Что такое интерферон кратко

Обновлено: 17.05.2024

Содержание

История открытия

В 1957 г. сотрудники Лондонского национального института вирусологи англичанин А. Айзек и швейцарец Дж. Линдеман случайно во время опытов открыли интерферон. Исследователи столкнулись с непонятным явлением: мыши, которых заражали определенными вирусами, не заболевали. Поиски причин этого явления показали, что мыши, не поддавшиеся заражению вирусами, в момент заражения уже болели другой вирусной инфекцией. Таким образом выяснилось, что в организме мышей один из вирусов препятствует размножению другого. Это явление антагонизма вирусов назвали интерференцией (помеха, препятствие, англ.), данное явление встречается при введении в организм двух вирусов одновременно или с интервалом не более 24 часов.

Классификация

Интерфероны человека подразделяют на группы в зависимости от типа клеток, в которых они образуются: α, β и γ. α-Интерфероны включают несколько видов белков с молекулярной массой около 20 кДа. Особое значение имеют интерфероны альфа-2b (для лечения вирусных заболеваний) и бета-1a (применяются для лечения рассеянного склероза).




Механизм действия

Наиболее изученным свойством интерферона является его способность препятствовать размножению вирусов. Он образуется в клетках млекопитающих и птиц в ответ на вирусную инфекцию.

Информация должна быть проверяема, иначе она может быть поставлена под сомнение и удалена.
Вы можете отредактировать эту статью, добавив ссылки на авторитетные источники.
Эта отметка установлена 12 мая 2011.

При заражении клетки вирус начинает размножаться. Клетка-хозяин одновременно с этим начинает продукцию интерферона, который выходит из клетки и вступает в контакт с соседними клетками. Хотя интерферон не обладает прямым противовирусным действием, он способен вызывать такие изменения в клетках, которые препятствуют размножению вируса, формированию вирусных частиц и дальнейшему его распространению. Интерферон действует в нескольких направлениях. Во-первых, он оказывает влияние на клетки, соседние с инфицированной, запуская в них цепь событий, приводящих к подавлению синтеза вирусных белков и в некоторых случаях сборки и выхода вирусных частиц (путём активации олигоаденилатциклазы). В ответ на воздействие интерферона клетки вырабатывают большое количество протеинкиназы R. Этот фермент фосфорилирует фактор инициации трансляции eIF-2, фосфорилированный eIF-2 формирует неактивный комплекс с другим фактором, eIF-2B. В результате уровень белкового синтеза в клетке снижается. После протеинкиназы R активируется синтез рибонуклеазы L, которая расщепляет клеточные РНК и ещё больше снижает уровень белкового синтеза. В целом, интерферон-зависимое подавление трансляции является губительным как для вируса, так и для клетки-хозяина. Помимо влияния на трансляцию, интерфероны способны активировать сотни других генов (они известны как гены, стимулируемые интерфероном), играющих роль в защите клетки от вирусов [2] [3] . Кроме того, интерферон лимитирует распространение вирусных частиц путём активации белка p53, что ведёт к апоптотической смерти инфицированной клетки [4] [5] .

Вторым направлением действия интерферонов является стимуляция иммунной системы для борьбы с вирусами. Интерферон повышает синтез молекул главного комплекса гистосовместимости I и II классов и активирует иммунопротеасому. Высокий уровень молекул главного комплекса гистосовместимости I класса обеспечивает эффективную презентацию вирусных пептидов цитотоксическим Т-лимфоцитам и натуральным киллерам, а иммунопротеасома осуществляет процессинг вирусных пептидов, предшествующий презентации. Высокий уровень молекул главного комплекса гистосовместимости II класса обеспечивает презентацию вирусных антигенов Т-хелперам. Т-хелперы, в свою очередь, выделяют цитокины, которые координируют активность других клеток иммунной системы. Некоторые виды интерферонов, например интерферон-γ, могут прямо стимулировать клетки иммунной системы, такие как макрофаги и натуральные киллеры.

Образование интерферона могут стимулировать не только интактные вирусы, но и различные другие агенты, например некоторые инактивированные вирусы, двухцепочечные РНК, синтетические двухцепочечные олигонуклеотиды и бактериальные эндотоксины.



Биологическая активность интерферона очень высока. У мышиного интерферона она составляет 2·10 9 ед./мг., а одна единица снижает образование вирусов примерно на 50 %. Это означает, что достаточно одной молекулы интерферона, чтобы сделать клетку резистентной к вирусной инфекции. Показано, что молекулы интерферона должны оказывать действие на клетку в течение минимум четырех часов, для того, чтобы в клетке начались процессы борьбы с вирусом, таким образом, многие специалисты не считают эффективным интраназальное применение интерферона для профилактики ОРВИ [6] . Тем не менее, последние исследования показывают, что интерферон, примененный на слизистую оболочку, может действовать в качестве иммунологического адъюванта против вируса гриппа, усиливая специфический ответ иммунной системы. [7] . В США проводятся клинические испытания вакцины против гриппа, которая использует интерферон в качестве адъюванта [8] .

Интерферон вызывает и целый ряд других биологических эффектов, в том числе подавляет размножение клеток. Недавние исследования показали, что в определённых условиях он может препятствовать развитию злокачественных новообразований. Установлено также, что интерферон действует на иммунную систему и вызывает изменение клеточных мембран. Таким образом, интерфероновая система, вероятно, может играть важную роль в защите организма от вирусов.

Побочные эффекты

Интерферон — сложный препарат, который вызывает огромное количество побочных эффектов. Именно поэтому его назначают далеко не каждому действительно в нем нуждающемуся.

В большинстве случаев побочные эффекты возникают при парентеральном применении. Однако их развитие возможно и от свечей, мази либо других фармацевтических форм. Во время курса лечения интерферон вызывает побочные эффекты как со стороны центральной нервной и сердечно-сосудистой систем, так и со стороны желудочно-кишечного тракта, органов чувств, кроветворения и других. Со стороны органов чувств вполне возможно развитие таких побочных эффектов как: ишемическая ретинопатия, паралич нервов, которые отвечают за движение глаз, а также значительное нарушение зрения. Со стороны кожи возможны крапивница, зуд, жжение, сухость кожи, герпес, фурункулез, а также различные сыпи кожного покрова. Большое значение имеют психопатологические нарушения, в том числе интерферон-индуцированные депрессии. До недавнего времени преобладало мнение, что наличие депрессии (в том числе в анамнезе) служит противопоказанием к назначению интерферонов; в случае развития депрессии при применении интерферона, лечение рекомендовалось незамедлительно прекратить, в первую очередь из-за высокого суицидального риска таких состояний. Однако исследования последних лет выявили несомненный терапевтический эффект антидепрессантов для коррекции аффективных нарушений у больных, получающих интерферон [9] .

Интерферон в биотехнологии

Индукторы интерферона

Индукторы интерферона — это вещества природного или синтетического происхождения, стимулирующие в организме человека продукцию собственного интерферона, который способствует формированию защитного барьера, препятствующего инфицированию организма вирусами и бактериями, а также регулирует состояние иммунной системы и ингибирует рост злокачественных клеток. Перспективными интерфероногенами являются низкомолекулярные производные акридонуксусной кислоты (карбоксиметилакридон — CMA), а также различные производные флуоренонов. Примером известнейших лекарственных препаратов-индукторов интерферона являются циклоферон, тилорон. В 2000-2003 годах успешно прошел клинические испытания, а с 2005 года производится отечественный препарат кагоцел.

Препараты интерферона — яркий пример сотрудничества природы и науки, кооперации возможностей человеческого организма для борьбы с болезнетворными вирусами. Благодаря случайному открытию люди получили оригинальный способ поддерживать иммунную систему человека для противостояния инфекции. Изучая особенности этих уникальных белков и разрабатывая оптимальный способ производства препаратов интерферона, ученые смогли больше узнать о работе нашего иммунитета, сложности и взаимосвязи многочисленных процессов, протекающих в человеческом организме. С появлением препаратов интерферона обогатились возможности терапии и профилактики многих серьезных заболеваний, появился целый класс эффективных иммуномодуляторов. В условиях пандемии новой коронавирусной инфекции такие препараты тоже доказали свою эффективность. Мы расскажем о том, как были открыты интерфероны, в чем их особенности и как их используют в медицине.

Что такое интерферон

Интерфероны продуцируются разными клетками — лимфоцитами (это главные клетки иммунной системы), фибробластами (клетки соединительной ткани) и, возможно, другими — исследование интерферонов сейчас активно продолжается.

Открытие интерферона


В Советском Союзе изучение интерферона началось уже в 1959 году. В 1960-м группа ученых под руководством выдающегося микробиолог а Зинаиды Виссарионовны Ермольевой создала первый препарат на основе интерферона, который начали применять для лечения и профилактики тяжелых форм гриппа. В 1962 году в Институте эпидемиологии и микробиологии имени Н.Ф.Гамалеи открылась первая в нашей стране лаборатория по изучению интерферона под руководством Валентина Дмитриевича Соловьева. Этот отдел быстро превратился в центр по изучению системы интерферона, уже свыше 30 лет он активно сотрудничает с Всемирной организацией здравоохранения и ISICR — Международным обществом исследователей интерферонов и цитокинов.

Затем ученые из Швейцарии и США научились клонировать ген интерферона в кишечной палочке, благодаря чему была разработана технология производства этих белков в клеточных культурах и дрожжах. Она не только упростила процесс, но и удешевила его буквально в сотню раз.

Как работает собственный интерферон человека

Интерфероны 1, 2 и 3 типа

Исследуя интерфероны, ученые поняли, что эти белки различаются в зависимости от того, какие клетки их вырабатывают, какие рецепторы для них специфичны, как они ведут себя при различной кислотности среды, какую генетическую структуру имеют. Интерферон, который производится в основном лейкоцитами, получил название интерферон-альфа, производимый фибробластами — интерферон-бета, производимый лимфоцитами и макрофагами — интерферон-гамма.

Все интерфероны делятся на три типа i в зависимости от наличия специфических мембранных рецепторов, физико-химических характеристик, способа индукции и т.д. I тип включает в себя интерферон-альфа, -бета, -каппа, -эпсилон и -мю. Ко II типу относится только интерферон-гамма, к III типу — интерферон-лямбда. Особенно важны для медицины интерфероны-альфа-2b, которые применяются при лечении различных вирусных заболеваний, и бета-1a, используемые для лечения рассеянного склероза.

Интерферон-альфа

Основной источник интерферона-альфа в организме — лейкоциты. Этот интерферон имеет различные подтипы со схожей структурой (например, у человека их около двух десятков). Он повышает устойчивость здоровых клеток к воздействию вируса, активирует иммунный ответ организма. Препараты интерферона-альфа сегодня используются наиболее широко: как противовирусные, противоопухолевые и иммуномодулирующие средства при лечении огромного количества заболеваний, от гриппа до гепатита и даже рака, а также для профилактики различных ОРВИ.

Использование препаратов интерферона

Препятствуя размножению вируса, интерферон, тем не менее, не может совершенно его блокировать. В ходе эволюции, которая продолжалась миллионы лет, болезнетворные вирусы выработали механизмы, позволяющие им буквально штамповать свои копии в огромном количестве. Чтобы замедлить этот процесс, клетки человека должны вырабатывать большое количество интерферонов с самого начала заболевания. Это возможно не всегда, кроме того, выработка интерферонов зависит от общего состояния здоровья и даже возраста: у маленьких детей система интерферонов еще не полностью сформирована, а у пожилых людей работает недостаточно активно. Это одна из причин уязвимости таких пациентов перед вирусными инфекциями. Чтобы помочь организму быстро выстроить интерфероновую защиту, и были разработаны многочисленные препараты экзогенного интерферона, которые используются в качестве иммуномодулятора. Это очень многочисленная группа, включающая как разнообразные торговые наименования, так и различные формы препаратов.

Разработаны разные способы доставки интерферона-альфа в организм для достижения максимального эффекта: внутримышечно (с помощью инъекций) — при лечении системных заболеваний; ректально (с помощью суппозиториев), интраназально (с помощью мазей, капель или гелей, которые наносятся на слизистую оболочку носа в целях профилактики респираторно-вирусных инфекций).

Разные формы препарата Виферон для разных задач

ВИФЕРОН — пример препарата ii широкого спектра действия, чья эффективность основана на комбинации интерферона-альфа и антиоксидантов (витаминов С и Е). Благодаря универсальному действию в отношении множества вирусов, препарат применяется в самых разных областях медицины: его используют для лечения ОРВИ, герпеса, энтеровирусной инфекции, пневмонии, гинекологических заболеваний, хронических гепатитов и т. д. Все эти задачи подразумевают эффективный способ доставки действующего вещества в организм, поэтому препарат выпускается в разных лекарственных формах. Все они относятся к безрецептурным, их легко купить в любой аптеке по доступной цене. Однако нужно помнить, что лекарственную форму и дозировку для лечения вам должен назначить врач.

Свечи, или ректальные суппозитории, содержат от 150 000 ME до 3 000 000 ME человеческого рекомбинантного интерферона-альфа-2b в зависимости от дозировки и применяются для лечения ОРВИ, заболеваний урогенитального тракта (хламидиоза, уреаплазмоза, гарднереллеза и т. д.), вирусных гепатитов В, С, D.


Мазь ВИФЕРОН используется в качестве иммуномодулирующего и противовирусного средства для наружного и местного применения — при лечении герпеса, а также в составе комплексной терапии ОРВИ. Схожее действие имеет гель, который наносится на кожу, слизистую оболочку и небные миндалины, образуя защитный слой — он препятствует проникновению вирусов и укрепляет местный иммунитет. Такая форма препарата используется для терапии и профилактики ОРВИ, ларинготрахеита, лечении рецидивирующего герпеса.

Использование интерферона при производстве препарата ВИФЕРОН

Есть несколько способов получения интерферона: лейкоцитарный, лимфобластоидный, рекомбинантный. В первом случае источником интерферона становится донорская кровь, клетки которой стимулируют с помощью непатогенных вирусов — благодаря этому вырабатывается больше необходимого белка. Именно таким способом получали препараты интерферона первого поколения. Для этого из клеток крови выделяли необходимые белки, очищали их и концентрировали. В результате получался препарат с высоким потенциалом биологического действия, но не лишенный важного недостатка: вероятности возникновения побочных эффектов. Кроме того, это очень дорогой метод.

Для получения лимфобластоидного интерферона используется культура лимфобластных клеток — их тоже всячески стимулируют, чтобы вызвать иммунный ответ. Сегодня также выпускается рекомбинантный интерферон, для получения которого не нужна донорская кровь: он производится с помощью современных биотехнологий, не связан с риском распространения инфекций, доступен по цене для любого покупателя.

Так, например, препарат ВИФЕРОН производится в соответствии с международными стандартами GMP на оборудовании от европейских производителей. Каждый этап производства сопровождается строгим контролем качества в вирусологической, микробиологической и химико-аналитической лабораториях: качество сырья и готовой продукции анализируется по более чем 250 показателям.


Знакомьтесь: интерферон!

Интерфероны имеют широкий спектр действия: противовирусное (к интерферону чувствительны практически все ДНК- и РНК-содержащие вирусы), иммуномодулирующее, радиопротективное, противоопухолевое. Очень важно, что при этом вирусы не могут адаптироваться к действию интерферона.

Интерфероны широко используются для лечения различных заболеваний: гепатита, рака, герпеса, гриппа и ОРВИ и даже в терапии СПИДа. Интерфероны применяются при бактериальных инфекциях, грибковых поражениях.

Обычно препараты интерферона вводятся путем внутривенных инъекций (например, для лечения рака, гепатита). При лечении гинекологических заболеваний используются препараты интерферона в виде свечей, которые вставляются в прямую кишку или во влагалище. При герпесе в зоне поражений (на лице или половых органах) применяется мази на основе интерферона. При гриппе и ОРВИ целесообразно местное использование капель в нос на основе интерферона.

Как работает интерферон?

Интерферон — это белок, который начинает вырабатываться организмом в ответ на вторжение вирусов. Интерферон запускает химические реакции, блокирующие процесс воспроизведения вирусных ДНК и РНК. Кроме того, он влияет на соседние клетки и делает их невосприимчивыми к возбудителю инфекции. Интерферон как бы предупреждает их о наличии опасности. В результате, размножение вирусов в пораженной клетке останавливается, а их попадание в соседние клетки становится невозможным.

Виды интерферона

Интерферон бывает двух видов. Лейкоцитарный (изготовленный из крови человека) и рекомбинантный (полученный генно-инженерным способом). Препараты рекомбинантного интерферона безопаснее, так как они производятся без использования донорской крови. И применяя их, заразиться передающимися через кровь заболеваниями (гепатит, ВИЧ и др.) невозможно.

Интерферон был открыт в 1957 году. С тех пор многочисленные исследования доказали, что биологическая активность интерферона очень высока. За синтез рекомбинантного интерферона американские ученые У. Гилберт, П. Берг Ф. Сэнджер были награждены Нобелевской премией по химии.

Зачем принимать интерферон во время ОРВИ?

В крови здорового человека, как правило, низкий уровень интерферона, но при этом лейкоциты (клетки, отвечающие за синтез интерферона альфа), способны быстро синтезировать интерферон в ответ на вторжение вируса. Но если вирус уже попал в организм, количество интерферона начинает снижаться, так как клетки не могут вырабатывать его постоянно. Поэтому при ОРВИ можно помочь организму бороться с вирусом, принимая препараты интерферона (например, капли в нос гриппферон).


В 1957 г. ученые обнаружили, что клетки, зараженные вирусом, вырабатывают особое вещество, угнетающее размножение как гомологичных, так и гетерологичных вирусов, которое они назвали интерфероном. Если иммунная система обеспечивает белковый гомеостаз и через него устраняет чужеродную генетическую информацию, то система интерферона непосредственно воздействует на чужеродную генетическую информацию, устраняя ее из организма на клеточном уровне, и тем самым обеспечивает нуклеиновый гомеостаз. Система интерферона тесно взаимодействует с иммунной системой.
Интерфероны закодированы в генетическом аппарате клетки. Гены для человеческого фибробластного интерферона располагаются во 2-й, 9-й и длинном плече 5-й хромосомы, а ген, регулирующий транскрипцию - в коротком плече той же хромосомы. Ген, детерминирующий восприимчивость к действию интерферона, локализован в 21-й хромосоме. Ген для α-интерферона располагается в 9-й хромосоме, для γ-интерферона - в 11-й хромосоме.
Система интерферона не имеет центрального органа, так как способностью вырабатывать интерферон обладают все клетки организма позвоночных животных, хотя наиболее активно вырабатывают его клетки белой крови.
Интерферон спонтанно не продуцируется интактными клетками и для образования его нужны индукторы, каковыми могут быть вирусы, бактериальные токсины, экстракты из бактерий и грибов, фитогемагглютинины, синтетические вещества - поликарбоксилаты, полисульфаты, декстраны, но наиболее эффективными индукторами интерферона являются двунитчатые РНК: двунитчатые вирусные РНК и двунитчатые синтетические сополимеры рибонуклеотидов (поли-ГЦ, поли-ИЦ) и др. Индукция интерферона происходит вследствие дерепрессии его генов.
Типы интерферонов. Известны три типа интерферонов человека: α-интерферон, или лейкоцитарный интерферон, который продуцируется лейкоцитами, обработанными вирусами и другими агентами; β-интерферон, или фибробластный интерферон, который продуцируется фибробластами, обработанными вирусами и другими агентами. Оба эти интерферона принадлежат к типу 1. Более сильный γ-интерферон, или иммунный интерферон, принадлежит к типу 2. Имеется несколько подтипов α-интерферона, и общее число их у человека доходит до 25. Сравнительная характеристика интерферонов человека приведена в таблице. Активность интерферонов измеряется в международных единицах (ME). Одна единица соответствует количеству интерферона, которое ингибирует репродукцию вируса на 50 %.
При индукции интерферонов синтезируется два и более его типов. Так, при индукции интерферона на лимфобластах образуется 87 % лейкоцитарного и 13 % фибробластного интерферона, при индукции интерферона на фибробластах имеют место обратные соотношения. Между тремя типами интерферонов могут существовать синергические взаимодействия.

Таблица 2
Сравнительная характеристика интерферонов человека


Свойства интерферонов. Интерфероны обладают видотканевой специфичностью. Это означает, что интерферон человека действует только в организме человека, но неактивен в организме других биологических видов. Конечно, барьеры видовой специфичности не абсолютны: интерферон человека проявляет некоторую активность в тканях человекообразных обезьян, а куриный интерферон в организме близких видов семейства куриных. Однако активность интерферона в гетерогенных организмах резко снижается.
Поэтому можно заключить, что интерфероны, появившиеся у позвоночных, эволюционировали вместе с хозяевами. Интерферон является относительно устойчивым белком и хорошо переносит кислую среду (рН 2,2), что используется для выделения его и очистки. Антигенные свойства интерферонов мало выражены, в связи с чем, антитела к нему удается получить лишь после многократных иммунизаций.
Интерфероны не обладают специфичностью в отношении вирусов и действуют угнетающе на репродукцию различных вирусов, хотя разные вирусы обладают неодинаковой чувствительностью к интерферону. Чувствительность к нему обычно совпадает с индуцирующей активностью к интерферону. Наиболее часто применяемыми индукторами интерферона и тест-вирусами для его титрования являются рабдовирусы (вирус везикулярного стоматита), парамиксовирусы, тогавирусы. Продукция интерферона зависит также от характера применяемых клеток. Существуют клетки, дефектные по нескольким генам интерферона.
Интерфероны оказывают антивирусное, противоопухолевое, иммуномодулирующее и многие другие действия. Наиболее изучено их антивирусное действие, и именно на вирусных моделях выяснены биологические и другие свойства интерферонов.
Интерферон оказывает противоопухолевое действие при парентеральном введении в больших дозах, связанное с подавлением им цитопролиферативной активности. Добавление интерферона к культуре нормальных клеток сопровождается уже через 2 ч угнетением в них синтеза ДНК. При вирусиндуцированных опухолях интерферон угнетает репродукцию онковирусов и одновременно подавляет цитопролиферативную активность.
Интерферон является регулятором различных механизмов иммунного ответа, оказывая стимулирующее или угнетающее действие на иммунные реакции.
Механизм действия интерферона. Интерферон связывается с клеточными рецепторами, находящимися на плазматической мембране, что служит сигналом для дерепрессии соответствующих генов. В результате индуцируется синтез особой протеинкиназы PKs, которая присутствует в следовых количествах во всех клетках млекопитающих и активируется низкими концентрациями двунитчатой РНК, а в зараженных вирусами клетках - вирусными репликативными комплексами.
Протеинкиназа фосфорилирует а-субъединицу инициирующего фактора трансляции eIF-2, и фосфорилирование блокирует активность инициирующего фактора. В результате иРНК, связанная с инициирующим комплексом, не может связаться с большой рибосомальной субъединицей, и поэтому ее трансляция блокируется. Инициирующий фактор eIF-2 в одинаковой степени необходим для трансляции как клеточных, так и вирусных иРНК, однако преимущественно блокируется трансляция вирусных иРНК, связанных с вирусными двунитчатыми РНК-структурами, в результате локальной активации протеинкиназы.
В обработанных интерфероном клетках индуцируется синтез фермента - синтетазы, которая катализирует 2,5-олигоадениловую кислоту, переключающую действие клеточных нуклеаз на разрушение вирусных иРНК. Таким образом, вирусные иРНК подвергаются разрушению нуклеазами. Блокирование интерфероном стадии инициации трансляции и разрушение иРНК обусловливают его универсальный механизм действия при инфекциях, вызванных вирусами с разным генетическим материалом.
Применение интерферонов. Интерфероны применяются для профилактики и лечения ряда вирусных инфекций. Их эффект определяется дозой препарата, однако высокие дозы интерферона оказывают токсическое действие. Интерфероны широко применяются при гриппе и других острых респираторных заболеваниях. Препарат эффективен на ранних стадиях заболевания, применяется местно, например путем закапывания или введения с помощью ингалятора в верхние дыхательные пути в концентрациях до 3∙104-5∙104 ед 2-3 раза в день. При конъюнктивитах интерферон применяют в виде глазных капель. Интерфероны оказывают терапевтическое действие при гепатите В, герпесе, а также при злокачественных новообразованиях. При этих заболеваниях назначают более высокие концентрации. Препарат применяется парентерально - внутривенно и внутримышечно в дозе 105 ед на 1 кг массы тела. Более высокие дозы оказывают побочное действие (повышение температуры, головная боль, выпадение волос, ослабление зрения и т.д.). Интерферон может вызвать также лимфопению, задержку созревания макрофагов, у детей - тяжелые шоковые состояния, у больных с сердечно-сосудистыми заболеваниями - инфаркт миокарда. Очистка интерферона значительно снижает его токсичность и позволяет применять высокие концентрации. Очистка осуществляется с помощью аффинной хроматографии с использованием моноклональных антител к интерферону.
Генноинженерный интерферон. Генноинженерный лейкоцитарный интерферон получают в прокариотических системах (кишечной палочке). Биотехнология получения интерферона включает следующие этапы:
1) обработка лейкоцитарной массы индукторами интерферона;
2) выделение из обработанных клеток смеси иРНК;
3) получение суммарных комплементарных ДНК (кДНК) с помощью обратной транскриптазы;
4) встраивание кДНК в плазмиду кишечной палочки и ее клонирование;
5) отбор клонов, содержащих гены интерферона;
6) включение в плазмиду сильного промотора для успешной транскрипции гена;
7) экспрессия гена интерферона, т.е. синтез соответствующего белка;
8) разрушение прокариотических клеток и очистка интерферона с помощью аффинной хроматографии.
Получены высокоочищенные и концентрированые препараты интерферона, которые испытываются в клинике.
Человеческий лейкоцитарный интерферон, нативный и концентрированный, предназначен для профилактики и лечения гриппа и других вирусных респираторных заболеваний.
Лейкоцитарный интерферон - видоспецифический белок, синтезируемый лейкоцитами человека в ответ на воздействие вируса-интерфероногена. Интерферон не обладает избирательной противовирусной активностью и действует практически на все вирусы.
Для приготовления интерферона используют лейкоциты свежеполученной донорской крови. Под воздействием вируса - интерфероногена лейкоциты, находящиеся в культуральной среде, синтезируют интерферон. Затем лейкоциты удаляют центрифугированием, вирус инактивируют. Препарат является нативным интерфероном. Для получения концентрированного нативный интерферон дополнительно очищают методом хроматографического разделения на колонках с сефадексом.
Интерферон выпускают в сухом виде в ампулах. Нативный сухой интерферон представляет собой пористый порошок серовато-коричневого цвета, который легко растворяется в дистиллированной воде. Растворенный препарат имеет розовато-красный цвет с опалесценцией. Допускается слабый коричневый оттенок раствора. Концентрированный сухой препарат - пористый порошок серовато-белого цвета, также легко растворяющийся в дистиллированной воде. Раствор препарата имеет сероватый цвет с опалесценцией, допустим слабый желтовато-коричневый оттенок. Посторонние примеси содержаться не должны.
Человеческий лейкоцитарный интерферон выпускают вирусологически и бактериологически стерильным. Противовирусная активность нативного препарата должна быть не менее 32 единиц, концентрированного - 100 единиц. Активность определяется титрованием на первичной культуре клеток кожно-мышечной ткани эмбриона человека с вирусом везикулярного стоматита.
Противопоказаний к применению препарата нет. Интерферон нереактогенен, не вызывает побочных явлений.
Препарат хранят при температуре 4 °С. Срок годности 1 год. По истечению его может быть проведен переконтроль в институте, изготовившем данную серию препарата. При сохранении физических свойств и активности срок годности препарата может быть продлен еще на 3 месяца.

Читайте также: