Санитарно показательные микроорганизмы реферат

Обновлено: 05.07.2024

1. Минобрнауки России Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования Оренбургский

2. План:

1.
Понятие о санитарно-показательных микроорганизмах
2.
Бактерии группы кишечных палочек
3.
Энтерококки
4.
Сульфатредуцирующие клостридии
5.
Бактерии рода Proteus
6.
Стафилококки
7.
Дрожжи и бактериофаги
8.
Общие требования в промышленности

3. Санитарно-показательные микроорганизмы должны отвечать следующим основным требованиям:

3
Санитарно-показательные
микроорганизмы должны отвечать
следующим основным требованиям:
должны обитать только в организме людей или животных и
постоянно обнаруживаться в их выделениях;
не должны размножаться или обитать в почве и воде;
сроки их выживания и устойчивость к различным факторам после
выделения из организма в окружающую среду должны быть
равными или превышать таковые у патогенных микробов;
их свойства должны быть типичными и легко выявляемыми для
их дифференциации;
методы их обнаружения и идентификации должны быть
простыми, методически и экономически доступными;
должны встречаться в окружающей среде в значительно
больших количествах, чем патогенные микроорганизмы;
в окружающей среде не должно быть близко сходных обитателей
— микроорганизмов.

4. Общая бактериальная обсемененность:

4
Общую бактериальную обсемененность продуктов
выражают показателем КОЕ, который характеризует
количество
колоний
мезофильных
аэробных
и
факультативно анаэробных м/о, выросших на плотной
питательной среде при посеве 1 г или 1 см3 субстрата и
культивировании посевов при 37 °С в течение 24-48
часов.
В ходе оценки состояния объекта определяют индекс
— количество СПМ в единице объема A (литр, 1 г или 1
кубометр) материала или титр — наименьший объем (в
мл), или весовое количество (в г) материала, в котором
еще
обнаруживаются
санитарнопоказательные
микробы.

5. Бактерии группы кишечных палочек

6. Бактерии группы кишечных палочек

6
Klebsiella pneumoniae
Мазок из чистой культуры Klebsiella pneumoniae,
окраска по Бурри-Гинсу. Видны капсулы — светлые
ореолы вокруг палочковидных бактерий

7. Бактерии группы кишечных палочек

8. Бактерии группы кишечных палочек

9. Энтерококки

9
Энтерококки
Энтерококки являются представителями нормальной
микрофлоры кишечника человека и животных и
выделяются в окружающую среду в довольно
значительных количествах (в 1 г фекалий до 108—109
жизнеспособных особей), но примерно в 10 раз меньше,
чем БГКП.
В настоящее время энтерококки считаются вторым
после БГКП санитарно-показательным микроорганизмом
при исследовании воды водоемов, особенно в местах
рекреации плавательных бассейнов, сточных вод,
почвы, предметов обихода.

10. Энтерококки

10
Энтерококки
К энтерококкам относят два вида стрептококков
семейства Streptococcaceae рода Streptococcus — S.
faecalis (биовар liquetaciens и zymogenes) и S. faecium
(биовар durans).
Enterococcus faecalis light microscopy
Энтерококки в легочной ткани
больного пневмонией

11. Энтерококки

11
Энтерококки
Преимущества бактерий данного рода:
Более устойчивы к химическим и физическим
воздействиям
Наличие избирательных средств
Несложность
видов
дифференциации
от
сходных
Удобны для оценки микробной загрязненности
продуктов, длительно хранящихся при низкой
температуре.

12. Сульфатредуцирующие клостридии

12
Клостридии являются обитателями кишечника
человека и некоторых теплокровных животных и
выделяются в окружающую среду с фекалиями в
сравнительно небольшом количестве — 106 в 1 г.
К
имеющим
санитарно-показательноезначение
относятся главным образом С. perfringens и С.
sporogenes, способные редуцировать сульфит в
сульфитных средах при 45 °С в течение 12—24 ч.
При
определении
санитарно-показательных
клостридии высчитывают количество их в 1 л воды или
в 1 г почвы (индекс клостридии).
Как правило, в не загрязненных фекалиями
образцах почвы клостридии не обнаруживаются.

13. Сульфатредуцирующие клостридии

13
С. perfringens
С. sporogenes
Большим преимуществом С. perfringens перед кишечными палочками как
санитарно-показательными микроорганизмами является быстрая и технически
несложная индикация их в окружающей среде, не требующая последующей
идентификации.

14. Сульфатредуцирующие клостридии

14
Сульфатредуцирующие
клостридии используются в
качестве
санитарнопоказательных
м/о
при
исследовании
пищевых
казеинатов,
колбасных
изделий, икры, специй,
пряностей и т.д.
В
1
г
казеината
допускается не более 200
клеток Cl. Perfiringens .
Clostridium perfringens,
окраска по методу Грама

15. Бактерии рода Proteus

15
Бактерии рода Proteus
Бактерии группы протея широко распространены в природе,
участвуют в процессах аэробного гниения и служат показателем
присутствия органических веществ животного происхождения в воде
водоемов.
Протеи обнаруживаются в испражнениях только у 5—10 % здоровых
людей, причем значительно чаще в летнее время.
Их нередко обнаруживают в различных пищевых продуктах, что в
лучшем случае свидетельствует о гнилостном распаде и порче их.
При массовом обсеменении употребленного в пищу продукта протеи
могут вызвать пищевую токсикоинфекцию.

16. Бактерии рода Proteus

17. Стафилококки

18. Золотистый стафилококк –

19. Стафилококковые поражения кожи

20. Стафилококки

20
Стафилококки
Определенное
количество
исследуемого материала засевают
для накопления стафилококков в
солевой бульон, например: 1 мл (г) в
пробирку с 5 мл среды, инкубируют
при 37 °С в течение 24 ч.
При наличии роста (помутнении
среды) делают высевы на желточносолевой агар для
получения
изолированных колоний, которые
затем
идентифицируют
по
культуральным
свойствам,
морфологии (в мазке по Граму),
ферментации глюкозы и маннита,
наличию плазмокоагулазы.
S. aureus

21. Стафилококки в качестве санитарно-показательных микроорганизмов

21
Стафилококки в качестве
санитарно-показательных
микроорганизмов
Стафилококки
рекомендуются
в
качестве
санитарнопоказательных
микроорганизмов
для
воздуха
закрытых
помещений (особенно хирургических, детских стационаров, в
отделениях реанимации и интенсивной терапии и родильных
отделений).
Стафилококки обладают и большей устойчивостью к
различным химическим и физическим факторам воздействия.
Исходя
из
большей
резистентности
стафилококков
к
дезинфицирующим веществам (особенно препаратам хлора),
(Favero с соавторами) в 1964 г. предложено применять
стафилококки
в
качестве
санитарно-показательных
микроорганизмов загрязненности воды в зонах рекреации
водоемов, плавательных бассейнов и др.

22. Дрожжи и плесени

22
Дрожжи и плесени
В
качестве
санитарнопоказательных
грибов
чаще
используют дрожжи рода Candida,
которые постоянно присутствуют в
организме человека.
Их обнаруживают в выделениях
людей в 23-40 % случаев. Дрожжи
могут находиться на коже, в полости
рта, слюне и в мокроте.
Candida albicans
на кровяном агаре

23. Бактериофаги в качестве санитарно-показательных микроорганизмов

23
Бактериофаги в качестве
санитарно-показательных
микроорганизмов
При исследовании питьевой
воды определяют наличие и
количество колифагов.
Колифаги – бактериальные
вирусы, способные лизировать
кишечные
палочки
рода
Escherichia,
они
являются
индикаторами очистки питьевой
воды
в
отношении
энтеровирусов.

24. Вода

24
В
соответствии
с
действующими
нормативными
документами
контролю
подлежат:
• вода питьевая (центрального
и местного водоснабжения);
•вода плавательных бассейнов;
• вода открытых водоёмов;
• сточные воды;
вода
очищенная
для
приготовления лекарств;
• вода для приготовления
инъекционных
растворов
и
глазных капель

25. Почва

25
Почва
Предупредительный надзор осуществляют:
а) при планировке, строительстве и реконструкции вновь
заселяемых участков и населенных мест;
б) при выборе участков для строительства
лечебно-профилактических
и
аптечных
учреждений,
санаториев, детских
учреждений;
в) при решении вопросов водоснабжения и канализации
населенных территорий;
г) при санитарной оценке пляжей, мест коллективного
отдыха и т.д.
Текущий санитарный надзор осуществляют:
а) при оценке санитарного состояния почвы и ее способности
к самоочищению после загрязнений (например, почву детских
садов, больниц, зон отдыха исследуют 2 раза в год);
б) при контроле за почвенными и биотермическими методами
обезвреживания сточных вод и отбросов A—4 раза в месяц);

26. Требования к микробиологической чистоте почв

26
Требования к
микробиологической чистоте
почв
Категория
почвы
Чистая
Титр
БГКП*
Титр
нитрифицирующих
бактерий
Титр
клостридий
Индекс
термофиль-ных
микроорганизмов**
≥1,0
≥0,1
≥0,001
10² - 10³
Загрязненная
0,9 - 0,01
0,09 - 0,001
0,009 – 0,0001
10³ – 105
Сильно
загрязненная
≤0,0009
≤0,0009
≤0,00009
1 105 – 4 106
Примечание: * - наименьшее количество материала (г), в котором еще
обнаруживаются СПМО ; ** - количество особей СПМО в 1г исследуемой
почвы

27. Воздух

27
Воздух
При санитарно-бактериологическом исследовании
воздуха проводят:
1) определение общей бактериальной обсемененности
воздуха (общее число бактерий в 1 м3);
2) выявление саyитарно-показательных микроорганизмов;
3) по эпидемическим показаниям выделение вирусов и
патогенных бактерий из воздуха закрытых помещений;
4)
при
исследовании
атмосферного
воздуха
дополнительное
определение
качественного
состава
микрофлоры с учетом наличия спорообразующих аэробов и
анаэробов, которые служат показателем загрязненности
воздуха микроорганизмами почвы.

28. Методы отбора проб воздуха для бактериологического исследования

28
Методы отбора проб воздуха
для бактериологического
исследования
1) аспирационные, основанные на активном
просасывании воздуха с помощью различных
приборов;
2)
седиментационные,
основанные
на
принципе механического оседания микробов.
Пробы воздуха берут на уровне сидящего или
стоящего человека, выделяя одну точку взятия проб
на каждые 20 м2 площади.

29. Пищевые продукты

29
Пищевые продукты
Гигиенический контроль пищевых продуктов
предусматривает их оценку по следующим
показателям:
величине общей микробной обсемененности (ОМЧ);
наличию БГКП;
присутствию условно-патогенных бактерий (кишечной
палочки, золотистого стафилококка, антракоидной
палочки, протеев, клостридий);
наличию патогенных микроорганизмов (сальмонелл и
др.);
присутствию специфических возбудителей микробной
порчи продукта.

30. Требования к микробиологическим показателям некоторых пищевых продуктов:

30
Требования к микробиологическим
показателям некоторых пищевых продуктов:
Микробиологические критерии доброкачественности
Вид продукта
Молоко сырое
(высший сорт)
ОМЧ
(КОЕ/г
(мл))
3 105
Количество продукта, в котором не допускается присутствие
бактерий
БГКП
S. aureus
Клостридий
Патогенных (в том
числе сальмонелл)
−
−
−
−
Молоко
пастеризованное
(А)
5 104
1 см3
1 см3
−
−
Кисломолочные
напитки
−
−
1 см3
−
−
00,01г
−
−
−
1г
1г
0,01г
25,0г
Мясо
замороженное
1 104
Колбасные
изделия вареные
1 10
3

31. Заключение

31
Заключение
С
помощью
санитарно-микробиологических
исследований решают вопрос о наличии или степени
вероятности присутствия опасных для человека
микробов или их токсинов в объектах внешней среды
(воде,
воздухе,
почве,
пищевых
продуктах,
лекарствах, различных материалах, оборудовании и
др.).
Комплексное
санитарно-микробиологическое
исследование включает: определение косвенных
показателей неблагополучия — общей микробной
обсемененности (микробного числа), титра или
индекса санитарно-показательных микробов, степени
микробной порчи;

Эндомикробиология наука, которая исследует семиотические взаимоотношения между сочленами микробного населения организма в норме и при патологии. Основные требования, которым удовлетворяют кишечные палочки в качестве санитарно-показательных микробов.

Рубрика Экология и охрана природы
Вид статья
Язык русский
Дата добавления 30.08.2017
Размер файла 9,1 K

Студенты, аспиранты, молодые ученые, использующие базу знаний в своей учебе и работе, будут вам очень благодарны.

В современной микроэкологии человека целесообразно выделить две субдисциплины: экзомикроэкологию и эндомикроэкологию.

Экзомикроэкология исследует взаимоотношения человека (как индивидуума, так и популяции людей) с микроорганизмами окружающей среды. В определенной мере часть этих задач решает санитарная микробиология, которая находится на стыке микробиологии, экологии, эпидемиологии и гигиены. При этом исходят из посылки, что человек и микроорганизмы окружающей среды совместно обитают в определенном участке биосферы (биотопе) с относительно стабильными абиогенными и биогенными характеристиками. Таким образом, в том или ином конкретном биотопе нашей планеты сформировалось и существует подвижное симбиотическое сообщество сравнительно однородной популяции людей и чрезвычайно гетерогенного комплекса микробных популяций.

Эндомикробиология (медицинская микроэкология) исследует симоиотические взаимоотношения между аутомикрофлорой и микроорганизмом, а также между сочленами микробного населения организма в норме и при патологии. На основе новых знаний разрабатываются методы и средства гармонизации этих взаимоотношений в интересах здоровья не только отдельного человека, но и сообщества людей в целом.

Санитарная микробиология -- раздел медицинской микробиологии, изучающий микроорганизмы, содержащиеся в окружающей среде и способные оказывать неблагоприятное воздействие на состояние здоровья человека. Она разрабатывает микробиологические; показатели гигиенического нормирования, методы контроля за эффективностью обеззараживания объектов окружающей среды, а также выявляет в объектах окружающей среды патогенные, условно-патогенные и санитарно-показательные микроорганизмы.

Санитарно-показательные микроорганизмы используют в основном для косвенного определения возможного присутствия в объектах окружающей среды патогенных микроорганизмов. Их наличие свидетельствует о загрязнении объекта выделениями человека и животных, так как они постоянно обитают в тех же органах, что и возбудители заболеваний, и имеют общий путь выделения в окружающую среду. Например, возбудители кишечных инфекций имеют общий путь выделения (с фекалиями) с такими санитарно-показательными бактериями, как бактерии группы кишечной палочки -- (в группу входят сходные по свойствам бактерии родов Citrobacter, Enterobacter, Klebsiella), энтерококки, клостридии перфрингенс. Возбудители воздушно-капельных инфекций имеют общий путь выделения с бактериями (кокками), постоянно обитающими на слизистой оболочке верхних дыхательных путей, выделяющимися в окружающую среду (при кашле, чиханье, разговоре), поэтому в качестве санитарно-показательных бактерий для воздуха закрытых помещений предложены гемолитические стрептококки и золотистые стафилококки.

Различают санитарно-показательные микроорганизмы кишечника (группа А) и верхних отделов дыхат. путей (группа Б). К группе А относятся кишечная палочка, энтерококк, Clostridium регfringens, Proteus mirabilis, Pseudomonas aeruginosa, Lactobacterium bifidum, Lactobacterium plantarum, кишечный и дизентерийный бактериофаги, Bacteroides (Risiella). Присутствие санитарно-показательных микроорганизмов указывает на фекальное загрязнение воды, почвы, пищевых продуктов, а также посуды и инвентаря пищевых предприятий. Группа Б включает зеленящий (a ) стрептококк, гемолитич. (b ) стрептококк, стафилококк, которые учитывают преимущества при исследовании воздуха для косвенной индикации возможного наличия в нём возбудителей воздушно-капельных инфекций.

Санитарно-показательные микроорганизмы должны отвечать следующим основным требованиям:

1. должны обитать только в организме людей или животных и постоянно обнаруживаться в их выделениях;

2. не должны размножаться или обитать в почве и воде;

3. сроки их выживания и устойчивость к различным факторам после выделения из организма в окружающую среду должны быть равными или превышать таковые у патогенных микробов;

4. их свойства должны быть типичными и легко выявляемыми для их дифференциации;

5. методы их обнаружения и идентификации должны быть простыми, методически и экономически доступными;

6. должны встречаться в окружающей среде в значительно больших количествах, чем патогенные микроорганизмы;

7. в окружающей среде не должно быть близко сходных обитателей -- микроорганизмов.

Санитарно-показательные микроорганизмы являются постоянными обитателями поверхностей и полостей человеческого или животного организма. Обнаружение и в объектах внешней среды свидетельствует о загрязнение выделениями человека или животного. Чем обильнее такое загрязнение, тем больше возможность попадания в объект патогенных микробов. Основными санитарно-показательными микроорганизмами в отношении кишечных инфекций, указывающими на фекальное загрязнение внешней среды (вода, почва), считают бактерии группы кишечных палочек (БГКП). В качестве дополнительных показателей при оценке некоторых объектов определяют наличие фекальных стрептококков (энтерококков) и клостридий. микробный санитарный патология семиотический

Кишечные палочки как санитарно-показательные микробы наиболее полно соответствуют требованиям, предъявляемым к таким микроорганизмам. Они являются постоянными обитателями кишечника человека и теплокровных животных, в больших количествах выделяются в окружающую среду. Сроки их выживания во внешней среде немного превышают сроки сохранения патогенных представителей кишечных бактерий в тех же условиях или совпадают с ними.

К БГКП относятся не только эшерихии, но и представители родов цитробактер, энтеробактер, клебсиеллы. Для них характерны следующие признаки: короткие, грамотрицательные, неспорообразующие палочки, на среде Эндо они растут в виде темно-красных колоний с металлическим блеском или без него либо в виде розовых колоний с темным центром; сбраживают лактозу и глюкозу при 37°С в течение 24 ч с образованием кислоты и газа, не обладают оксидазной активностью. Отрицательная оксидазная проба позволяет дифференцировать семейство Enterobacteriaceae от грамотрицательных бактерий семейства Pseudomonadaceae и других водных сапрофитов, обладающих ферментом оксидазой.

Все БГКП попадают во внешнюю среду только из кишечника человека и животных. Наибольшее санитарно-показательное значение в этой группе имеет E. coli, присутствие которой, например, в питьевой воде, рассматривается как признак свежего хозяйственно-бытового загрязнения, несомненно, фекального происхождения.

Присутствие энтерококков считают дополнительным показателем фекального загрязнения воды и других объектов. Однако их выделение требует сред более сложных при приготовлении и растут они медленнее. Энтерококки являются нормальными обитателями кишечника, но выделяются во внешнюю среду в меньших количествах, чем кишечные палочки. Энтерококки быстрее отмирают в воде и почве. Как правило, они не размножаются в этих объектах, что позволяет рассматривать их как показатель свежего фекального загрязнения.

К санитарно-показательным клостридиям относят группу грамположительных, спорообразующих анаэробных палочек, редуцирующих сульфит на сульфит-неомицинполимиксиновой среде (СПН) при инкубации в условиях 45°С в течение 12--24 ч. Эта группа в основном представлена CI. perfringens, которые встречаются в кишечнике большинства людей в значительно меньших количествах, чем кишечная палочка. Клостридии более, устойчивы, чем не образующие спор БГКП и энтерококки. Определение санитарно-показательных клостридий рекомендуют проводить в почве и воде, используемой на предприятиях пищевой промышленности, а также при выборе новых источников водоснабжения.

Санитарно-показательными микроорганизмами загрязнения воздуха закрытых помещений являются стафилококки (Staph, aureus), а также зеленящие и гемолитические стрептококки, постоянно обитающие на слизистой оболочке верхних дыхательных путей и выделяющиеся в воздушную среду при разговоре, кашле, чиханье. Во внешней среде стрептококки сохраняют жизнеспособность в течение примерно тех же сроков, что и возбудители дифтерии, а стафилококки -- даже дольше. Чем большее количество стрептококков обнаруживают в воздушной среде, тем вероятнее возможность заражения человека воздушно-капельными инфекциями. Нарастание обсемененности воздуха Staph, aureus и частое его обнаружение свидетельствуют о санитарно-эпидемиологическом неблагополучии. В лечебных учреждениях вторичным источником обсеменения воздуха Staph, aureus могут быть загрязненные постельные принадлежности, белье, с которых эти микроорганизмы попадают в воздух, Наиболее полную картину воздушно-капельного загрязнения воздуха дает определение и стрептококков и стафилококков. Однако ввиду того, что стрептококки довольно трудно культивировать, в лабораторной практике ограничиваются выделением Staph, aureus.

Подобные документы

Изучение экологии как биологической науки, которая исследует структуру и функционирование систем надорганизменного уровня (популяции, сообщества, экосистемы), в естественных и измененных человеком условиях. Принципы эволюционной теории Ч. Дарвина.

презентация [3,7 M], добавлен 09.06.2019

Экологическое нормирование как учет допустимой нагрузки на экосистему. Сущность вредных веществ и их воздействие на окружающую среду. Принципы системы санитарно-гигиенического нормирования химических веществ, ее основные достоинства и недостатки.

реферат [18,1 K], добавлен 13.02.2014

Оценка загрязнения воздуха и его влияния на человека. Нормативы ПДК. Нормативы допустимых выбросов. Основные загрязнители атмосферы. Меры борьбы с загрязнением. Принципы очистки пылегазовых выбросов. Уточнение санитарно–защитной зоны согласно розы ветров.

курсовая работа [32,3 K], добавлен 09.11.2008

Определение качественного состава микроорганизмов водных экосистем. Бактерии группы кишечной палочки. Грамположительные неспорообразующие кокки. Метод мембранных фильтров. Дрожжевые и плесневые грибы. Санитарно-вирусологический контроль водных объектов.

контрольная работа [40,1 K], добавлен 15.02.2016

Характеристика животноводческого объекта; санитарно-экологическая оценка застройки территории. Расчёт количества образования навоза; класс опасности отходов; определение необходимого объёма хранилищ и площадей сельхозугодий для внесения навоза в почву.

Санитарно-показательные микроорганизмы (СПМ) – это представители нормальной микрофлоры, которые выделяются естественным путем в окружающую среду и там сохраняются, поэтому служат показателями санитарного неблагополучия, потенциальной опасности исследуемых объектов. Так, если на объектах обнаруживают нормальных обитателей кишечника, делают заключение о наличии фекального загрязнения и возможном присутствии патогенных энтеробактерий. Так как патогенных представителей меньше и выделить их труднее, то вначале выявляют санитарно-показательные микроорганизмы в окружающей среде, а после их выявления можно проводить поиск патогенных.

СПМ условно разделяют на 3 группы:

1.Группа А включает обитателей кишечника человека и животных, эти микроорганизмы расценивают как индикаторы фекального загрязнения. В нее входят бактерии группы кишечной палочки (БГКП) – эшерихии, энтерококки, протеи, сульфитвосстанавливающие клостридии (С. perfringens), термофилы, бактериофаги, ацинетобактер, аэромонады.

2.Группа В включает обитателей верхних дыхательных путей и носоглотки. В нее входят a- и b-гемолитические стрептококки, стафилококки (плазмокоагулирующие, лецитиназоположительные, гемолитические и антибиотикоустойчивые).

3.Группа С включает сапрофитические микроорганизмы, обитающие во внешней среде, их расценивают как индикаторы процессов самоочищения. В нее входят бактерии-аммонификаторы, бактерии-нитрификаторы, некоторые спорообразующие бактерии, грибы, актиномицеты, целлюлозобактерии, сине-зеленые водоросли.

Санитарно-показательные микробы должны отвечать следующим требованиям: они должны постоянно содержаться в выделениях человека и теплокровных животных и поступать в окружающую среду в больших количествах; не должны иметь другого природного резервуара, кроме организма человека и животных; после выделения их в окружающую среду, должны сохранять жизнеспособность в течение сроков, близких к срокам выживания патогенных микробов, выводимых из организма теми же путями; СПМ не должны размножаться в окружающей среде; не должны изменять свои биологические свойства в окружающей среде; должны быть типичными, чтобы их диагностика, индикация и идентификация осуществлялась без особого труда.

Санитарно-показательные бактерии окружающей среды.

1.Вода – бактерии группы кишечной палочки (БГКП), энтерококки, стафилококки.

2.Почва – БГКП, энтерококки, термофилы, возбудители газовой гангрены.

3.Воздух – бета-гемолитические стрептококки, стафилококки.

4.Пищевые продукты – БГКП, энтерококки, стафилококки, протей.

5.Предметы обихода – БГКП, фекальные стрептококки, стафилококки.

САНИТАРНО-БАКТЕРИОЛОГИЧЕСКОЕ ИССЛЕДОВАНИЕ СМЫВА С РУК: ЦЕЛЬ И МЕТОДИКА ИССЛЕДОВАНИЯ.

Цель: Научиться брать смыв с рук и проводить санитарно-бактериологическое исследование для оценки санитарного состояния рук. Знать состав среды Кесслера.

День 1: Взятие смыва с рук стерильной увлажненной салфеткой и посев в среду Кесслера для обнаружения E.coli. Инкубация в термостате 44 о С 24 часа.

День 2: Учет роста на среде Кесслера (состав среды Кесслера (МПБ + желчь + лактоза + генцианфиолетовый + поплавок) - (газообразование при 44 0 С).Пересев на среду Эндо.

День 3: Учет роста красных колоний на среде Эндо. Приготовление мазка, окраска по Граму, микроскопия. Оксидазный тест.

МИКРОФЛОРА ВОЗДУХА

Микрофлору воздуха можно условно разделить на постоянную, часто встречающуюся, и переменную, представители которой, попадая в воздух из свойственных им мест обитания, недолго сохраняют жизнеспособность. Постоянно в воздухе обнаруживаются пигментообразующие кокки, палочки, дрожжи, грибы, актиномицеты, спороносные бациллы и клостридии и др., т.е. микроорганизмы, устойчивые к свету, высыханию. В воздухе крупных городов количество микроорганизмов больше, чем в сельской местности. Над лесами, морями воздух содержит мало микробов (в 1 м3 – единицы микробных клеток). Дождь и снег способствуют очищению воздуха от микробов.

В воздухе закрытых помещений микробов значительно больше, чем в открытых воздушных бассейнах, особенно зимой, при недостаточном проветривании. Состав микрофлоры и количество микроорганизмов, обнаруживаемых в 1 м3 воздуха (микробное число воздуха), зависят от санитарно-гигиенического режима, числа находящихся в помещении людей, состояния их здоровья и других условий.

При чихании, кашле, разговоре в воздух выбрасывается множество капелек жидкости, внутри которых содержатся микроорганизмы. Мелкие капельки образуют стойкие аэрозоли и могут часами удерживаться в воздухе во взвешенном состоянии. Заражение бактериями в этом случае происходит воздушно-капельным путем, так передаются грипп, корь, коклюш, легочная форма чумы и др.

МИКРОФЛОРА ВОДЫ

Вода является естественной средой обитания микроорганизмов, она отражает микробный пейзаж почвы, так как микроорганизмы попадают в воду с частичками почвы. В воде формируются биоценозы с преобладанием микроорганизмов, которые адаптировались к определенным условиям. В 1 мл воды количество микробов может превышать несколько миллионов.

Количественный и качественный состав микробиоценозов зависит от физико-химического состояния, температуры, рН, от концентрации минеральных и органических веществ, кислорода, углекислого газа, скорости движения воды, от массивности поступления ливневых и сточных вод.

С экологической точки зрения всю микрофлору водоемов разделяют на две группы: автохтонную (или водную) и аллохтонную, попадающую извне. Автохтонная флора – это микроорганизмы, живущие и размножающиеся в воде. К ним относятся аэробные кокки: микрококки, сарцины; бактерии рода Proteus, рода Pseudomonas; представители рода Leptospira. Анаэробных бактерий в чистых незагрязненных водоемах мало. Микроорганизмы воды играют важную роль в круговороте веществ в природе. Они выполняют роль мусорщиков, расщепляют клетчатку, органические отходы. Вместе с загрязненными ливневыми, талыми и сточными водами в озера и реки попадают представители нормальной микрофлоры человека и животных (кишечная палочка, цитробактер, энтеробактер, энтерококки, клостридии) и возбудители кишечных инфекций – брюшного тифа, паратифов, дизентерии, холеры, лептоспироза, энтеровирусных инфекций и др., поэтому вода является фактором передачи многих инфекционных заболеваний. Некоторые возбудители могут даже размножаться в воде (холерный вибрион, легионеллы).

Вода артезианских скважин практически не содержит микроорганизмов. Микрофлора воды океанов и морей содержит различные микроорганизмы, например, галофильные вибрионы, поражающие моллюски и некоторые виды рыб, при употреблении которых в пищу развивается пищевая токсикоинфекция.

По степени микробного заражения воды различают три зоны: полисапробная зона – сильно загрязненная вода, бедная кислородом, богатая органическими веществами, в 1 мл ее содержание бактерий достигает 1 млн; мезосапробная зона – умеренно загрязненная вода, в ней происходит минерализация органических веществ с активными процессами нитрификации и окисления; олигосапробная зона чистой воды, в ней количество микроорганизмов в 1 мл воды составляет десятки и сотни, E.coli встречается в количестве нескольких клеток в 1 л воды.

МЕТОДЫ ОПРЕДЕЛЕНИЯ ОБЩИХ И ТЕРМОТОЛЕРАНТНЫХ КОЛИФОРМНЫХ БАКТЕРИЙ.

Определение общих колиформных бактерий (ОКБ).При анализе почв, для которых предполагается невысокая степень фекального загрязнения, рекомендуется использовать титрационный метод. В качестве ускоренного метода для ана­лиза слабозагрязненных почв можно использовать метод мем­бранной фильтрации. При анализах проб с предполагаемой высокой степенью фекального загрязнения целесообразно про­водить прямой посев разведении суспензии на поверхность среды Эндо.

Титрационный метод. Из первого разведения почвенной сус­пензии (1:10), прошедшей предварительную обработку, сте­рильной пипеткой берут 10 мл, что соответствует 1 г почвы, и засевают во флаконы с 50 мл жидкой лактозо-пептонной среды или среды Кесслера. Посев меньших количеств (0,01 г; 0,001 г и т.д.) делают по 1 мл из соответст­вующих разведении почвенной суспензии в пробирки с 9 мл той же среды. Посевы инкубируют в течение 48 ч при 37±1 0 С. Через 24±2 ч инкубации проводят предварительную оценку посевов. При отсутствии газообразования и помутнения через 48 ч инкубации выдают отрицательный ответ.

При наличии в посевах признаков роста (помутнения и газообразования или только помутнения) производят высев на среду Эндо и инкубируют в течение 18—24 ч при температуре 37±1 0 С. При наличии роста на поверхности среды Эндо розо­вых или красных колоний, малиновых с металлическим блес­ком или без него проводят микроскопию колоний с последую­щей постановкой оксидазного теста.

Метод мембранной фильтрации. Метод основан на фильтра­ции установленного объема — 5-10 мл почвенной суспензии первого разведения (1:10). Метод фильтрации почвы через мембранные фильтры проводится так же, как и фильтрация воды.

После окончания фильтрования фильтр переносят, не пере­ворачивая его, на питательную среду Эндо с добавлением розоловой кислоты.

Под каждым фильтром на дне чашки делают надпись с указанием объема профильтрованной пробы, номера и даты посева.

Чашки с фильтрами ставят в термостат дном вверх и инку­бируют посевы при температуре 37±1 0 С в течение 24±2 ч.

Если на фильтрах обнаружен рост изолированных типичных лактозоположительных колоний: темно-красных, красных с металлическим блеском или без него или других подобною типа колоний с отпечатком на обратной стороне фильтра, подсчитывают число колоний каждого типа отдельно и подтверждают их принадлежность к ОКБ (наличие оксидазной активности, отношение к окраске по Граму, ферментация лактозы до кислоты и газа).

Прямой поверхностный посев на агаризованные питательные среды. Посев почвенной суспензии в количестве 0,1 или 0,2 ми производят на поверхность среды Эндо шпателем. Посев при анализе сравнительно чистых почв производят из разведений от 1:10 до 1:1000, т.е. от 10 -1 до 10 -3 . При работе с загрязненными почвами обычно используют разведения до 10 -6 . Посевы выращивают в термостате при 37±1°С в течении 24 ч и проводят идентификацию выросших микроорганизмов аналогично тому, как изложено при описании титрационного метода и подсчета количества колиформных бактерий в 1 г почвы. Для этого среднее число колиформных колоний, выросших на чашке, умножают на степень десятикратного разведения. Ре­зультат выражают индексом.

3 . Санитарно-показательные бактерии, определяемые в различных объектах окружающей среды

На основе свойств СМП выделяются представители микрофлоры кишечника и верхних дыхательных путей.

-бактерии группы кишечных палочек (БГКП) –являются основным показателем свежего фекального загрязнения. В эту группу входят палочковидные грамотрицательные неспорообразующие бактерии родов Escherichia, Citrobacter, Enterobacter, Klebsiella, Serratia и некоторые другие. Главным представителем группы является Escherichia coli, выделенная немецким бактериологом Т.Эшерихом в 1885 г. Кишечная палочка долгое время считалась комменсалом желудочно-кишечного тракта человека и теплокровных животных (организмом, питающимся за счет хозяина без особого ущерба для него), однако выяснилось, что она оказывает и полезное воздействие на кишечник макроорганизма: синтезирует витамины группы В, утилизирует остатки пищевых субстратов, является антагонистом по отношению к некоторым патогенам. Такие взаимовыгодные отношения называют мутуалистическими.

Содержание БГКП в объектах и продуктах регламентируется санитарно-эпидемиологическими правилами и нормативами, однако существует ряд объектов, в которых БГКП быть не должно. Это, в частности питьевая вода (артезианская, водопроводная хлорированная, колодезная) и дистиллированная, взятая из дистиллятора, а также смывные воды при проведении контроля эффективности дезинфекционной обработки объекта не ранее 45 мин. И не позднее 1 ч после обработки.

-энтерококки – Enterococcus faecalis, E. faecium. Это диплококки овальной или округлой формы, иногда располагаются цепочками, грамположительные, спор не образуют. Как и БГКП считаются показателями свежего фекального загрязнения. Точнее отражают санитарное состояние объектов благодаря большей устойчивости к действию физических и химических факторов.

- сульфитредуцирующие анаэробы – Clostridium perfringens восстанавливает сульфит до сульфида при температуре 43-45°С и представляет собой крупную неподвижную грамположительную анаэробную палочку с субтермально или центрально расположенной спорой. С испражнениями клостридии попадают в почву, где могут длительно персистировать в виде спор. Их содержание свидетельствует о старом фекальном загрязнении. Наличие Clostridium perfringens в пищевых продуктах и почве может косвенно служить индикатором присутствия других опасных клостридий – возбудителей ботулизма и столбняка.

-бактерии группы протея широко распространены в природе, участвуют в процессах минерализации азотсодержащих органических веществ. В небольших количествах присутствуют в кишечнике человека и животных, их обнаруживают в воде водоемов, сточных водах, почве. Proteus mirabilis, P. vulgaris – грамотрицательные, подвижные, с перитрихиально расположенными жгутиками, неспорообразующие факультативно – анаэробные палочки разной длины. Показателем фекального загрязнения объектов является Proteus mirabilis. P. vulgaris – показатель загрязнения объекта органическими веществами и порчи пищевых продуктов. Его чаще находят в гниющих остатках. Пищевые продукты и воду, содержащие палочки протея, употреблять нельзя.

-кишечный и дизентерийный бактериофаги –колифаги – в качестве СПМ используют бактериофаги кишечных бактерий: эшерихий, шигелл, сальмонелл.

Колифаги – вирусы бактерий кишечной группы, лизирующие клетки своих хозяев во внешней среде. Колифаги – реальные показатели фекального загрязнения, поскольку обнаружение их свидетельствует о присутствии бактерий кишечной группы. Все большее значение колифаги приобретают и как косвенные индикаторы вирусного загрязнения воды.

СПМ верхних дыхательных путей:

-золотистый стафилококк – Staphylococcus aureus, обладает гемолитическими свойствами. При употреблении пищевых продуктов, обсемененных золотистым стафилококком, возникают пищевые отравления вследствие накопления в продуктах энтеротоксина. S. aureus рекомендуется в качестве СПМ воздуха закрытых помещений, его определяют в воде плавательных бассейнов и пищевых продуктах.

Стафилококки обитают на слизистых оболочках верхних дыхательных путей и кожных покровах человека. Они являются показателями санитарного состояния воздуха, т.к в окружающую среду попадают воздушно-капельным путем – со слюной и мокротой при разговоре, кашле, чихании, из гнойных ран. Стафилококки присутствуют и в кишечнике здоровых людей, поэтому могут загрязнять воды водоемов при купании. Относятся к роду Staphylococcus. Это шаровидные, грамположительные бактерии, неподвижны, образуют скопления клеток, напоминающие гроздья винограда.

-гемолитические стрептококки – Streptococcus pyogenes, Str. Viridans

Грамположительные шаровидные бактерии, образующие цепочки разной длины. Стрептококки распространены в организме животных и человека (около 20 видов), среди которых есть представители нормальной микрофлоры тела и возбудители опасных инфекционных заболеваний: скарлатины, рожи, ангины. Они являются обитателями верхних дыхательных путей и присутствуют в больших количествах в полости рта, носа и носоглотке больных и здоровых людей и поэтому могут попадать в воздух помещений со слюной при разговоре, кашле, чихании и т.п. Санитарно- показательное значение имеют гемолитические стрептококки, способные к повреждению красных кровяных телец – эритроцитов, т.е гемолизирующие кровяной агар. Существуют α-гемолитические стрептококки (Str. Viridans), которые неполностью разрушают эритроциты крови и приводят к позеленению кровяного агара (зеленящие стрептококки), и β-гемолитические стрептококки (Streptococcus pyogenes), полностью гемолизирующие кровяной агар и часто выявляющиеся у лиц с острыми и хроническими заболеваниями верхних дыхательных путей.

Для оценки санитарного состояния воздуха закрытых помещений определяют суммарно α- и β-гемолитические стрептококки.

Таким образом, присутствие в определенном титре СПМ в окружающей среде свидетельствует о ее загрязнении выделениями человека или животных. Каждый объект внешней среды исследуется на присутствие определенных СПМ, регламентированных санитарными нормативами РФ (табл.1)

Читайте также: