Сбор и культивирование простейших реферат
Обновлено: 05.07.2024
Требования микроорганизмов к питательным веществам. Выращивание и поддержание жизнедеятельности микробных культур в лаборатории. Типы сред и способы культивирования микроорганизмов. Рассмотрение методов выращивания микробных культур в лаборатории.
| Рубрика | Биология и естествознание |
| Вид | реферат |
| Язык | русский |
| Дата добавления | 14.10.2016 |
| Размер файла | 59,2 K |
Студенты, аспиранты, молодые ученые, использующие базу знаний в своей учебе и работе, будут вам очень благодарны.
Министерство Образования и Науки Республики Казахстан
Казахстанский инженерно-технологический университет
Подготовила: Шайдулинова Айнур
2 курс спец. ПОВ
Проверил: Фалеев Д.Г.
1. Требования микроорганизмов к питательным веществам
2. Типы сред и способы культивирования микроорганизмов
3. Способы культивирования микроорганизмов
3.1 Периодическое культивирование
3.2 Непрерывное (проточное) культивирование
1. Требования микроорганизмов к питательным веществам
Культивирование микроорганизмов - это один из основных приемов в микробиологии. Для роста и развития микроорганизмов в природе и в лабораторных условиях необходимо наличие питательных веществ для энергетических и конструктивных реакций. Требования разных групп микроорганизмов к источникам энергии и химическим элементам определяются их метаболическими возможностями. Выращивание и поддержание микробных культур в лаборатории основано на моделировании естественных условий обитания данного организма в лаборатории, а также на знании особенностей обмена веществ.
Основными биогенными элементами являются углерод, азот, фосфор, кислород, водород, сера. Это компоненты белков, углеводов и жиров, а также нуклеиновых кислот. Эти элементы требуются в значительных количествах (г/л) и поэтому их называют макроэлементами. К макроэлементам также относятся ионы калия, магния, натрия, кальция и железа. Они выполняют в клетке разнообразные функции
Микроэлементы, необходимые в микромолярных количествах, - это ионы таких металлов, как хром, кобальт, медь, молибден, марганец, никель, селен, вольфрам, ванадий, цинк, обычно входящие в состав ферментов и кофакторов. Необходимые для микроорганизмов количества микроэлементов содержатся в обычной водопроводной воде. При работе на дистиллированной воде микроэлементы добавляют специально в виде растворов их минеральных солей.
Источники углерода и азота в среде могут быть как неорганическими соединениями (СО2, N2, карбонаты, нитриты, нитраты, аммонийные соли), так и органическими веществами разной степени сложности и окисленности (сахара, спирты, органические кислоты и аминокислоты, олигосахариды, пептиды и т.д.).
У некоторых микроорганизмов спектр потребляемых органических веществ очень широк (например, у Pseudomonas, Actinomyces), у других - достаточно узок (например, у облигатных метилотрофов Methylobacterium). В то же время, можно найти микроорганизмы, способные использовать сложные неприродные соединения типа пластиков, красителей, пестицидов. У некоторых микроорганизмов потребности в питании так сложны, что они растут только внутри живого организма (например, внутриклеточные паразиты Rickettsia и Chlamydia).
Как правило, лабораторные среды содержат питательные вещества в более высоких концентрациях, чем это присуще природным местообитаниям. Важным условием успешного культивирования является поддержание оптимальных значений таких параметров, как рН, температура, освещенность, аэрация и т.д.
2. Типы сред и способы культивирования микроорганизмов
Разнообразные питательные среды, используемые в микробиологической практике для культивирования микроорганизмов, подразделяются по составу, физическому состоянию и назначению.
По составу среды делятся на натуральные и синтетические. Синтетические среды применяют для изучения обмена веществ у микроорганизмов. Они имеют определенный химический состав с точным указанием концентрации каждого соединения. Натуральные среды применяют для накопления биомассы микроорганизмов и широко используют для первичного выделения из естественных субстратов, поскольку их состав позволяет удовлетворить питательные потребности многих групп микроорганизмов. В них содержатся богатые различными органическими веществами продукты животного или растительного происхождения, имеющие сложный и непостоянный состав. Часто натуральные среды готовят на основе мясо-пептонного бульона (МПБ) и солодового сусла. МПБ - это прокипяченный экстракт мясного фарша с добавлением пептона и поваренной соли. Он богат азотсодержащими органическими соединениями, но обеднен углеводами. Солодовое сусло, напротив, содержит преимущественно углеводы. Его получают путем настаивания размолотого солода в водопроводной воде при постепенном нагревании. Солодом называют пророщенные и высушенные зерна ячменя. В процессе приготовления сусла происходит гидролиз крахмала ячменя и экстракция сахаров в воду. Сусло с разной концентрацией сахаров применяют для выращивания разных групп микроорганизмов.
Жидкие среды представляют собой растворы или суспензии ингредиентов в воде. В качестве сыпучих сред применяют наборы длительно хранящихся сухих компонентов, которые перед работой растворяют или смачивают водой. Это могут быть зерно, отруби, твердые отходы сельского хозяйства и пищевой промышленности. В настоящее время получили широкое распространение порошкообразные синтетические и натуральные среды. Для получения твердых сред в жидкую основу добавляют уплотняющие агенты. Наиболее известными отвердителями являются желатин, агар и силикагель.
По назначению среды подразделяются на универсальные, элективные и индикаторные. Универсальные среды используют для накопления микробных клеток и первоначального выявления видового разнообразия микроорганизмов в смешанных популяциях. Они позволяют поддерживать рост значительного числа микроорганизмов. Элективные среды используют для получения накопительных культур как первого этапа при выделении чистой культуры из природных местообитаний. Для быстрого выявления определенных групп микроорганизмов или особенностей их метаболизма применяют индикаторные среды, содержащие вещество-индикатор, реагирующий изменением цвета на проявление какого-либо свойства организма.
3. Способы культивирования микроорганизмов
3.1 Периодическое культивирование
Особенности роста микроорганизма иногда служат одним из критериев при определении его систематического положения. Микробные клетки в зависимости от условий могут расти в виде суспензии, микроколоний или обрастаний в жидких средах и образовывать колонии, штрихи или газон на твердых средах. Глубинные колонии формируются в толще агаризованных сред в виде чечевичек, тонких пленок или пучков ваты. Поверхностные колонии отличаются большим разнообразием формы, размера, цвета, профиля. Колония может быть прозрачной, плотной, мягкой, хрупкой, врастать в агар, сниматься целиком в виде пленки, тянуться за петлей и т.д. Ее поверхность может быть блестящей или матовой, гладкой или шероховатой, иметь различные выпуклости, исчерченность и т.д. При посеве штрихом (прямой линией по агару) рост бывает обильный или скудный, сплошной или в виде цепочек очень мелких колоний, перистый, древовидный с различной формой края. При развитии культуры в жидких средах развитие микроорганизма может приводить к окрашиванию среды и появлению запаха, образованию пены и пузырьков, появлению помутнения, пленки на поверхности среды или осадка на дне сосуда.
Различают два основных способа культивирования микроорганизмов - периодическое и непрерывное.
При периодическом культивировании клетки помещают в закрытый сосуд определенного объема, содержащий питательную среду, и задают начальные условия.
Постепенно увеличивается плотность популяции, снижается концентрация питательных веществ и накапливаются продукты обмена, т.е. условия существования микроорганизмов изменяются. Периодическую культуру обычно рассматривают как замкнутую систему, переживающую разные фазы развития. микроорганизм культивирование питательный
В экспоненциальной фазе клетки растут и делятся с максимальной скоростью, их рост не ограничен. Обычно такие клетки используют в биохимических и физиологических исследованиях. По мере исчерпания субстратов и накопления продуктов обмена скорость роста снижается (фаза замедления роста) и культура переходит в стационарную фазу, в течение которой процессы деления и отмирания клеток в популяции находятся в динамическом равновесии. Когда исчерпание питательных веществ и накопление продуктов метаболизма преодолеют некие пороговые концентрации, начинается фаза отмирания и число клеток в популяции постепенно снижается.
3.2 Непрерывное (проточное) культивирование
Непрерывное (проточное) культивирование позволяет зафиксировать культуру в какой-то определенной фазе (обычно экспоненциальной). При этом состав среды и условия роста остаются постоянными. Этого добиваются постоянным прибавлением новой питательной среды в сосуд для выращивания и одновременным удалением такого же количества среды с клетками.
Некоторые микроорганизмы способны к пребыванию в особом физиологическом состоянии, при котором живые клетки не дают колоний на пригодных для них лабораторных средах, но под микроскопом наблюдаются как живые. Такое некультивируемое состояние (некультивируемая форма) присуще ряду микроорганизмов в природных местообитаниях, например, возбудителям сальмонеллеза и холеры, находящимся вне организма человека. Механизм перехода в некультивируемую форму и обратно не изучен, но есть данные о том, что этот процесс запрограммирован в геноме микроорганизмов и запускается недостатком питательных веществ в природных эконишах. В природных образцах такие микроорганизмы изучают путем прямого наблюдения и с помощью методов молекулярного анализа состава нуклеиновых кислот образца.
Подобные документы
Питательные среды в микробиологии, их классификация и разновидности, сферы и особенности использования. Культивирование аэробных и анаэробных микроорганизмов. Методы количественного учета микроорганизмов, основные правила и условия хранения их культур.
реферат [24,6 K], добавлен 25.03.2013
Значение воды в жизнедеятельности клетки. Виды микроорганизмов, состав питательной среды, характер обмена и условия существования во внешней среде. Практическое использование микробных ферментов. Питание, дыхание, рост и размножение микроорганизмов.
лекция [603,0 K], добавлен 13.11.2014
Свойства прокариотных микроорганизмов. Методы определения подвижности у бактерий. Участие микроорганизмов в круговороте азота в природе. Нормальная и анормальная микрофлора молока. Культивирование анаэробных микроорганизмов в условиях лаборатории.
шпаргалка [50,2 K], добавлен 04.05.2009
Состав питательных сред для культивирования микроорганизмов. Физиологические функции элементов, используемых для их приготовления. Качественное преимущество промышленных питательных сред. Технология и многостадийный контроль качества их производства.
контрольная работа [27,8 K], добавлен 12.02.2015
Химический состав бактериальной клетки. Особенности питания бактерий. Механизмы транспорта веществ в бактериальную клетку. Типы биологического окисления у микроорганизмов. Репродукция и культивирование вирусов. Принципы систематики микроорганизмов.
Успех проведения лабораторного практикума зависит от наличия раздаточного материала, предлагаемого учащимся для изучения. Ниже приводятся рекомендации по сбору, содержанию, обработке и хранению раздаточного материала. Сбор и приготовление раздаточного материала можно проводить силами учащихся. Для этого им дается определенное летнее задание по сбору и инструкции по приготовлению раздаточного материала
Обеспечить учащихся животными подцарства Простейшие в достаточном количестве можно только культивируя их. Культивировать простейших можно непосредственно в школе (в лаборантской кабинета биологии) или дома у учащихся или членов биологического кружка. Многие простейшие могут обитать совместно в смешанной культуре, но можно приготовить и чистые культуры определенных видов простейших.
Для содержания простейших используется только прозрачная (не зеленая) стеклянная посуда. Использование металлической посуды исключается, так как металл оказывает вредное влияние на животных. Для содержания простейших пригодны обычные банки для консервирования, но предпочтительнее банки с прямоугольным дном, прямоугольные стаканчики, кристаллизаторы, простоквашницы и чашки Петри.
Для культивирования простейших лучше всего использовать дождевую или талую воду. Речную, озерную или прудовую воду перед использованием кипятят и фильтруют либо через густой шелк, либо через бумажный фильтр. Поскольку водопроводная вода хлорируется, она не пригодна для содержания простейших. Если же приходится прибегать к использованию водопроводной воды, то ее предварительно отстаивают в течение 7—10 дней в стеклянном сосуде (при этом воду периодически помешивают стеклянной палочкой). Во время отстаивания хлор постепенно улетучивается, а вода насыщается кислородом. Перед использованием воду фильтруют. Но даже отстоявшейся водой следует пользоваться осторожно, так как можно загубить культуру простейших. По мере испарения воды в сосуд добавляют свежую, сохраняя, по возможности, один и тот же уровень.
Важную роль при разведении простейших играют температура воды и освещение. Наиболее благоприятной является температура 18—23 °С. Необходимо следить за тем, чтобы не было резких колебаний температуры. Многим простейшим необходимо хорошее дневное освещение, поэтому банки с культурой простейших ставят вблизи окна, но при этом нельзя допускать попадания на них прямых солнечных лучей (для защиты можно использовать какие-либо экраны — занавеску, ширму и т.д.).
Нельзя допускать загрязнения воды какими-либо химическими веществами. При взятии проб культуры используют специально отведенные для этой цели пипетки. Взятые для просмотра пробы сливают в дезинфицирующие растворы. Банки с культурами держат закрытыми стеклянными пластинками. Это уменьшает испарение воды и загрязнение культуры пылью. Для сосудов с культурой лучше всего выделить специальное место и не перемещать их, избегая тем самым встряхивания жидкости.
Для культивирования простейших необходимо заранее приготовить питательную среду, богатую бактериями, которые чаще всего служат для них пищей. Существует несколько различных рецептов приготовления питательных сред.
- В стеклянную банку кладут слой сенной трухи или нарезанного лугового сена (можно листьев) толщиной 0,5 см и заливают дождевой или прудовой водой. Банку накрывают стеклом и ставят на окно, но так, чтобы она была защищена от попадания прямых солнечных лучей. Через 3—4 дня в сосуд доливают воду из загрязненного стоячего водоема, на дне которого имеется гниющая растительность. При этом следует захватить со дна немного ила. Через некоторое время на поверхности жидкости в сосуде появляется пленка. Как правило, в приготовленной среде сначала появляются разные мелкие инфузории, затем амебы (их следует искать прежде всего в пленке) и, наконец, инфузории-туфельки (в среднем, через 15 дней после добавления прудовой воды).
- В мешочке из марли прокипятить листья салата, который можно вырастить и на подоконнике. В небольшую банку налить прудовой воды и опустить в нее мешочек с салатом. Через 3—5 дней салат нужно поменять. В этой питательной среде, как правило, появляется большое количество инфузорий.
- На несколько дней положить в воду кусочки жабр или ноги беззубки. Появившихся инфузорий вылавливают пипеткой и переносят в сосуд с салатом.
- Если из грязного водоема с гниющими растениями взять воду вместе с грязью и гнилью, накрыть стеклом и оставить стоять несколько дней спокойно, то через некоторое время можно получить много инфузорий и амеб.
- Если к 200 см 3 питательной среды добавить либо 10—15 капель молока, либо щепотку картофельной муки, либо овсяного (рисового, пшеничного) отвара, то можно получить большое количество крупных простейших. Отвар круп готовится следующим образом: 50—100 г крупы 20—30 мин. кипятить в 1 л воды. Полученный отвар наливают в бутылку, закупоривают ее и доливают в культуру по 5—10 см 3 по мере надобности.
- Готовят два настоя: 1) молодых облиственных веток березы или других деревьев в сырой (не водопроводной) воде; 2) огородной земли (1/4 объема) в сырой воде (3/4 объема). Через 10 дней оба раствора сливают вместе в равных объемах, а затем, через 6—8 дней, вносят в приготовленную питательную среду амеб. Если через каждые 2—3 месяца пересаживать амеб в свежую питательную среду, то их можно иметь в течение всего года.
- Большое количество инфузорий можно получить в настое свиного мозга. 120 г мозга разрезать на кусочки и раздавить в воде, через 12 часов профильтровать через марлю. Добавляя воду, довести объем настоя до 1 л, разлить полученную жидкость в несколько стеклянных банок и добавить в каждую по 1 см 3 сенного настоя с инфузориями. Через 2—3 дня можно получить большое количество инфузорий. Ежедневно следует удалять пленку, образовывающуюся на поверхности жидкости.
- В течение нескольких минут прокипятить зерна риса или пшеницы. Одновременно в другой колбе прокипятить воду, охладить ее, разлить в несколько чашек (например, Петри) и поместить в каждую несколько подготовленных зерен.
Приготовленная любым способом питательная среда в течение 7—10 дней должна оставаться открытой для того, чтобы в ней размножилось как можно больше бактерий.
В лаборантской кабинета биологии можно держать “запущенный” аквариум, в котором для занятий можно найти нужных беспозвоночных. До начала учебного года в аквариум средних размеров насыпают тонкий слой песка (1,5 см) и кладут на него слой грунта с гниющими листьями и веточками (1—1,5 см), взятого со дна пруда. В грунт сажают элодею, рдест и другие водные растения, не промывая их. Они должны занять большую половину аквариума, а свободную от растений поверхность дна засыпают тонким слоем песка. Аквариум заливают прудовой водой и оставляют без ухода, доливая время от времени испаряющуюся воду. В этом же аквариуме можно содержать разных моллюсков, водяных личинок и т.д.
Смешанную культуру простейших готовят приблизительно за месяц до использования ее на занятиях. Периодически культуру просматривают, пробы берут со дна, с поверхности, из середины сосуда, при этом отмечают, в какой банке и в каком месте обнаруживается скопление простейших и каких именно.
В смешанных культурах развиваются разные простейшие, причем их видовой состав постоянно меняется. Поэтому лучше иметь для работы чистые культуры. Для этого несколько капель смешанной культуры или проб воды из водоемов наносят на предметное стекло, не накрывая его покровным. При малом увеличении микроскопа рассматривают приготовленный микропрепарат. С помощью пипетки с сильно оттянутым концом вылавливают нужных животных и переводят в сосуд с питательной средой. Питательная среда должна быть предварительно прокипячена и остужена. Сосуд плотно закрывают стеклом. Периодически берут пробы и наблюдают за развитием простейших. Для сохранения чистоты культуры длительное время животных периодически (примерно раз в месяц) пересаживают в свежую питательную среду.
2019 г.
Обзор научной литературы
1.1Общая характеристика простейших
1.2Значение одноклеточных организмов в природе и жизни человека
1.3 Общая характеристика питательных сред
Одним из главных условий физического развития школьников является сбалансированное питание. Состав и качество продуктов оказывают влияние не только на физическое здоровье, но и на трудоспособность, эмоциональное состояние ученика, способствует укреплению его здоровья и профилактике заболеваний. Наряду с мясными и рыбными продуктами ежедневно на столе должны быть фрукты и овощи. С ними в организм будут поступать почти все необходимые организму витамины, микроэлементы и биологически активные вещества. В целом, школьник должен употреблять не менее 400 г овощей и фруктов в день.
В тоже время, появляются случаи пищевого отравления свежими овощами и фруктами не только из-за большой концентрации нитратов, но и содержания в них патогенных микроорганизмов. В чем кроется причина данного факта?
Плодородие почвы, на которой выращиваются овощные культуры, человек повышает, внося органические удобрения. К таковым относятся растительные и животноводческие отходы или созданные на их основе компосты. Цисты простейших попадают в сад и огород, где загрязняют овощи и фрукты. Так как цисты устойчивы к внешним воздействиям, они могут попадать в организм человека через немытые овощи и фрукты вызывая различные заболевания.
Гипотеза: растительные и животноводческие отходы являются комфортной средой для размножения патогенных простейших.
Цель: Выявление наиболее комфортной питательной среды для выращивания простейших организмов
Задачи:
1.Изучить и проанализировать литературные и электронные источники информации о питательных средах, для выращивания простейших.
2. Изучить различные методики разведения простейших в домашних условиях.
3.Провести эксперимент по созданию питательных сред для роста и развития простейших животных.
4.Сделать вывод на основе проведенного исследования.
Объект исследования – питательные среды (сено, почва, навоз, банановая кожура, вода из лужи)
предмет исследования – колонии простейших
Методы исследования:
Теоретические: изучение и обобщение учебной, научной литературы, материалов периодической печати, электронных источников по вопросу разведения простейших
Эксперимент: создание различных питательных сред для разведения простейших
Статистический: подсчет простейших в разных питательных средах.
1.Обзор научной литературы
1.1. Общая характеристика простейших.
Простейшие таксономическая группа микроскопических, одноклеточных, но иногда объединенных в многоклеточные колонии организмов. Эукариоты. Большинство простейших – гетеротрофы, питаются готовыми органическими веществами, присутствующими в окружающей среде. Однако некоторые виды содержат пигмент хлорофилл и, как растения, способны, используя солнечную энергию, образовывать органические вещества (углеводы) из неорганических, то есть питаться автотрофно. В связи с этим простейших относили то к растениям, то к животным, то выделяли в особую группу. Простейшие считаются самостоятельным подцарством живой природы.
Основные группы простейших:
жгутиковые, передвигающиеся с помощью немногих, но длинных нитевидных придатков (жгутиков);
ресничные (инфузории), использующие для этой цели обычно многочисленные, но короткие волосовидные структуры (реснички);
Простейшие бывают паразитическими, поселяющихся в живых организмах и свободноживущими. Они обитают в самых различных средах – от полярных морей до дождевых тропических лесов и от лишенных света океанических глубин до сияющих на солнце горных пиков. Их постоянно можно встретить даже в таких специфических местах, как кишечник млекопитающих и глаз насекомых.
1.2. Значение одноклеточных в природе и жизни человека
1. В водной среде простейшие являются питанием для мелких животных
2. Простейшие, которые питаются бактериями и органическими остатками очищают водоемы от загрязнений. 3. Простейшие фототрофы насыщают воду кислородом, и уменьшают содержание углекислого газа. 4. Поддерживают плодородие почв и участвуют в почвообразовании.
5. Мел и горные породы состоят из множества микроскопических раковин. Так известные всем горные породы Урала, Крыма, Кавказа содержат тело простейшего древнего животного – фораминифера. Известняки, состоящие полностью из фораминиферов, имеют огромное практическое значение как строительный материал. Из них построены гигантские Египетские пирамиды.
6. Простейшие у человека и животных вызывают тяжелые заболевания: дизентерия, малярия, сонная болезнь, кокцидиоз.
1.3. Общая характеристика питательных сред.
Питательные среды – это субстраты, используемые для выращивания микроорганизмов в лабораториях или в производственных условиях.
Питательная среда должна содержать все вещества необходимые для роста микроорганизмов. Основными компонентами любой питательной среды для культивирования микроорганизмов являются соединения углерода и азота, серы, фосфора и ряда других элементов. Все они должны содержаться в питательной среде в доступной для микроорганизмов форме.
Классификация питательных сред по составу:
1.Натуральные (Естественные) – МПБ, солодовое сусло, дрожжевая среда, картофельная среда, почвенный экстракт – состоят из продуктов животного или растительного происхождения (овощные или фруктовые соки, животные ткани, молоко, мясо, кровь, почва).
на натуральных средах хорошо развиваются многие микроорганизмы, поскольку такие среды содержат все компоненты необходимые для роста и развития, но есть и минусы. Имеют сложный, непостоянный химический состав и мало пригодны для изучения обмена веществ микроорганизмов, их используют в основном для поддержания роста культур микроорганизмов.
2. Синтетические – в состав среды входят лишь соединения определенного химического состава, взятые в точно указанных количествах. Синтетические среды широко используются при исследовании обмена веществ, физиологии и биохимии микроорганизмов для роста или усиления биосинтеза какого-либо продукта жизнедеятельности.
3. Полусинтетические – главным компонентом этих сред являются соединения известного химического состава – углеводы, соли аммония, нитраты, фосфаты. Их используют в промышленной микробиологии для получения аминокислот, витаминов, антибиотиков
Требования, предъявляемые к питательным средам:
1.Быть питательными – содержать в легко усвояемом виде все вещества, необходимые для удовлетворения пищевых и энергетических потребностей бактерий.
2. Оптимальное рН – концентрация водородных ионов, только при оптимальной реакции среды, влияющей на проницаемость оболочки, микроорганизмы могут усваивать питательные вещества (норма рН 7,2-7,4)
3. Изотоничность – осмотическое давление в среде должно быть таким же, как внутри клетки в норме соответствует 0,5% раствору натрия хлорида.
4. Стерильность – посторонние микроорганизмы препятствуют росту исследуемой культуры.
2. Методика исследований
Проведение эксперимента по разведения простейших проводится в соответствии с общими правилами. (Приложение 1)
1. Подготовка питательной среды
Цель: создание благоприятной среды для разведения простейших
Оборудование: стеклянные стерильные банки (0,5л) – 5 штук, сенная требуха, почва, сухой навоз, ил с мутной водой из лужи, банановая кожура.
Ход эксперимента:
1. В 4 стерильные стеклянные банки (образцы №1 - №4), налита очищенная вода (300мл.), в 1 банку- вода из лужи (образец №5)
2. В подготовленную тару добавила: №1 - сенную требуху, №2- почву №3 - сухой навоз, №4 - банановая кожура, №5 - вода из лужи возле дома.
3. Банки помещены на подоконник в светлой комнате и накрыты стерильными крышками
- Для учеников 1-11 классов и дошкольников
- Бесплатные сертификаты учителям и участникам
Министерство образования и науки РФ
Муниципальное общеобразовательное учреждение
Даурская средняя общеобразовательная школа
Тема: Культивирование инфузории-туфельки.
Ляхова Виктория Сергеевна
Грехова Надежда Сергеевна
учитель биологии и химии
ГЛАВА 1. Изучить инфузорию-туфельку по различным источникам информации……4-6
Тип инфузории. Общая характеристика………………………………………………4
Особенности питания и размножения … … … … … … … ……………………….5-6
ГЛАВА 2. Выяснить методы культивирования инфузории-туфельки……………………..7
2.1 Особенности культивирования инфузории- туфельки… ………………………………..7
3.2 Опыт № 2 Культивирование инфузории – туфельки в молоке………………………..9-10
3.3 Опыт № 3 Культивирование инфузории – туфельки на банановой кожуре………. 10-11
3.4 Опыт №4 Культивирование инфузории в рисовом растворе……………………………11
3.5.Опыт № 5 Культивирование инфузории – туфельки в аквариумной воде……………..11
3.6 Опыт №6 Культивирование инфузории туфельки в растворе ромашки………………12
3.7 Опыт № 7 Культивирование инфузории – туфельки на дрожжах………………………12
3.8 Опыт № 8 Культивирование инфузории – туфельки с использованием химических реактивов…………………………………………………………………………………….13-14
Методы исследования: поиск, изучение и анализ теоретического материала, проведение опытов, наблюдение, описание и сравнительный анализ полученных данных.
Полученные данные: В ходе работы мы рассмотрели методы культивирования инфузории- туфельки. Опробовали методы культивирования инфузории – туфельки в разных растворах и выбрали наиболее эффективные.
Объект исследования: Инфузория-туфелька.
Предмет исследования: Условия выращивания инфузории – туфельки.
1.Изучить методики по выращиванию инфузории-туфельки.
2.Вырастить инфузорию – туфельку в условиях лаборатории МОУ Даурской СОШ.
3.Выяснить наиболее эффективный способ культивирования инфузорий.
4.Познакомиться с многообразием инфузорий.
Методы исследования: наблюдение, эксперимент, анализ полученных данных.
Оборудование: Микроскоп, предметные и покровные стекла, препаровальная игла, колбы, мерные стаканы, стеклянные палочки, весы, чашки Петри. Актуальность темы: Простейшие организмы окружают нас повсюду. Одноклеточные животные в каплях воды, на листьях растений , во влажной почве, в органах растений, животных и человека. Мы попробуем изучить одного представителя этого огромного класса – инфузорию туфельку.
Тип Инфузории. Общая характеристика.
Среди простейших инфузории – туфельки – довольно крупные организмы, размеры которых обычно колеблются от 0,1 до 0,3 мм, Своё название инфузория – туфелька получила благодаря форме своего тела, напоминающего дамскую туфельку. Она сохраняет постоянную форму тела благодаря тому, что наружный слой её цитоплазмы плотный. Всё тело инфузории покрыто продольными рядами многочисленных мелких ресничек, которые совершают волнообразные движения. /Приложение№ 1/. С их помощью туфелька плавает тупым концом вперёд. От переднего конца до середины тела проходит желобок с более длинными ресничками. На конце желобка имеется ротовое отверстие, ведущее в глотку. Питаются инфузории главным образом бактериями, подгоняя их ресничками ко рту. Ротовое отверстие всегда открыто. Мелкие пищевые частицы проникают через рот в глотку и скапливаются на её дне, после чего пищевой комок вместе с небольшим количеством жидкости отрывается от глотки, образуя в цитоплазме пищеварительную вакуоль. Последняя проделывает в теле инфузории сложный путь, в процессе которого осуществляется переваривание пищи.
Инфузория – туфелька достаточно подвижна. Скорость её перемещения при комнатной температуре составляет 2,0 – 2,5 мм/ сек. Это большая скорость: за 1 секунду туфелька преодолевает расстояние, превышающее длину её тела в 10 – 15 раз. Это обстоятельство необходимо учитывать при выкармливании мелких, малоподвижных личинок некоторых икромечущих рыб, которые даже при высокой концентрации инфузорий могут оставаться голодными.
1.2. Особенности питания и размножения.
В качестве корма для инфузорий можно использовать сенный настой, высушенные корки банана, тыквы, дыни, жёлтой брюквы, нарезанную кружками морковь, гранулы рыбьего комбикорма, молоко, сушеные листья салата, кусочки печени, дрожжи, водоросли, т. е те субстанции (или водоросли), которые являются субстратом для развития бактерий. Инфузория питается бактериями, которые служат для неё кормом, поэтому она часто скапливается вокруг кусочков органики. С помощью ресничек инфузории подгоняют корм, в том числе и бактерий, к ротовому отверстию. Ротовое отверстие всегда открыто. Мелкие пищевые частицы проникают через рот в глотку и скапливаются на ее дне. После чего пищевой комок вместе с небольшим количеством жидкости отрывается от глотки, образуя в цитоплазме пищеварительную вакуоль. Последняя проделывает в теле инфузории сложный путь, в процессе которого осуществляется переваривание пищи.
«Инфузориям свойственно бесполое размножение, осуществляемое путем поперечного деления, чаще всего в свободно подвижном состоянии. Размножение сопровождается делением обоих ядер. /Приложение №2/
Кроме того, размножение может осуществляться половым путем. В последнем случае две клетки соединяются (конъюгируют), в результате чего происходит обмен частями ядерного аппарата, несущего наследственную информацию.
В оптимальных условиях инфузории обладают высокой интенсивностью размножения. К примеру, Stylonichia pustulata при температуре 20-25 о С делится 4-5 раз в сутки. При одинаковой температуре быстрее размножаются мелкие инфузории, число которых может за 6 суток увеличиться до 10 млн. экземпляров.
Проблема поиска и совершенствования технологической схемы культивирования одноклеточных беспозвоночных как "стартового" корма для рыб, несмотря на определенные успехи, не теряет своей актуальности. Значительных успехов в этом плане добились советские исследователи В.Е. Кокова (1974) и Ф.П. Чорик и М.М. Викол (1983).
Развитие рыбоводства с использованием термальных вод водоемов-охладителей требует разработки эффективных методов выращивания "стартового" живого корма. С этой целью сконструирована и апробирована в инкубцехе "Бурштын" Ивано-Франковского облрыбкомбината установка для выращивания простейших. Исследования начаты в 1983 г.
Объектом разведения послужила Paramecium caudatum. Этот вид широко распространен, отличается незначительной пищевой элективностью (питается различными бактериями, водорослями, дрожжами и т.д.), с довольно высокой удельной продукцией и легко поддается культивированию.
Маточную культуру получали из естественных местообитаний. Объем воды 0, 5 л концентрировали до 10 мл под небольшим вакуумом. Сконцентрированную пробу помещали в камеру Богорова, где и отлавливались отдельные особи. По одному экземпляру P. caudatum рассаживали в чашки Петри, которые были заполнены питательной средой. Чашки Петри помещали в термостат с постоянной температурой 26-28 °С. Новообразовавшиеся экземпляры пересаживали в новые чашки с питательной средой. Таким образом, в виде монокультуры была получена маточная культура. Сама установка для культивирования простейших изготовлена из органического стекла и имеет вид в поперечном сечении равнобедренного треугольника, которая укреплялась на опорных стеллажах.
Нагревательный элемент U-образной формы, сделан из стеклянной трубки, в которую продета спираль для нагрева. Элемент соединен с контактным термометром и терморегулятором типа ТРК, который представляет собой усилительный блок УКТ-4 в комплексе с ртутным датчиком - электроконтактным термометром.
Поступление воздуха в культуралькую жидкость обеспечивает, кроме того, и поддержание пищевых частиц во взвешенном состоянии, что, с одной стороны, делает их более доступными для парамеций, а с другой - предотвращает процесс их разложения на дне культиватора. По этой причине культивирование проводили при постоянном барбатаже среды с помощью диффузного распылителя. Последний расположен на дне установки в виде трубки с многочисленными отверстиями. В качестве нагнетателя воздуха использовалась компрессорная установка УК 25-1, 6 М.
Культивационные камеры наполняли естественной некипяченой водой, процеженной через мельничный газ № 76.
Для первоначальной зарядки было посажено по 500 экз./л особей. Состояние культуры определяли один-два раза в сутки по темпу деления инфузорий. Для этого из каждой емкости пять раз отбирали пробы по 0, 1 мл культуры, разделяли их на десять частей и просчитывали живых инфузорий под стереоскопическим микроскопом МБС-2. Темп деления инфузорий определяли по формуле:
где А - число экземпляров в предыдущей порции, В - число экземпляров в момент определения.
Наблюдениями установлено, что в случае скармливания дрожжей БВК с содержанием сырого протеина 50 % стационарная фаза в развитии инфузорий наблюдалась на 15-17 сутки. Максимальная численность при этом составляла 210х103 экз./л, вес - 247, 8 мг/л, среднесуточная продукция - 588, 8 мг/л. При подкормке парамеций смесью протококковых водорослей и дрожжей момент достижения стационарной фазы наступал по истечении такого же периода, 15-16 суток. Однако показатели количественного развития инфузорий ниже соответственно 131х103 экз./л, 154, 6 мг/л и 367, 3 мг/л.
Из культуры ежедневно изымали 20 % на подкормку личинок карпа и растительноядных рыб. Изъятый объем пополняли свежей питательной средой. При ежесуточном съеме 20 % протозойной суспензии и замене ее свежей питательной средой высокая продукция (367, 3-588, 8 мг/л) сохранялась на протяжении всего инкубационного периода.
Таким образом, промышленное культивирование свободноживущих инфузорий целесообразно. Это может оказаться важным не только для индустриального рыбоводства, но, и как справедливо отмечает Ю.И. Полянский (1976), также для очистки сточных вод, и даже для получения пищевого белка.
Читайте также: