Темнопольная микроскопия это кратко и понятно

Обновлено: 16.05.2024

Микробиология

— наука, изучающая организмы, неразличимые (невидимые) невооруженным глазом, которые за свои микроскопические размеры называют микроорганизмами (микробы).

Предметом изучения микробиологии

является их морфология, физиология, генетика, систематика, экология и взаимоотношения с другими формами жизни. В таксономическом отношении микроорганизмы очень разнообразны.

Темнопольная микроскопия

Темнопольная микроскопия основана на способности микроорганизмов сильно рассеивать свет. Для темнопольной микроскопи пользуются обычными объективами и специальными темнопольными парабалоид-конденсорами, центральная часть которых затемнена, так что прямые лучи от осветителя в объектив микроскопа не попадают. В объектив попадают только те лучи, которые отклоняются частицами препарата. Поэтому в темнопольном микроскопе микроорганизмы видны бесцветными на темном фоне.

Метод темнопольной микроскопии используется для изучения живых бактерий и их подвижности. При помощи этого метода могут быть обнаружены мельчайшие микроорганизмы, размеры которых лежат за пределами разрешающей способности микроскопа. С помощью темнопольной микроскопии изучают нативные препараты типа "раздавленной" или "висячей капли".


T.pallidum. Темнопольная микроско

Темнопольная микроскопия. Принципы темнопольной микроскопии. Фазово-контрастная микроскопия. Техника фазово-контрастной микроскопии.

Темнопольная микроскопия. Принципы темнопольной микроскопии. Фазово-контрастная микроскопия. Техника фазово-контрастной микроскопии

Рис. 11-2. Схема светового микроскопа с темнопольным конденсором.

Фазово-контрастная микроскопия. Техника фазово-контрастной микроскопии

Темнопольная микроскопия. Принципы темнопольной микроскопии. Фазово-контрастная микроскопия. Техника фазово-контрастной микроскопии

Рис. 11-3. Схема фазово-контрастного микроскопа.

Фазово-контрастная микроскопия позволяет изучать живые и неокрашенные объекты за счёт повышения их контрастности. При прохождении света через окрашеные объекты происходит изменение амплитуды световой волны, а при прохождении через неокрашенные — фазы световой волны, что используют для получения высококонтрастного изображения в фазово-контрастной (рис. 11-3) и интерференционной микроскопии. Для повышения контрастности фазовые кольца покрывают металлом, поглощающим прямой свет, не влияя на сдвиг фазы. В оптической системе микроскопа применяют специальный конденсор с револьвером диафрагм и центрирующим устройством; объективы заменяют на иммерсионные объективы-апохроматы.

Информация на сайте подлежит консультации лечащим врачом и не заменяет очной консультации с ним.
См. подробнее в пользовательском соглашении.

В микробиологических исследованиях довольно часто есть необходимость исследования объектов, которые являются прозрачными и полупрозрачными, не поглощающими свет. То есть, при исследовании их в светлом поле визуализировать их просто невозможно.

Именно темнопольный микроскоп может помочь исследователям в этом. Данное оборудование использует метод темного поля метод темного поля в микроскопии. Что это означает?

Темнопольный микроскоп: принцип работы

Чем темнопольный микроскоп отличается от обычного светового микроскопа?

Свет, который проходит через исследуемый объект на предметном столике, попадает в объектив не сразу. Он проходит через конденсор темного поля, а картинка формируется только светом.

Основной особенностью микроскопов такого типа является само освещение, которое падает на исследуемый образец. Оно является по своей сути боковым. При попадании данного света на границы объекта, данный свет рассеивается, в итоге мы видим объект в рассеянном свете. А сам световой пучок, который исходит из осветителя микроскопа, попросту становится невидимым глазу человека.

Сравнивая изображения в светлопольном и темнопольном микроскопах может сложиться ошибочное мнение о том, что картинка в темнопольном микроскопе может быть названа негативом исследуемого объекта по отношению к таковой в светлопольном оборудовании. Однако, это не так. Просто при микроскопировании с помощью этих двух методов визуализируются различные части одного и того же объекта.

Темнопольный микроскоп: диагностика в лабораторных условиях

Темнопольные микроскопы являются помощниками в работе врачей-микробиологов, бактериологов, темнопольная микроскопия применяется для изучения крови при гемосканировании.

Диагностика по капле крови на темнопольном микроскопе производится в условиях медицинской лаборатории, когда врачу необходимо отследить информацию о живых клеточных структурах крови. Для исследования берется капля капиллярной крови, которая сразу же вноситься на предметное стекло темнопольного микроскопа. В результате такого исследования можно визуализировать передвижение форменных элементов крови и делать выводы касательно них.

Преимущества и недостатки темнопольной микроскопии

Главное преимущества метода использования микроскопии в темном поле – это реальная возможность изучения прозрачных объектов, визуализация который просто невозможна путем применения способа светлопольной микроскопии. Это основная задача оборудования такого типа.

При наличии такой необходимости такой микроскоп доукомплектовывается видеоокуляром, а программное обеспечение с легкостью может позволить вывести изображение на экран монитора компьютера. Это дает возможность применения дополнительных фильтров, сохранения полученной информации на электронные носители.

Однако, исходя из требований к работе такого аппарата могут исходить и недостатки такой микроскопии.

Схема темнопольной микроскопии в падающем свете. Подсветка образца осуществляется сбоку (зеленая линия). Изображение создается светом, рассеивающимся на неоднородностях образца.

Схема темнопольной микроскопии в падающем свете.
Подсветка образца осуществляется сбоку (зеленая линия). Изображение создается светом, рассеивающимся на неоднородностях образца.

Ход лучей освещения и рассеянных образцом лучей в микроскопе тёмного поля

Темнопо́льная микроскопи́я — вид оптической микроскопии, в которой контраст изображения увеличивают за счет регистрации только света, рассеянного изучаемым образцом. При использовании метода темного поля регистрируются даже незначительные различия в преломляющей способности участков препарата [1] . Основы метода разработаны Р. Зигмонди в 1906 году.

Читайте также: