотиков характеризуется высокими энергетическими затратами на стадии лиофильной сушки. Недостатком известного способа является большая продолжительность стадии лиофильной сушки и, как следствие, гибель от 10 до 30% жизнеспособных клеток.

Задача, решаемая предлагаемым изобретением, - совершенствование способа получения пробиотиков.

Технический результат от использования изобретения заключается в уменьшении срока лиофильной сушки, увеличении дозности препарата и срока его хранения за счет повышения выживаемости микробных клеток в готовом препарате, а также снижении энергетических затрат на производство пробиотиков.

Указанный результат достигается тем, что в способе получения пробиотиков, включающем культивирование производственных штаммов соответствующих микроорганизмов в реакторах из нержавеющей стали при температуре 371 o С при перемешивании и аэрации в питательной среде на гидролизатах белковых субстратов с соответствующими добавками (водные растворы аммиака, глюкозы) в течение 6-7 часов при рН среды 5,5-8,0, розлив полученной микробной массы, ее замораживание под контролем криогидратных температур и последующую лиофильную сушку, перед розливом осуществляют концентрирование микробной массы на керамических фильтрах с отсечением 0,2-0,4 мкм при подаче микробной массы тангенциально поверхности фильтрации.

Способ осуществляют следующим образом. Живые штаммы микроорганизмов (энтеробактерий, лактобацилл, бифидобактерий) культивируют в реакторах из нержавеющей стали при температуре 371 o С при перемешивании и аэрации воздухом или азотом в питательной среде на гидролизатах белковых субстратов, например панкреатический гидролизат казеина - 11%, дрожжевой аутолизат - 67% с соответствующими добавками например, аммиака, глюкозы в течение 6-7 часов при рН среды 5,5-8,0. После культивирования микробную массу направляют на концентрирование на керамических фильтрах с отсечением 0,2-0,4 мкм при движении микробной массы тангенциально поверхности фильтрации, например, методом "cross flow", затем на розлив в ампулы или флаконы. Замораживание осуществляют под контролем криогидратных температур, например, с помощью компьютера, устанавливая глубину замораживания ниже эвтектической зоны. Лиофильную сушку замороженного субстрата в сублимационных камерных установках осуществляют при остаточном давлении до 510 мм рт. ст. до остаточной влажности готового продукта 1-3%.

Культивирование микробной массы лактобацилл осуществляют при температуре 371 o С при перемешивании и аэрации воздухом и подаче питательного субстрата (панкреатического гидролизата) с добавками глюкозы в течение 9 часов. Микробную массу далее разливают в ампулы по 1 мл. Замораживание проводят под контролем криогидратных температур, устанавливая глубину замораживания ниже эвтектической зоны. Лиофильную сушку проводят при остаточном давлении 5-10 мм рт. ст. до остаточной влажности 3 % в течение 65-72 часов. Себестоимость готового препарата лактобактерина составляет 400 руб. за 1000 доз. Концентрация живых лактобацилл в препарате составляет 510 9 в ампуле.

Культивирование микробной массы лактобацилл осуществляют при температуре 371 o С при перемешивании и аэрации воздухом и подаче питательного субстрата (панкреатического гидролизата) с добавками глюкозы в течение 9 часов. Затем проводят концентрированно микробной массы на керамических фильтрах с отсечением 0,2-0,4 мкм. в 2 раза при движении микробной массы тангенциально поверхности фильтрации. Микробную массу далее разливают в ампулы по 1 мл. Замораживание проводят под контролем криогидратных температур, устанавливая глубину замораживания ниже эвтектической зоны.(с помощью компьютера) Лиофильную сушку проводят при остаточном давлении 510 мм рт. ст. до остаточной влажности 3% в течение 35-42 часов. Себестоимость готового препарата лактобактерина составляет 250 руб. за 1000 доз. Концентрация живых лактобацилл в препарате составляет 110 10 в ампуле.

Культивирование микробной массы бифидобактерий осуществляют при температуре 371 o С при перемешивании и аэрации воздухом и подаче питательного субстрата (панкреатического гидролизата) с добавками глюкозы в течение 9 часов. Микробную массу далее разливают во флаконы по 3 мл. Замораживание проводят под контролем криогидратных температур, устанавливая глубину замораживания ниже эвтектической зоны. Лиофильную сушку проводят при остаточном давлении 510 мм рт. ст. до остаточной влажности 3% в течение 50-65 часов. Себестоимость готового препарата бифидумбактерина составляет 600 руб. за 1000 доз. Концентрация живых бифидобактерий в препарате составляет 510 8 .

Культивирование микробной массы бифидобактерий осуществляют при температуре 371 o С при перемешивании и аэрации воздухом и подаче питательного субстрата (панкреатического гидролизата) с добавками глюкозы в течение 9 часов. Затем проводят концентрирование микробной массы на керамических фильтрах с отсечением 0,2-0,4 мкм. в 2 раза при движении микробной массы тангенциально поверхности фильтрации. Микробную массу далее разливают во флаконы по 3 мл. Замораживание проводят под контролем криогидратных температур, устанавливая глубину замораживания ниже эвтектической зоны (с помощью компьютера) Лиофильную сушку проводят при остаточном давлении 510 мм рт.ст. до остаточной влажности 3% в течение 30 часов. Себестоимость готового препарата бифидумбактерина составляет 350 руб. за 1000 доз. Концентрация живых бифидобактерий в препарате составляет 210 9 .

Контроль полученных препаратов проводили по ФС 41-0054-00 "Лактобактерин сухой" и ФС 42-3947-002 "Бифидумбактерин сухой".

Керамические фильтры (ТУ 4859-002-40472051-98) используются для очистки и обеззараживания питьевой воды. Концентрирование микробной массы на керамических фильтрах с отсечением 0,2-0,4 мкм при движении микробной массы тангенциально поверхности фильтрации позволяет получить концентрат микробной массы с минимальными потерями с фильтратом и при этом поверхность фильтрации не забивается микробной массой. Другими способами достичь этого невозможно. При отсечении менее 0,2 мкм скорость фильтрации уменьшается, а при отсечении более 0,4 мкм в фильтрате будут потери микробной массы. Если поток микробной массы подавать перпендикулярно, поверхность фильтрации быстро забьется и процесс фильтрации прекратится.

Таким образом, предлагаемый способ получения пробиотиков имеет следующие преимущества: позволяет уменьшить срок лиофильной сушки, увеличить дозность препарата и срок его хранения за счет улучшения выживаемости микробных клеток в суспензии и сокращения времени вредного воздействия лиофильной сушки, повысить потребительские свойства и усвояемость в организме, а также снизить энергетические затраты на производство пробиотиков.

Способ получения пробиотиков, включающий культивирование производственных штаммов соответствующих микроорганизмов в реакторах из нержавеющей стали при температуре (371) o С при перемешивании и аэрации в питательной среде на гидролизатах белковых субстратов с добавками аммиака, глюкозы в течение 6-7 ч при рН среды 5,5-8,0, розлив полученной микробной массы в ампулы или флаконы, ее замораживание ниже эвтектической зоны и последующую лиофильную сушку отличающийся тем, что перед розливом осуществляют концентрирование микробной массы на керамических фильтрах с отсечением 0,2-0,4 мкм при подаче микробной массы тангенциально поверхности фильтрации.

TK4A - Поправки к публикациям сведений об изобретениях в бюллетенях "Изобретения (заявки и патенты)" и "Изобретения. Полезные модели"

Напечатано: Адрес для переписки, г. Нижний Новгород, ул. Грузинская, 44, фирма "ИмБио", гл.технологу И.С.Горловой

Следует читать: Адрес для переписки: 119021, Москва, Зубовский б-р, 4, ФГУП "НПО "Микроген", патентно-лицензионный отдел

История изучения пробиотиков - представителей естественной микрофлоры человека. Их характеристика, биологическая роль, фармакологическое действие, показания к применению. Технологический процесс производства препаратов, достижения и перспективы.

Рубрика	Медицина
Вид	курсовая работа
Язык	русский
Дата добавления	21.04.2011
Размер файла	66,6 K

Студенты, аспиранты, молодые ученые, использующие базу знаний в своей учебе и работе, будут вам очень благодарны.

Термины, обозначения и сокращения

2. Общая характеристика и биологическая роль пробиотиков

2.1 Классификация пробиотиков

3. Технология получения пробиотиков

3.1 Пробиотики на основе молочнокислых бактерий

3.2 Технология изготовления биобактона

3.3 Технология изготовления лактобактерина

3.4 Технология производства бифидумбактерина

3.5 Технология производства пробиотиков на основе бактерий рода Bacillus

4. Унификация технологии пробиотиков: достижения и перспективы

Термины, обозначения и сокращения

Пробиотики - живые организмы и/или вещества микробного или иного происхождения, оказывающие при естественном способе введения благоприятные эффекты на физиологические функции, а также на биохимические и поведенческие реакции организма хозяина, оптимизируя его микробиологический статус.

Пребиотики - субстраты, стимулирующие естественную микрофлору.

Синбиотики - рациональная комбинация пробиотика и пребиотика.

рН - кислотность раствора;

ВОЗ - всемирная организация здравоохранения;

ГММО - генетически модифицированные штаммы микроорганизмов.

Проблема неуклонного ухудшения здоровья населения всё больше волнует медицинскую общественность. Несмотря на бурное развитие фармацевтической промышленности, насыщающей медицину огромным количеством лекарственных препаратов, тенденция к увеличению заболеваемости не снижается. Это явилось одной из причин возросшего в последние десятилетия интереса учёных к роли микроорганизмов, обитающих в организме человека, в поддержании его здоровья.

Из продолжающейся более столетия жестокой войны с миром микроорганизмов - эры антибиотиков - медицина перешла в эру пробиотиков, призванную улучшить качество жизни людей за счёт восстановления созданных Природой дружественных взаимоотношений человеческого сообщества с микроорганизмами [11].

2. Общая характеристика и биологическая роль пробиотиков

Пробиотики - препараты, содержащие живые микроорганизмы, относящиеся к нормальной, физиологически и эволюционно обоснованной флоре кишечного тракта. Они положительно влияют на организм хозяина, способствуют восстановлению пищеварения, биологического статуса, иммунного ответа, повышают эффективность вакцинаций. При их применении снижаются заболеваемость, количество фармакологических обработок и связанные с ними материальные издержки. К числу наиболее известных пробиотиков относятся молочно-кислые бактерии, бифидобактерии, стрептококки. Многие из предлагаемых в настоящее время на ветеринарном рынке препаратов рекламируют как пробиотики. Они различны по составу, качеству, фармакологической направленности действия, показаниям к применению. Пребиотики - субстраты, стимулирующие естественную микрофлору, которые в норме поступают в организм животных и птицы в составе рациона. Они не перевариваются и не всасываются в желудке и тонком отделе кишечника, а, попадая в толстый отдел кишечника, используются в качестве питательной среды для нормальной микрофлоры. У млекопитающих в первые дни после рождения основным пребиотическим субстратом является лактулоза, входящая в необходимом количестве наряду с лактозой в состав молока. С переходом на смешанное кормление субстратом, способствующим росту нормальной микрофлоры, становятся элементы клеточных оболочек растений, свеклы, моркови, пектины, отруби и др. Пищевые волокна выполняют и другие важные функции: нормализуют моторику, предотвращают запоры, адсорбируют токсины.

Синбиотики - рациональная комбинация пробиотика и пребиотика. Следует отметить, что многие авторы относят к пробиотикам препараты, состоящие из отдельных структур клеток микробного происхождения, а также метаболиты, органические кислоты и соединения любой природы, способствующие качественному и количественному восстановлению нормальной микрофлоры. Поэтому, выбирая для использования тот или иной пробиотик, необходимо анализировать его состав. Он определяет основные показания к применению и фармакологическиесвойства [9].

Пробиотические препараты можно разделить на несколько основных групп: Дрожжи и продукты их жизнедеятельности являются источником легкоусвояемого полноценного по составу микробного белка, витаминов, имеют низкую себестоимость при производстве, их можно вводить в состав кормов, подвергающихся термической обработке и гранулированию. Фармакологическое действие заключается в повышении уровня перевариваемого белка и витаминов группы В в составе рациона, стимуляции роста и продуктивности животных. Препараты не способны колонизировать (заселять) кишечник, при прекращении их назначения эффект исчезает сразу. Они не восстанавливают нормальную микрофлору желудочно-кишечного тракта, не являются антагонистами патогенной и условно-патогенной микрофлоры, не вытесняют ее, не влияют на колонизационную резистентность и не устраняют дисбактериозы. Используют дрожжи и продукты их жизнедеятельности в качестве источника легкопереваримого белка и витаминов группы В.

Пробиотики, включающие споровые микроорганизмы, чаще В. subtilis. Штаммы в составе пробиотических препаратов отбирают по выраженности антагонистических свойств к патогенной микрофлоре. Они продуцируют большое количество антибиотических и других веществ, подавляющих многие микроорганизмы. Количество антибиотиков, продуцируемых аэробными спорообразующими бактериями рода Bacillus, приближается к 200, а видов В. subtilis около 70. В. subtilis используют в промышленности при производстве антибиотиков класса полимиксины (с бактерицидным действием в отношении грамотрицательных бактерий).

Препараты улучшают переваримость корма, имеют выраженные ферментативные и протеолитические свойства. Их часто рекомендуют вместо антибиотиков для вытеснения патогенных микроорганизмов, что не всегда фармакологически корректно. Антагонистическая активность препаратов на основе В. Subtilis зависит от свойств используемых штаммов продуцировать определенный спектр антибиотиков. При этом иногда проявляется активность даже в отношении патогенных штаммов, которые утратили чувствительность к обычным антибиотикам. Препараты не стандартизируются по антимикробной активности, которая зависит от условий культивирования, питательной среды, поэтому в производственных условиях часто получают вариабельный эффект. Если нет глубокого нарушения микробиоценоза и слизистой кишечника, то нормальная микрофлора может восстановиться самопроизвольно после курса использования пробиотиков, содержащих В. subtilis. В некоторых случаях, иногда при длительном применении такие препараты могут провоцировать развитие дисбактериозов, привыкание и селекцию устойчивых патогенных штаммов, поражающих как кишечник, так и другие органы. Основоположник идеи об использовании живых микроорганизмов для восстановления пищеварения И. И. Мечников установил, что с возрастом в нижних отделах кишечника увеличивается число микроорганизмов с протеолитическими свойствами (то есть гнилостных). Они продуцируют азотсодержащие субстраты с токсическим эффектом. И. И. Мечников в 1907 г. предложил их вытеснять, применяя транзиторно или постоянно обитающие в кишечнике живые молочнокислые бактерии. Препараты используют с лечебной целью при диареях, как источник ферментов для улучшения переваривания корма, в первую очередь клетчатки.

Производители многих препаратов на основе В. subtilis заявляют, что их можно подвергать нагреванию и гранулированию. Следует иметь в виду, что при 100°С гибнет вегетативная форма любого микроорганизма, разрушаются все ферменты, продуцируемые им (являясь белками при нагревании они подвергаются коагуляции). При нагревании сохраняются только споры. Но для этого необходимо, чтобы препарат был изготовлен с достаточным выходом спор (микроорганизм переходит при культивировании в форму споры при специально созданных неблагоприятных условиях, что возможно только при грамотной технологии производства). Так как В. subtilis аэроб, поэтому условия в толстом отделе кишечника животных и птиц, где молекулярный кислород отсутствует, не являются для него оптимальными. Спора в составе гранулированного корма требует для активизации времени. Это надо учитывать, особенно если транзит по кишечнику значительно сокращен во времени в связи с диареей.

?заселяют с первых дней жизни организма животных и птиц нормальной микрофлорой (стимуляция пищеварения, иммунитета, профилактика колибактериоза, сальмонеллеза, других инфекций, вызываемых патогенной и условно-патогенной микрофлорой);

?восстанавливают микробиоценоз и пристеночное пищеварение при инфекционных заболеваниях. Можно использовать одновременно с антибиотиками, если пробиотики включают устойчивые к антибиотикам штаммы (например, лактобифадол). Если штаммы, входящие в препарат, не устойчивы к антибиотикам, то его применяют после антибиотикотерапии для восстановления нормальной микрофлоры. Антагонизм к патогенной флоре проявляется в разной степени у разных препаратов за счет продукции органических кислот, перекисей, низкомолекулярных пептидов. При легких формах диареи иногда достаточно применение пробиотика на фоне ограничения диеты без антибиотиков. Но в промышленном животноводстве и птицеводстве для профилактики распространения инфекции, на наш взгляд, необходима комбинация эффективного антибиотика и пробиотика;

?нормализуют пищеварение при дисбактериозах различной природы, после кормовых отравлений, использования фармакологических препаратов (антибиотиков, антгельминтиков, кокцидиостатиков и др.);

?способствуют повышению иммунитета.

Показания к применению:

?становление нормобиоза в пищеварительном тракте после рождения;

?профилактика и лечение при кишечных инфекциях, дисбактериозах, стимуляция пищеварения, колонизационной резистентности, иммунитета, продуктивности;

?восстановление нормальной пристеночной микрофлоры после применения фармакологических препаратов, вакцинаций, кормовых отравлений;

?повышение продуктивности и эффективности производства.

Пробиотики являются неотъемлемым компонентом при организации фармакологического обеспечения в условиях промышленного животноводства и птицеводства. В настоящее время в России функционируют современные предприятия, использующие новейшие технологии, одновременно восстанавливаются производства с более старым, приобретенным в прошлом оборудованием. Однако во всех случаях отмечают действие факторов, способствующих нарушению нормальной микрофлоры у животных и птицы. Действие патогенетических факторов быстро приводит к функциональным срывам со стороны различных систем и органов; в условиях крупномасштабного производства с высокой концентрацией поголовья на ограниченных территориях создается необходимость многочисленных вакцинаций, что приводит к высокой антигенной нагрузке; вакцинальный и технологический стрессы резко снижают резистентность, способствуют персистенции условно-патогенной микрофлоры в желудочно-кишечном тракте и других биотопах (легкие, мочеполовые пути, кожный покров); многие живые аттенуированные вакцины (особенно из так называемых горячих штаммов) приводят к прямой колонизации клеток кишечника, респираторной и других систем и к поствакцинальным сдвигам в микрофлоре соответствующих областей; резкое возрастание фармакологической нагрузки на животных и птицу. Вопреки сложившимся стереотипам нарушать микробиоценоз могут не только антибиотики, антгельминтики и кокцидиостатики, но и избыточно назначаемые несбалансированные кормовые добавки; существенное ухудшение экологической ситуации. Корма, воздух, вода могут быть дополнительными источниками токсических веществ, пестицидов, которые нарушают слизистую оболочку различных полостей и прямо влияют на микробиоценоз; широкое распространение кормовых микотоксикозов.

Таким образом, действует комплекс факторов, которые нарушают естественные защитные свойства нормальной пристеночной микрофлоры. Питаясь гранулированными, часто обработанными термически кормами, животные в замкнутых помещениях полностью лишены контакта с естественными донорами нормальных микроорганизмов, доступными в природе (почва, насекомые, растения). В связи с циклическими дезинфекциями, бессистемным и длительным использованием антибиотиков, особенно широкого спектра действия, в окружающей среде происходит селекция резистентной к антибиотикам микрофлоры. Часто создается ситуация, которую мы можем сравнить с так называемой стационарной "госпитальной инфекцией" в медицине. Возникли ассоциированные инфекции, которые могут протекать как остро, так и латентно, атипично без высокой смертности.

Естественно, нельзя отказаться от вакцинаций, дезинфекций, применения антибиотиков, антгельминтиков, кокцидиостатиков при соответствующих показаниях. Но восстановить нормальную микрофлору после их применения необходимо. Если слизистая пищеварительного тракта нарушена, эффективное производство невозможно, так как пищевые компоненты корма просто не усваиваются. При выборе пробиотика целесообразно учитывать его фармакологические свойства. При необходимости нормализовать примембранное пищеварение, не следует использовать препараты на основе дрожжей. Сильные антагонисты на основе В. subtilis будут эффективны только при отдельных содержаниях. Нельзя полностью отказаться от антибиотиков, так как возможна реальная угроза распространения инфекции на все поголовье с резким снижением производственных показателей. Препараты, включающие лакто- и бифидобактерии, могут быть неэффективны, если производятся на основе медицинских или фармакологически неактивных в кишечнике животных и птицы штаммов микроорганизмов.

Необходимым условием массового производства препаратов пробиотиков является сохранение их стабильности в течение длительного времени. Бактерийные препараты, содержащие живые организмы, относятся к наименее стойким. На выживаемость микроорганизмов в сухих препаратах влияют следующие факторы:

- регламентированное содержание остаточной влаги;

- наличие защитных сред;

- хранение сухих препаратов в атмосфере, не содержащей кислород.

В целях защиты пробиотиков от кислой среды желудка на таблетированные и капсулированные формы наносят ацидорезистентные покрытия или проводят иммобилизацию бактерий на сорбенте.

Для получения препаратов пробиотиков необходимо иметь штаммы микроорганизма симбионта. Их выделяют из кишечного содержимого здоровых детей и взрослых. Эти штаммы должны обладать следующими свойствами:

- наличие полезного воздействия на организм хозяина, подтвержденным лабораторными исследованиями и клиническими наблюдениями;

- штаммы должны быть идентифицированы с учетом генетических признаков так как для получения пробиотиков разрешены штаммы только определенных видов микроорганизмов;

- при длительном использовании они не должны вызывать побочных эффектов. Штаммы не должны быть непатогенными и нетоксичными;

- наличие колонизационного потенциала, то есть сохранение в пищеварительном тракте до достижения максимального положительного действия (должны быть устойчивы к низким значениям рН, желчным кислотам, антимикробной субстанциям, продуцируемым индогеннлй микрофлорой с адгезией к эпителию соответствующих слизистых оболочек);

- наличие выраженной антагонистической активности по отношению к патогенным и условно-патогенным микроорганизмам;

- наличие стабильных характеристик как в клиническом, так и в технологическом плане;

- наличие высокой скорости роста и размножения в условиях, близких к таковым в кишечном тракте;

- штаммы молочнокислых палочек должны продуцировать преимущественно L(+) – изомер молочной кислоты;

- при введении в больших количествах они должны обладать минимальной способностью к транслокации из просвета пищеварительного тракта во внутреннюю среду макроорганизма;

- наличие четкой физиолого-биохимической и генетической маркировки как для исключения фальсификации, так и для периодического контроля идентичности свойств исходных и производственных культур.

Удовлетворяющие всем этим требованиям штаммы поступают в контрольный институт, откуда их передают в фармацевтическое производство с соответствующими документами, отражающими их характеристики [6].

В заводских лабораториях штаммы высеивают на искусственные питательные среды, проверяют их соответствие паспортным данным (род, вид, биологические свойства). После этого их используют для получения препаратов пробиотиков. В условиях промышленного производства эти штаммы рассеивают и получают отдельные колонии, которые затем пересевают на агаризированные или жидкие питательные среды (например, молочнокислые бактерии хорошо растут в обезжиренном молоке).

Бифидобактерии, лактобациллы, энтерококки – это ауксотрофы. Они не могут сами синтезировать аминокислоты, пуриновые и пиримидиновые основания, витамины, поэтому их должна содержать питательная среда, в которой они выращиваются. Для культивирования этих бактерий используется сырье, разрешенное в пищевой промышленности, так как препарат, выращенный на этих средах, используется для внутреннего применения.

Источником аминокислот обычно служит белок молока (казеин), который гидролизуют с помощью ферментов (трипсина и пепсина) и получают, соответственно триптол или пептол. Как источник витаминов, а также пиримидиновых и пуриновых оснований используют дрожжевой экстракт, который получают из дрожжей Saccharomyces (пивных либо пекарстких). В качестве микроэлементов используют соли магния, марганца, цинка, которые добавляют в питательную среду для культивирования молочнокислых бактерий. Источником энергии служит лактоза или глюкоза.

Молочнокислые бактерии культивируют от 8 до 16часов, собирают штаммы в той фазе роста, при которой выживание клеток будет наиболее длительным. Это обеспечит длительное хранение полученного препарата.

После процесса культивирования получают бактериальную суспензию, содержащую в 1 мл 109 и более клеток. Эти клетки собирают, используя поточные центрифуги или сепараторы, в которой образуется похожая на сметану с кремовым оттенком масса со специфическим запахом кислого молока. Раствор криопротекторов (вещества белковой природы - обезжиренное молоко или желатин, углеводы – лактоза, сахароза) добавляют в проточную массу и получают густую суспензию клеток, которую разливают в ампулы.

Затем их замораживают в жидком азоте и подвергают лиофильной сушке. Сухая масса приобретает пузырчатый вид. Ее измельчают и определяют титр, в соответствии с которым вносят во флаконы или смешивают с культурой другого штамма.

Для увеличения сроков жизнеспособности бактерий показана сублимационная сушка, проходящая в условиях низкой температуры (-400ºС) и глубокого вакуума.

Укупорку сухих биопрепаратов в виду их гигроскопичности производят под вакуумом или в токе инертного газа.

Велика защитная роль нормофлоры в обеспечении здоровья, поэтому нарушение равновесия между отдельными видами микроорганизмов в местах их постоянного обитания за счет более интенсивного размножения или гибели какого-либо вида может повлечь нарушение гомеостаза с соответствующими последствиями патологического характера. Дисбиотические состояния приводят к изменениям количественного и качественного состава нормофлоры человека.

Нормальная микрофлора кишечника в процессе эволюции приобрела исключительно важную роль в формировании колонизационной резистентности организма.

Одним из главных механизмов защиты от колонизации условно-патогенными и патогенными бактериями является присутствие в организме достаточного количества собственной полезной микрофлоры.

Нормальная микрофлора кишечника играет важную роль в конверсии желчных пигментов м желчных кислот, абсорбции питательных веществ и продуктов их расщепления. Ее представители продуцируют аммиак и другие продукты, которые могут адсорбироваться и участвовать в развитии печеночной комы.

Нормофлора кишечника выполняет и регулирует многие функции организма, которые можно уподобить работе лаборатории, осуществляющей многие сотни биохимических процессов.

Поэтому очень важно поддерживать нормальную работу микрофлоры организма человека.

1. Альбертс Б. Молекулярная биология клетки: Пер. с англ. / Б. Альбертс, Д. Брей, Дж. Льюис. – М.: Мир, 1994. – Т.1. – 515с.

2. Барзашка – Попова С.Н. Коррекция микрофлоры кишечника при дисбактериозе с помощью лактобацилл / С.Н. Барзашкина-Попова: Автореф. Дис. …к.б.н. – М., 1990. – 22с.

3. Биотехнология: Учебное пособие для вузов / Под. ред. Н.С. Егорова. – М.: 1987.

4. Качура В.И. Способы высушивания молочнокислых бактерий // Виноделие и виноградорство СССР.- 1985. – №2. – С. 49-50.

5. Михайлов И.Б. Клиническая фармакология / И.Б. Михайлов. – СПб., 1998. – 473с.

6. Промышленная технология лекарств: В 2-х т. / Под. ред. В.И. Чуешова. – Харьков: НФАУ, МТК-книга, 2002, - Т.1. – 557с.; Т.2. – 714с.

7. Северин С.Е. Биохимия и медицина – новые подходы и достижения / С.Е. Северин. – М.: Русский врач, 1998. – 94 с.

8. Сорокулова И.Б., Белявская В.А. Рекомбинантные пробиотики: проблемы использования в медицине и ветеринарии.//Вест.Рос. АМН. – 1997. - №3 – с.17-19.

Раздел: Медицина, здоровье
Количество знаков с пробелами: 21228
Количество таблиц: 0
Количество изображений: 0

Зарегистрируйся, чтобы продолжить изучение работы

Разработка и внедрение в практику ветеринарии новых высокоэффективных препаратов отечественного производства для лечения и профилактики болезней животных представляет собой задачу, актуальность которой не вызывает сомнений.
По мнению большинства специалистов, основополагающим принципом при создании пробиотиков является использование только микроорганизмов
Но если на этом пути не возникают трудности с отнесением к безусловно нормальной микрофлоре некоторых основных групп микроорганизмов, чаще всего присутствующих в составе микробиоценоза кишечника в больших количествах (например, лакто- и бифидобактерий), то нередко очень по разному трактуется оценка содержания в микробиоценозе меньших по количеству, но не менее важных по физиологической активности некоторых экзогенных бактерий.
Степень изученности. В разработке данной темы были использованы работы таких авторов как: Беккер М.Е., Вакула В., Дебабов В. Г., Калёнов С. В., Клунова С. М., Никишова Е. А., Павлинова И. И., Сазыкин Ю. О., Федосеев К. Г. и др.
Целью данной работы является изучение технологии производства пробиотиков, исходя из поставленной цели, были определены следующие задачи:
- Рассмотреть понятие и виды пробиотиков;
- Выявить технологию получения пробиотиков.
Структура данной работы состоит из: введения, 3 глав, заключения и списка используемой литературы.
1.Понятие виды
Пробиотики – комплекс микроорганизмов. являются полезными просто для здоровья. основном бактерии. дополняют . Эти составляют микрофлору . Именно их кишечник с достаточно объема веществ потребляемой пищи. кишечника, бактерии еще влагалище во .
Условно делятся две группы1:
-.
-Бифидобактерии.
они содержатся препаратах-. Но понимать, в препарате содержание . Они сочетаться разных и в форме. при патологиях назначают пробиотики. , спешим ваше , что такой должен . Ведь – это -таки средство. вы назначать самостоятельно, ошибиться том, именно бактерия вашему . Тут учитывать заболеваний общее организма. каждой своя . Одни продвигать по системе, укрепляют , третьи расщепить и .д.
более разберемся, такое . Не ждать него . Они являются от заболеваний. и их стоит. правильном они могут организм. общем выделить направлений действия:
- антител поддержания ;
-препятствие кишечника других организмами ;
-угнетение патогенной ;
-укрепляют кишечника;
- патогенной синтезировать соединения;
- разрушить жизнедеятельности микрофлоры;
- источником группы (они важны многих в , здоровья системы, , предотвращения ) 2.
Как , они очень функции.
2. получения
Изобретение к промышленности, частности производству , применяемых качестве средств дисбактериозе, , заболеваниях -кишечного . Производят производственных соответствующих в из стали температуре (371) при и в среде гидролизатах субстратов добавками , глюкозы течение 6-7 при среды 5,5-8,0. розлив микробной в или , ее ниже зоны последующую сушку, розливом концентрирование массы керамических с 0,2-0,4 мкм подаче массы поверхности . Изобретение уменьшить лиофильной , увеличить хранения , а снизить затраты.
относится медицинской , в к препаратов-, применяемых качестве средств дисбактериозе, , заболеваниях -кишечного , а в профилактического .
Наиболее к по сущности достигаемому , выбранным качестве , является получения , описанный книге по и делу, ред. .Н. , Медицина, 1978, 440 3.
Способ пробиотиков (, лактобактерина, ) включает производственных соответствующих в из стали температуре 371oС перемешивании аэрации питательной на белковых с добавками течение 6-7 при среды 5,5-8,0. массу разливают ампулы флаконы лиофильной . Предварительное микробной ведут контролем температур, глубину ниже зоны. замороженного в камерных осуществляют остаточном до 5-10 рт. . до влажности продукта 2-4%.
способ пробиотиков высокими затратами стадии сушки. известного является продолжительность лиофильной и, следствие, от 10 30% жизнеспособных .
Задача, предлагаемым , - совершенствование получения .
Технический от изобретения в срока сушки, дозности и его за повышения микробных в препарате, также энергетических на пробиотиков.
результат тем, в получения , включающем производственных соответствующих в из стали температуре 371oС перемешивании аэрации питательной на белковых с добавками ( растворы , глюкозы) течение 6-7 при среды 5,5-8,0, полученной массы, замораживание контролем температур последующую сушку, розливом концентрирование массы керамических с 0,2-0,4 мкм подаче массы поверхности 4.
Способ следующим . Живые микроорганизмов (, лактобацилл, ) культивируют реакторах нержавеющей при 371oС при и воздухом азотом питательной на белковых , например гидролизат - 11%, дрожжевой - 67% с добавками , аммиака, в 6-7 часов рН 5,5-8,0. После микробную направляют концентрирование керамических с 0,2-0,4 мкм движении массы поверхности , например, "cross ", затем розлив ампулы флаконы. осуществляют контролем температур, , с компьютера, глубину ниже зоны. сушку субстрата сублимационных установках при давлении 510 мм . ст. остаточной готового 1-3%5.
Пример 1.
микробной лактобацилл при 371oС при и воздухом подаче субстрата ( гидролизата) добавками в 9 часов

Читайте также: