Правила работы со световым микроскопом кратко

Обновлено: 05.07.2024

При работе с микроскопом необходимо соблюдать операции в следующем порядке:

1. Работать с микроскопом следует сидя;

2. Микроскоп осмотреть, вытереть от пыли мягкой салфеткой объективы, окуляр, зеркало;

3. Микроскоп установить перед собой, немного слева на 2-3 см от края стола. Во время работы его не сдвигать;

4. Открыть полностью диафрагму, поднять конденсор в крайнее верхнее положение;

5. Работу с микроскопом всегда начинать с малого увеличения;

6. Опустить объектив 8 х в рабочее положение, т. е. на расстояние 1 см от предметного стекла;

8. Положить микропрепарат на предметный столик так, чтобы изучаемый объект находился под объективом. Глядя сбоку, опускать объектив при помощи макровинта до тех пор, пока расстояние между нижней линзой объектива и микропрепаратом не станет 4-5 мм;9. Смотреть одним глазом в окуляр и вращать винт грубой наводки на себя, плавно поднимая объектив до положения, при котором хорошо будет видно изображение объекта. Нельзя смотреть в окуляр и опускать объектив. Фронтальная линза может раздавить покровное стекло, и на ней появятся царапины;

10. Передвигая препарат рукой, найти нужное место, расположить его в центре поля зрения микроскопа;

11. Если изображение не появилось, то надо повторить все операции пунктов 6, 7, 8, 9;

12. Для изучения объекта при большом увеличении сначала нужно поставить выбранный участок в центр поля зрения микроскопа при малом увеличении. Затем поменять объектив на 40 х, поворачивая револьвер, так чтобы он занял рабочее положение. При помощи микрометренного винта добиться хорошего изображения объекта. На коробке микрометренного механизма имеются две риски, а на микрометренном винте - точка, которая должна все время находиться между рисками. Если она выходит за их пределы, ее необходимо возвратить в нормальное положение. При несоблюдении этого правила, микрометренный винт может перестать действовать;
13. По окончании работы с большим увеличением, установить малое увеличение, поднять объектив, снять с рабочего столика препарат, протереть чистой салфеткой все части микроскопа, накрыть его полиэтиленовым пакетом и поставить в шкаф.

Способы приготовления препаратов для микроскопирования

Для изучения микроорганизмов готовят препараты висячей и раздавленной капли.
Приготовление висячей капли.

Приготовить суспензию из исследуемого материала и мясо-пептонного бульона. Бактериологической петлей в центр покровного стекла нанести небольшую каплю приготовленной суспензии.

Взять специальное стекло с луночкой в центре и смазать ее края вазелиновым маслом. Луночкой предметного стекла накрыть каплю исследуемого материала так, чтобы капля находилась в центре луночки. Предметное стекло слегка прижать и быстро перевернуть его. При правильном приготовлении препарата капля свисает в луночку.

2. Приготовление раздавленной капли.

Каплю приготовленной суспензии нанести на предметное стекло. Сверху предметного стекла положить покровное стекло.

Приборы и посуда: микроскоп, спиртовки, бактериологические петли, пипетки, предметные и покровные стёкла, фильтровальная бумага

Материалы и реактивы: жидкие дрожжи, йод, йодид калия, вода

Порядок выполнения работы:

1.Приготовление раствора Люголя.

Препараты приготовляют не окрашенными и окрашивают раствором Люголя. Для этого взять навески 1 г йода и 2 г йодида калия, растворить в 300 мл воды.

2. Приготовление препаратов дрожжей.

На 1 объем жидких дрожжей взять 3—5 объемов воды. Смесь энергично взболтать и оставить на 1 мин.

3. Микроскопирование препаратов дрожжей.

Из верхнего слоя дрожжевой жидкости стеклянной палочкой перенести небольшую каплю на предметное стекло. Накрыть покровным стеклышком и слегка прижать его сухим концом стеклянной палочки для удаления пузырьков воздуха. Препараты рассмотреть под микроскопом при увеличении в 500—1000 раз (объективы х 40 и х 90).

Микроскопирование препаратов дрожжей позволяет следить за их состоянием и размножением, а также за развитием бактериальной флоры. Молодые и зрелые дрожжи крупнее состарившихся. Оболочка у них едва заметна, вакуоли отсутствуют или очень малы. Они имеют большое количество почкующихся клеток. О старении культуры дрожжей можно судить по следующим признакам: их оболочка имеет вид утолщенного ободка, строение протоплазмы зернистое, она отстает от оболочки, имеются большие вакуоли, присутствуют капельки жира.

4. Микроскопирование препаратов бактерий

Бактерии Дельбрюка представляют собой расположенные попарно палочки длиной 3—7 мкм и более. Колонии округлой формы, беловатого цвета, мелкие, выпуклые. При нарушении нормальных условий культивирования бактерии образуют длинные, местами утолщенные нити.

Микроскопирование проводится аналогично дрожжам.

5. Написать отчет о проделанной работе.

1. Для каких целей используют микроскопирование?

2. Как произвести микроскопирование плесневых грибов?

3. При каких условиях хорошо видны точки роста гиф?

4. Как готовятся препараты микроскопических грибов и дрожжей?

5. Каково устройство биологического микроскопа?

6. Из каких частей и механизмов состоит механическая часть микроскопа?

7. Назовите основные характеристики микроскопа.

Практическая работа № 2

При работе с микроскопом необходимо соблюдать операции в следующем порядке:

1. Работать с микроскопом следует сидя;

2. Микроскоп осмотреть, вытереть от пыли мягкой салфеткой объективы, окуляр, зеркало;

3. Микроскоп установить перед собой, немного слева на 2-3 см от края стола. Во время работы его не сдвигать;

4. Открыть полностью диафрагму, поднять конденсор в крайнее верхнее положение;

5. Работу с микроскопом всегда начинать с малого увеличения;

6. Опустить объектив 8 х в рабочее положение, т. е. на расстояние 1 см от предметного стекла;

10. Передвигая препарат рукой, найти нужное место, расположить его в центре поля зрения микроскопа;

11. Если изображение не появилось, то надо повторить все операции пунктов 6, 7, 8, 9;

Способы приготовления препаратов для микроскопирования

Для изучения микроорганизмов готовят препараты висячей и раздавленной капли.
Приготовление висячей капли.

2. Приготовление раздавленной капли.

Материалы и реактивы: жидкие дрожжи, йод, йодид калия, вода

Порядок выполнения работы:

1.Приготовление раствора Люголя.

2. Приготовление препаратов дрожжей.

На 1 объем жидких дрожжей взять 3—5 объемов воды. Смесь энергично взболтать и оставить на 1 мин.

3. Микроскопирование препаратов дрожжей.

4. Микроскопирование препаратов бактерий

21. Правила работы со световым микроскопом

Изучение клеток микроорганизмов, невидимых невооруженным глазом, возможно только при помощи микроскопов. Эти приборы позволяют получать изображение исследуемых объектов, увеличенное в сотни раз (световые микроскопы), в десятки и сотни тысяч раз (электронные микроскопы).

Биологический микроскоп называется световым, так как он обеспечивает возможность изучать объект в проходящем свете в светлом и темном поле зрения. При работе со световым микроскопом необходимо соблюдать следующие правила.

Микроскоп берут одной рукой за колонку штатива, а другой поддерживают за основание. Брать и поднимать микроскоп за другие детали категорически запрещается.
На рабочем столе микроскоп помещают колонкой к себе. Перед началом работы следует осторожно удалить пыль с оптических частей микроскопа мягкой сухой тканью, не касаясь пальцами линз.
С помощью револьверной насадки устанавливают нужный объектив. Характерный щелчок фиксатора внутри револьвера свидетельствует о центрированном положении объектива. Необходимо помнить, что чем меньше увеличение объектива, тем больше фокусное расстояние. При работе с объективом 8х расстояние между препаратом и объективом около 9 мм, с объективом 40х оно составляет 0,6 мм, и с объективом 90х – около 0, 15 мм.
На предметный столик помещают предметное стекло и закрепляют его клеммами.
Тубус микроскопа опускают вниз с помощью макрометрического винта осторожно, наблюдая за объективом сбоку, и приближают к препарату (не касаясь его) на расстояние, меньше рабочего. Затем, глядя в окуляр, медленным вращением макровинта поднимают тубус до тех пор, пока в поле зрения не появится изображение изучаемого предмета.
Вращением микрометрического винта фокусируют объектив таким образом, чтобы изображение предмета было четким.
При работе с иммерсионным объективом на предметное стекло наносят каплю кедрового масла и, глядя сбоку на объектив, макрометрическим винтом осторожно опускают тубус так, чтобы фронтальная линза объектива погрузилась в масло. Затем, глядя в окуляр, медленным движением макровинта поднимают тубус до тех пор, пока не появится изображение. Для точной фокусировки пользуются микрометрическим винтом, который вращают в пределах одного оборота.

Внимание! Запрещается искать изображение препарата с помощью микрометрического винта.

Препарат рассматривают в нескольких полях зрения, передвигая предметный столик при помощи боковых винтов, или перемещают его рукой на предметном столике. Находят наиболее подходящее поле зрения на участке препарата, на котором микроорганизмы видны отчетливо, в достаточном для просмотра количестве и зарисовывают микроскопическую картину.
При смене объективов следует регулировать интенсивность освещения рассматриваемого объекта. Желаемую степень освещения получают, опуская или поднимая конденсор.

По окончании работы поднимают тубус, снимают препарат с предметного столика, удаляют масло с фронтальной линзы иммерсионного объектива фильтровальной бумагой, смоченной бензином, устанавливают при помощи револьверной насадки объектив в увеличением 8х, кладут на предметный столик кусочек чистой марли и опускают тубус.

2. На предметный столик поместить препарат так, чтобы луч света просвечивал его, и прикрепить зажимами.

3. Смотря в микроскоп, макровинт поворачивать в сторону от себя, чтобы предметный столик отдалялся от объектива, пока не появится чёткое изображение предмета (Если вращать винт в противоположном направлении, то можно повредить препарат или

4. Рассматривая на малом увеличении (увеличение объектива \(4х\)), найти место, где образец является наиболее тонким, т. е. где клетки расположены в один слой.

5. Поставить большее увеличение объектива (\(10x\)) и рассмотреть препарат. Чёткость изображения настраивается микровинтом.

Для того, чтобы ваша работа на занятии была продуктивной и для предупреждения разрушения изучаемых на занятиях гистологических препаратов и микроскопа необходимо соблюдать при микроскопии следующие основные правила:

Необходимо взять из шкафа хранения микроскоп и коробку с гистологическими препаратами с одним номером. Номер записать в альбом. На последующих занятиях вы будете пользоваться только этим комплектом.
Микроскоп устанавливается на левую от вас часть стола (в правой части располагается альбом).
Проверьте, в каком положении находится револьверное устройство микроскопа. Должен быть установлен объектив с малым увеличением (4х или 10х), который обычно используют для начала работы. При правильной установке в определенном положении объектива слышен щелчок и рукой ощущается фиксация револьверного устройства.
Проверьте расстояние от нижнего края объектива до предметного столика микроскопа - оно должно быть не менее 1 см.
Включите источник освещения и проверьте, виден ли в окуляре свет. При отсутствии освещенности поля зрения проверьте исправность источника света, настройку зеркала (если источник освещения внешний), открытие диафрагмы конденсора (если имеется), правильное положение объектива.
При правильном освещении поле зрения микроскопа должно быть равномерно освещено. Темная полоска в поле зрения – окулярная указка, предназначенная для обозначения структур в препарате студентом или преподавателем. Необходимо отрегулировать яркость поля зрения настолько, чтобы освещение воспринималось комфортным для глаза.
Установить гистологический препарат на предметный столик микроскопа. Перед установкой проверить – покровное стекло должно находиться на верхней поверхности предметного стекла. Расстояние от нижнего края объектива до стекла около 1 см, гистологический срез должен быть освещен и находиться непосредственно под объективом.
Проконтролировать, имеется ли изменение цвета в поле зрения окуляра. Если поле зрения остается светлым, необходимо перемещением препарата добиться его изменения до цвета исследуемого препарата.
Используя макровинт микроскопа (большая круглая ручка на станине) добиться появления изображения препарата в поле зрения микроскопа. Микровинтом (малая ручка на станине или круг в основании, площадке микроскопа) добиться максимально возможной резкости изображения микропрепарата.
Для увеличения изображения не касаясь препарата повернуть револьвер с объективом с большим увеличением (20х или 40х) к препарату до защелкивания фиксатора. Осторожно, чтобы не сломать препарат, подстроить резкость изображения микровинтом . При включенном большом увеличении извлекать гистологический препарат из-за возможности его поломки запрещается .
После завершения микроскопии препарата на большом увеличении револьвер микроскопа переводится на объектив с малым увеличением до защелкивания фиксатора и препарат убирается со столика и помещается на свое место в коробке. Микроскоп готов к микроскопии следующего препарата.
После окончания работы микроскоп и коробка с препаратами убирается в шкаф для хранения. Проверяется: револьвер микроскопа включен на малое увеличение, на предметном столике не гистологического препарата, в коробке для хранения препаратов нет свободных мест.
Шкаф для хранения сдается дежурному группы и лаборанту кафедры.

Методические указания к изучению гистологических препаратов:

Рассмотрите в микроскоп сначала под малым, а потом под большим увеличением срез печени, окрашенный гематоксилином и эозином. Обратите внимание на окраску ядер и цитоплазмы печеночных клеток.

Ответьте на вопрос: в какой цвет и какой краской окрасились ядра и цитоплазма гепатоцитов печени?

Рассмотрите срез печени, окрашенный для выявления липидов Суданом черным и сафранином.

Ответьте на вопрос: в какой части клеток локализованы включения липидов и какова форма этих включений?

Рассмотрите срез печени, окрашенный для выявления гликогена кармином по Бесту и гематоксилином.

Ответьте на вопрос: в какой части клетки локализованы включения гликогена и в какой они окрасились цвет?

Рассмотрите срез печени, окрашенный для выявления РНК пиронином.

Ответьте на вопрос: в каких структурах клетки локализованы гранулы РНК, как они окрасились?

5,6 Рассмотрите под микроскопом 2 среза нервной ткани, обработанных разными способами:

а) срез мозжечка, импрегнированный азотнокислым серебром

б) нервные клетки сетчатки глаза, окрашенные метиленовой синью

Ответьте на вопрос: какова форма нервных клеток?

7. Рассмотрите срез костной ткани.

Ответьте на вопрос: какова форма костных клеток?

8 Рассмотрите срез аорты, окрашенный орсеином для выявления эластических волокон.

Ответьте на вопрос: каково направление эластичных волокон в стенке сосуда?

7. ВОПРОСЫ К ИТОГОВЫМ КОНТРОЛЯМ ПО ДАННОЙ ТЕМЕ:

7.1. ВОПРОСЫ ДЛЯ ПОДГОТОВКИ К КУРСОВОМУ ЭКЗАМЕНУ

1. Виды микропрепаратов. Техника приготовления гистологических препаратов. Этапы приготовления. Врачебные этапы: взятие, маркировка и фиксация материала.

2. Техника приготовления гистологических препаратов. Этапы приготовления. Проводка материала и приготовление срезов. Виды микротомов. Окрашивание: цель, основные виды красителей. Заключение среза.

3. Морфометрические методы исследования. Задачи и возможности метода. Автоматизированные системы обработки изображений. Ядерно-цитоплазматическое отношение – как показатель функционального состояния клетки. (Лекционный материал).

4. Проточная цитометрия: основные принципы метода. Проточная ДНК-цитометрия. Задачи и возможности метода. Использование метода для изучения периодов митотического цикла в клетках различных тканей. (Лекционный материал).

5. Проточная цитометрия: основные принципы метода. Метод иммунофенотипирования. Задачи и возможности метода. Использование метода иммунофенотипирования и моноклональных антител для исследования клеточного звена иммунитета. (Лекционный материал).

6. Иммуногистохимический метод исследования. Основные принципы метода. Задачи и возможности метода. Применение иммуногистохимического метода для определения гистогенетического типа ткани. (Лекционный материал).

7.2. ТЕСТОВЫЕ ЗАДАНИЯ ПО ТЕМЕ ЗАНЯТИЯ:

1. Укажите правильное чередование основных этапов приготовления гистологических препаратов:

1) фиксация, промывка, обезвоживание, изготовление срезов, заливка в специальные среды, окрашивание срезов и заключение срезов;

2) обезвоживание, фиксация, промывка, заливка в специальные среды, изготовление срезов, окрашивание срезов и заключение срезов;

3) фиксация, обезвоживание, заливка в специальные среды, промывка изготовление срезов, окрашивание срезов и заключение срезов;

4) фиксация, промывка, обезвоживание, заливка в специальные среды, изготовление срезов, окрашивание срезов и заключение срезов;

5) фиксация, обезвоживание, промывка, изготовление срезов, окрашивание срезов, заливка в специальные среды и заключение срезов.

2. На каком этапе приготовления гистологических препаратов сохраняется прижизненная структура ткани путём быстрой коагуляции её белков:

2) заливка в специальные среды;

4) изготовление срезов;

5) окрашивание и заключение срезов

3. На каком этапе приготовления гистологических препаратов придается контрастность структурам ткани:

3) заливка в специальные среды;

4) изготовление срезов;

5) окрашивание и заключение срезов.

4. На каком этапе приготовления гистологических препаратов придается плотность и однородность взятому материалу:

3) заливка в специальные среды;

4) изготовление срезов;

5) окрашивание и заключение срезов.

5. На каком этапе приготовления гистологических препаратов достигается определённая толщина взятого материала:

3) заливка в специальные среды;

4) изготовление срезов;

5) окрашивание и заключение срезов.

6. Методы окрашивания гистологических препаратов основаны на:

1) различной кислотности (рН) ядра и цитоплазмы;

2) осаждении металлов из солевых растворов на плотных структурах клетки;

3) химическом взаимодействии красящих реактивов с определёнными компонентами клетки;

4) прижизненном окрашивании клеток и тканей;

5) всё вышеперечисленное.

7. Избирательная окраска ядра и цитоплазмы основана на:

1) разнице рН структур клетки;

2) осаждении металлов из солевых растворов;

3) химическом взаимодействии красящих реактивов с определёнными компонентами клетки;

4) прижизненном окрашивании;

5) всё вышеперечисленное.

8. Импрегнация основана на:

1) разнице рН структур клетки;

2) осаждении металлов из солевых растворов;

3) химическом взаимодействии красящих реактивов с определёнными компонентами клетки;

4) прижизненном окрашивании;

5) всё вышеперечисленное.

9. Выявление химического состава клеток и тканей основано на:

1) разнице рН структур клетки;

2) осаждении металлов из солевых растворов;

3) химическом взаимодействии красящих реактивов с определёнными компонентами клетки;

4) прижизненном окрашивании;

5) всё вышеперечисленное.

10. Метод изучения гистологических препаратов, основанный на различном преломлении света в зависимости от плотности структур:

2) фазового контраста;

11. Метод изучения гистологических препаратов, основанный на использовании бокового освещения, при котором видно светлое изображение прозрачных объектов благодаря отражению ими световых лучей:

2) фазового контраста;

12. Метод изучения гистологических препаратов, позволяющий дать количественную оценку содержания веществ, входящих в состав клетки:

2) фазового контраста;

13. Метод изучения гистологических препаратов, основанный на подсчёте числа клеток их размеров, формы, а также их структур:

1. Микроскоп поставьте штативом к себе на расстоянии 5-10 см от края стола. Приведите микроскоп в рабочее положение, наклонив верхнюю часть штатива на 45 градусов. В отверстие предметного столика при помощи зеркала направьте свет.
2. Приготовленный препарат поместите на предметный столик и закрепите предметное стекло зажимами.
3. Пользуясь винтом, плавно опустите тубус так, чтобы нижний край объектива оказался на расстоянии 1-2 мм от препарата.
4. В окуляр смотрите одним глазом, не закрывая и не зажмуривая другой. Глядя в окуляр, при помощи винтов медленно поднимайте тубус, пока не появится чёткое изображение объекта исследования.
5. При смене объектива совершайте переключение плавно, чтобы не оцарапать линзы. Для четкой настройки изображения пользуйтесь винтом.
6. После работы при помощи винтов поднимите тубус. Проверьте, чтобы в отверстие предметного столика был направлен объектив с самым маленьким увеличением. Снимите препарат с предметного столика. Микроскоп приведите в нерабочее положение.
Микроскоп - хрупкий и дорогой прибор: работать с ним надо аккуратно, строго следуя правилам.

12 комментариев:

Да, прибор действительно не из дешевых. Покупали ребенку цифровой Sititek Микрон Space, пусть цена и не запредельная, но каждый месяц такие покупки себе не позволишь. А вообще, любой вещью надо аккуратно пользоваться, все-таки это чей-то труд.

Безусловно, чужой труд уважать надо. Но аккуратность нужна и для безопасности ребенка. А вы ребенку какого возраста покупали? По описанию ваш sititek микрон space понравился, есть полезные отличия и приятные бонусы. Я думаю, школьнику начальных классов уже можно купить.

Я даже рад, что мой цифровой микроскоп sititek не показывает такие ужастики. Не хотелось бы и в микроскоп лишний раз заглядывать.

Читайте также: