Эко у животных доклад

Обновлено: 02.07.2024

План:
1. Исторические аспекты ЭКО.
2. Показания и противопоказания для проведения ЭКО С медицинских позиций.
3. Условия для проведения метода и его этапы.
4. Психологические и духовные моменты ЭКО.

1. В 1978 г. родился первый ребенок после ЭКО (в результате оплодотворения ооцитов человека in vitro, разработанного эмбриологами Р. Эдвардсом и гинекологом Л. Степлоу в Великобритании.

По количеству попыток ЭКО, производимых ежегодно в мире, лидирует Франция, затем идут Германия, Нидерланды, Швеция. Набирает темпы и Россия. Средняя эффективность метода до 40%, что сопоставимо с естественной фертильностью человека.

Эффективность метода зависит от возраста и длительности предыдущего лечения: в возрасте до 25 лет — 55%; в возрасте 36-42 года при длительности лечения до 5 лет — 15-25%, а при длительности лечения более 10 лет — менее 5%. Но с увеличением количества специализированных клиник, улучшением информированности пациенток, преемственности методов медицинских учреждений эти показатели улучшаются в некоторых клиниках до 60%. При этом частота спонтанных абортов до 25%, внематочная беременность до 6%, многоплодие до 30%.

2. Показаниями для ЭКО являются:
— отсутствие двух маточных труб (абсолютное трубное бесплодие);
— непроходимость маточных труб при отсутствии эффекта от ранее проведенного оперативного и консервативного лечения;
— бесплодие неясного генеза после проведения полного клинического исследования, включая гормональное, эндоскопическое, иммунное и гинекологическое;
— отсутствие фертильности спермы мужа.

Противопоказания к ЭКО:
— соматические и психические заболевания;
— врожденные и приобретенные пороки и деформации полости матки;
— опухоли яичников;
— гиперпластические процессы эндометрия;
— доброкачественные опухоли матки;
— острые воспалительные заболевания любой локализации;
— злокачественные новообразования в анамнезе любой локализации.

3. Этапы проведения ЭКО (оплодотворение ооцитов в лабораторных условиях (in vitro):
— отбор и обследование пациентов;
— стимуляция овуляции;
— пункции фолликулов и аспирация ооцитотов (через задний свод);
— перенос эмбрионов в полость матки;
— гормональная поддержка эмбрионов;
— диагностика беременности малого срока.

Для инсиминации сперму промывают, центрифугируют, затем переносят в специальный термостат, где находятся яйцеклетки. При осеменении к одной яйцеклетке добавляют 200-300 тыс. сперматозоидов. Перенос эмбрионов в полость матки осуществляется через 72 часа после аспирации (в стадии зиготы) или через 120 часов (в стадии бластоцита). В полость матки переносится не более двух эмбрионов, но бывает для гормонального метода переносятся 3-4 эмбриона. Многоплодие при ЭКО в 10 раз чаще, чем в популяции. В целях улучшения исходов беременности после ЭКО предлагают операции, редукции плодов при многоплодной беременности. Операции проводят под контролем УЗИ в I триместре с введением раствора KCl в область сердца редуцируемого плода. Часто к этому сроку происходит самостоятельная редукция плода.

4. Психологические проблемы ЭКО:
— возникают сомнения при подготовке: а вдруг получится без ЭКО;
— финансовая сторона (дорого);
— нет гарантии (эффективность от 10—до 50%);
— риск для здоровья (операция, гормональная поддержка);
— объяснения с родственниками и окружающими;
— согласование с мужем.

Духовные аспекты ЭКО:
— несогласие с замыслом Творца. Допустимо искусственное оплодотворение половыми клетками мужа.
— церковь против ЭКО, потому что предполагается разрушение избыточных эмбрионов (редукцию).

Т.К. Андриевских, гинеколог, заслуженный врач России.

Просьба соблюдать правила уважительного тона. Ссылки на другие источники, копипасты (большие скопированные тексты), провокационные, оскорбительные и анонимные комментарии могут быть удалены.

По данным Росстата, за год с февраля 2016-го года по февраль 2017-го в Россию импортировали живого крупного рогатого скота на $116 млн. Основными поставщиками высокопродуктивных коров и быков стали Австралия и Нидерланды. При этом около трети импортируемых животных умирают от климатического шока, различных травм и по другим причинам – такова статистика Всероссийского научно-исследовательского института племенного дела. Решить проблемы дороговизны, акклиматизации и, наконец, импортозамещения можно было бы, развивая агробиостартапы внутри страны. Новые технологии, такие как трансплантация эмбрионов или клонирование, могут позволить в короткие сроки обновить стадо, повысить продуктивность животных. Они уже доказали свою эффективность, но парадокс заключается в том, что в России мало команд, занимающихся разработкой и внедрением этих технологий. В США на рынке эмбриотрансфера работают около 300 компаний, в нашей стране – меньше десятка. Причина в том, что многие аграрии с настороженностью относятся и к вмешательству в такую деликатную сферу, и к тратам на новшества в кризисный период.

Стоимость одной заграничной нетели составляет около 250 тысяч рублей. На деньги, заплаченные за одну австралийскую коровку, можно сделать примерно пять пересадок эмбрионов в родном хозяйстве и вскоре получить пять телят с прогнозируемыми качествами: за основу берутся яйцеклетка и семя от доказавших свою коммерческую эффективность животных – дающих самый большой надой молока или самый большой прирост мяса… Кроме того, эмбриотрансфер позволяет избежать долгого периода акклиматизации, которая неизбежна в случае ввоза животного: в России от австралийских отличаются не только погодные условия, но и способы кормления крупного рогатого скота; и снижает вероятность завоза опасных заболеваний.

Компания была создана в 2016 году, но уже сразу же получила успешные результаты в реализации своей деятельности. По словам основателя проекта Александра Кузнецова, за 1,5 месяца при работе в крупном агрохолдинге в Татарстане удалось получить почти 2500 эмбрионов КРС – результат, который был недостижим российскими компаниями за такие сроки до этого момента.

Клоны и единорог

Как отмечает Александр Кузнецов, результаты проекта были многократно представлены на крупнейших мероприятиях и получили самые высокие оценки первых лиц федеральных агрохолдингов и представителей власти, в том числе премьер-министра РФ Дмитрия Медведева и министра сельского хозяйства Александра Ткачева.

Что касается аграрного направления, то в России рынок услуг клонирования пока незначительный, но бурно развивается.

Последователи овечки Долли

Пока в России настороженно относятся к воспроизводству стада из пробирки, Китай выходит на лидирующие позиции. В Тяньжине возводится Центр клонирования животных: это совместный проект Sinica (дочка BoyaLife Group – одного из ведущих китайских предприятий в сфере работы со стволовыми клетками и биомедицины), Института молекулярной медицины Пекинского университета, Международной академии биомедицины и южнокорейского Sooam Biotech Research Foundation (имеет опыт в клонировании собак для нужд спецслужб). После открытия – а оно запланировано на 2017 год – центр станет крупнейшим в мире. На 14 тысячах квадратных метров расположится лаборатория, центр клонирования, генетический банк и выставочное пространство. Общие инвестиции оцениваются почти в $500 млн. Консорциум планирует воспроизвести 100 тысяч голов крупного рогатого скота (5% мясных потребностей жителей Поднебесной) с перспективой роста до 1 млн голов. Глава BoyaLife Сюй Сяочунь заявил, что клонированная говядина – самое вкусное мясо, которое он когда-либо пробовал. Наряду с коровами в Центре планируют клонировать породистых лошадей, собак (для полицейских нужд и коммерческого воспроизведения домашних любимцев), редких и вымерших животных.

Для каких животных характерно наружное оплодотворение?

У каких организмов существует двойное оплодотворение?

Для осуществления полового размножения организму недостаточно просто сформировать половые клетки – гаметы, надо обеспечить возможность их встречи. Процесс слияния сперматозоида и яйцеклетки, сопровождающийся объединением их генетического материала, называют оплодотворением. В результате оплодотворения образуется диплоидная клетка – зигота, активация и дальнейшее развитие которой приводит к формированию нового организма. При слиянии половых клеток разных особей осуществляется перекрёстное оплодотворение, а при объединении гамет, продуцируемых одним организмом, – самооплодотворение.

Существует два основных типа оплодотворения – наружное (внешнее) и внутреннее.

Наружное оплодотворение. При наружном оплодотворении половые клетки сливаются вне организма самки. Например, рыбы мечут икру (яйцеклетки) и молоку (сперму) прямо в воду, где происходит наружное оплодотворение. Подобным образом осуществляется размножение у земноводных, многих моллюсков и некоторых червей. При наружном оплодотворении встреча яйцеклетки и сперматозоида зависит от самых разных факторов внешней среды, поэтому при таком типе оплодотворения организмы обычно образуют огромное количество половых клеток. Например, озёрная лягушка откладывает до 11 тыс. яиц, атлантическая сельдь вымётывает около 200 тыс. икринок, а рыба-луна – почти 30 млн.

Внутреннее оплодотворение. При внутреннем оплодотворении встреча гамет и их слияние происходит в половых путях самки. Благодаря согласованному поведению самца и самки и наличию специальных совокупительных органов мужские половые клетки поступают непосредственно в женский организм. Так происходит оплодотворение у всех наземных и некоторых водных животных. В этом случае вероятность успешного оплодотворения высока, поэтому половых клеток у таких особей гораздо меньше.

Количество половых клеток, которые образует организм, зависит также от степени заботы родителей о потомстве. Например, треска вымётывает 10 млн икринок и никогда не возвращается к месту кладки, африканская рыбка тиляпия, вынашивающая икру во рту, – не более 100 икринок, а млекопитающие, обладающие сложным родительским поведением, обеспечивающим заботу о потомстве, рождают всего одного или нескольких детёнышей.

У человека, как и у всех остальных млекопитающих, оплодотворение происходит в яйцеводах, по которым яйцеклетка движется по направлению к матке. Сперматозоиды преодолевают огромное расстояние до встречи с яйцеклеткой, и лишь один из них проникает в яйцеклетку. После проникновения сперматозоида яйцеклетка формирует на поверхности толстую оболочку, непроницаемую для остальных сперматозоидов.

Если оплодотворение произошло, яйцеклетка завершает своё мейотическое деление (§ 20) и два гаплоидных ядра сливаются в зиготе, объединяя генетический материал отцовского и материнского организмов. Образуется уникальная комбинация генетического материала нового организма.

Яйцеклетки большинства млекопитающих сохраняют способность к оплодотворению в течение ограниченного времени после овуляции, как правило, не более 24 часов. Сперматозоиды, покинувшие мужскую половую систему, живут тоже очень недолго. Так, у большинства рыб сперматозоиды погибают в воде уже спустя 1–2 минуты, в половых путях кролика живут до 30 часов, у лошадей 5–6 суток, а у птиц до 3 недель. Сперматозоиды человека во влагалище женщины гибнут спустя 2,5 часа, но те, которые успевают добраться до матки, сохраняют жизнеспособность в течение двух и более суток. Существуют в природе и исключительные случаи, например сперматозоиды пчёл сохраняют способность к оплодотворению в семяприёмнике самок в течение нескольких лет.

Оплодотворённая яйцеклетка может развиваться в теле материнского организма, как это происходит у плацентарных млекопитающих, или во внешней среде, как у птиц и пресмыкающихся. Во втором случае она покрывается специальными защитными оболочками (яйца птиц и пресмыкающихся).

У некоторых видов организмов встречается особая форма полового размножения – без оплодотворения. Такое развитие называют партеногенезом (от греч. partenos – девственница, genesis – возникновение) или девственным развитием. В этом случае дочерний организм развивается из неоплодотворённой яйцеклетки на основе генетического материала одного из родителей, и образуются особи только одного пола. Естественный партеногенез даёт возможность резкого увеличения численности потомства и существует в тех популяциях, где контакт разнополых особей затруднён. Партеногенез встречается у животных разных систематических групп: у пчёл, тлей, низших ракообразных, скальных ящериц и даже у некоторых птиц (индеек).

Одним из главных механизмов, который обеспечивает оплодотворение строго внутри вида, является соответствие числа и строения хромосом женских и мужских гамет, а также химическое сродство цитоплазмы яйцеклетки и ядра сперматозоида. Даже если чужеродные половые клетки и соединяются при оплодотворении, это, как правило, приводит к ненормальному развитию зародыша или к рождению стерильных гибридов, т. е. особей, неспособных к деторождению.

Двойное оплодотворение. Особый тип оплодотворения характерен для цветковых растений. Он был открыт в конце XIX в. русским учёным Сергеем Гавриловичем Навашиным и получил название двойного оплодотворения (рис. 67).

Во время опыления пыльца попадает на рыльце пестика. Пыльцевое зерно (мужской гаметофит) состоит всего из двух клеток. Генеративная клетка делится, образуя два неподвижных спермия, а вегетативная клетка, прорастая внутрь пестика, формирует пыльцевую трубку. В завязи пестика развивается женский гаметофит – зародышевый мешок с восемью гаплоидными ядрами. Два из них сливаются, формируя центральное диплоидное ядро. В результате дальнейшего деления цитоплазмы зародышевого мешка образуется семь клеток: яйцеклетка, центральная диплоидная клетка и пять вспомогательных.

Рис. 67. Двойное оплодотворение у цветковых растений

После того как пыльцевая трубка прорастает в основание пестика, спермии, находящиеся внутри неё, проникают в зародышевый мешок. Один спермий оплодотворяет яйцеклетку, – возникает диплоидная зигота; из неё в дальнейшем развивается зародыш. Другой спермий сливается с ядром крупной центральной диплоидной клетки, образуя клетку с тройным хромосомным набором (триплоидную), из которой затем формируется эндосперм – питательная ткань для зародыша. Таким образом, у покрытосеменных растений в оплодотворении участвует два спермия, т. е. осуществляется двойное оплодотворение.

Искусственное оплодотворение. Большое значение в современном сельском хозяйстве имеет искусственное оплодотворение, приём, который широко применяется в селекции при выведении и улучшении пород животных и сортов растений. В животноводстве при помощи искусственного осеменения можно получить многочисленное потомство от одного выдающегося производителя. Сперма таких животных хранится в специальных низкотемпературных условиях и сохраняет жизнеспособность в течение долгого времени (десятки лет).

Искусственное опыление в растениеводстве позволяет осуществлять определённое, заранее запланированное скрещивание и получать сорта растений с необходимым сочетанием родительских свойств.

К 2010 г. с помощью экстракорпорального оплодотворения было зачато уже около 4 млн детей. Однако использование донорской спермы, донорских яйцеклеток и даже суррогатных матерей порождает целый ряд этических и социальных проблем. Многие люди, опираясь на религиозные и моральные соображения, выступают против любых вмешательств в размножение человека, в том числе против экстракорпорального и искусственного оплодотворения.

Вопросы для повторения и задания

1. Что такое оплодотворение?

2. Какие типы оплодотворения вы знаете?

3. В чём заключается процесс двойного оплодотворения?

4. Каково значение искусственного оплодотворения в растениеводстве и животноводстве?

Подумайте! Выполните!

1. Как вы считаете, в чём преимущество двойного оплодотворения у покрытосеменных растений по сравнению с оплодотворением у голосеменных?

2. Достаточно ли знать, что в размножении участвует только одна особь, чтобы сделать вывод о том, что это размножение – бесполое?

3. Объясните, почему при экстракорпоральном оплодотворении часто рождаются близнецы.

Работа с компьютером

Обратитесь к электронному приложению. Изучите материал и выполните задания.

Повторите и вспомните!

Растения

Опыление. Двойному оплодотворению у цветковых растений предшествует опыление – перенос пыльцы (пыльцевых зёрен) на рыльце пестика. Опыление осуществляется различными способами. Если пыльца цветка попадает на рыльце пестика этого же цветка, происходит самоопыление. Перенос пыльцы на рыльце пестика другого цветка называют перекрёстным опылением.

Самоопыление характерно для небольшого числа цветковых растений. Учёные считают, что самоопыление возникло вторично, когда какие-то обстоятельства стали препятствовать осуществлению перекрёстного опыления. Биологически самоопыление менее выгодно, поскольку при этом не происходит обмен генетической информации между различными особями вида.

Перекрёстное опыление распространено у покрытосеменных растений гораздо шире, чем самоопыление. Биологически перекрёстное опыление более благоприятно, чем самоопыление, потому что оно даёт возможность объединять генетическую информацию разных особей. Появляются потомки, отличающиеся от родительских особей. Это способствует приспособлению вида к изменяющимся условиям обитания.

Перекрёстное опыление может осуществляться различными способами. Условно их можно разделить на две группы: абиотическое опыление (при помощи ветра или воды) и биотическое (при помощи животных). В роли опылителей могут выступать разные животные: насекомые, птицы, млекопитающие.

Данный текст является ознакомительным фрагментом.

Продолжение на ЛитРес

Глава III С чего начинается развитие. Оплодотворение

Глава III С чего начинается развитие. Оплодотворение Оплодотворение традиционно считают началом развития. И действительно, только после слияния гаплоидного яйца и гаплоидного сперматозоида образуется диплоидная зигота — фактически самый ранний зародыш. У большинства

7. Оплодотворение у животных

7. Оплодотворение у животных Оплодотворение — процесс слияния мужских и женских половых клеток, в результате которого образуется зигота. Зигота — оплодотворенная яйцеклетка. Она всегда имеет диплоидный набор хромосом. Из зиготы развивается зародыш, который дает начало

Оплодотворение

Оплодотворение После того как мы рассмотрели строение половых органов и способ их функционирования, перейдем к самой сути всей сложной системы воспроизведения. А так как мы на сорок недель старше, чем думаем (с учетом времени внутриутробного развития), то прежде всего

8.2.1.1. Искусственное оплодотворение в собаководстве

8.2.1.1. Искусственное оплодотворение в собаководстве Применение искусственного оплодотворения в собаководстве в настоящее время сдерживается в основном отсутствием соответствующих нормативных документов по учету происхождения животных и определенным консерватизмом

3.1. ОПЛОДОТВОРЕНИЕ

3.1. ОПЛОДОТВОРЕНИЕ Оплодотворение — процесс слияния половых клеток самца (спермия) и самки (яйцеклетки) и образования зиготы, которая обладает двойной наследственностью и дает начало новому организму.Естественный тип осеменения собак — маточный. Во время полового акта

Оплодотворение

Оплодотворение У кобелей в момент эякуляции увеличивается луковичная часть головки полового члена и заполняет все пространство переднего отдела влагалища. Эрекция вестибулярных кавернозных тел самки ущемляет половой член и тем предотвращает выделение спермы через

Оплодотворение

Оплодотворение Оплодотворение – это процесс объединения мужской и женской гамет. При этом формируется генотип особи, несущий информацию от обоих родителей. Оплодотворение влечет за собой два важных следствия: активация яйцеклетки (стимуляция ее к развитию) и

Совокупление и оплодотворение

Совокупление и оплодотворение Для того, чтобы правильно организовать спаривание, нужно представлять себе физиологические процессы, лежащие в его основе. У животных, размножающихся половым путем, процессу оплодотворения предшествует осеменение. При внутреннем

Оплодотворение яйцеклетки

Оплодотворение яйцеклетки Фолликулы (нечто вроде пузырьков, в которых зреют яйцеклетки) постепенно начинают выступать на поверхность яичника, они продуцируют гормоны, которые подготавливают матку к приему оплодотворенного яйца. Давление на стенки яичника

Оплодотворение яйцеклетки

21. Оплодотворение

21. Оплодотворение Вспомните!Какой набор хромосом имеет зигота?Для каких животных характерно наружное оплодотворение?У каких организмов существует двойное оплодотворение?Для осуществления полового размножения организму недостаточно просто сформировать половые

Искусственное оплодотворение — риск?

Искусственное оплодотворение — риск? Фундаментальные исследования в эпигенетике прежде всего преследовали цель изучить те комплексные изменения, которые происходят в клетках в момент оплодотворения на самом раннем этапе развития любой жизни. Результаты создают повод

Экстракорпоральное оплодотворение и трансплантация эмбриона — оплодотворение яицеклетки вне организма и пересадка дробящихся эмбрионов в полость матки. К настоящему времени уже более 1000 детей родилось после ЭО и ТЭ.

Несмотря на то, что уже достигнуты определенные успехи в применении этого метода, учитывая дорогостоющую аппаратуру и оборудование, лекарственные препараты в основном импортного производства, этот метод в нашей стране налажен только в крупных научно-исследовательских и клинических учреждениях.

1) бесплодие, вызванное непроходимостью маточных труб;

2) труднообъяснимое бесплодие (возможно, связанное стем, что эмбрион не может покинуть блестящую оболочку, имплантироваться и развиваться) после проведенного полного клинического исследования, включая гормональное, эндоскопическое, иммунологическое.

3) некоторые формы эндометриоза,

5) патология слизи цервикального канала.

Схема лечения с помощью метода ЭКО

1. отбор пациенток (см. показания);

2. контроль созревания фолликулов (трансвагинальную эхографию, исследование 17 b-эстрадиола крови);

3. получение ооцитов;

4. предынкубацию, оплодотворение in vitro, культивирование, криоконсервацию;

6. контроль развития беременности;

1. сохраненная в полном объеме функциональная способность матки к имплантации и вынашиванию беременности;

2. отсутствие противопоказаний к беременности и родам (соматические, психические, генетические заболевания);

3. сохраненная способность яичников к адекватному ответу на стимуляцию овуляции — экзогенную и эндогенную;

4. отсутствие новообразований, воспалительных и анатомических изменений в органах малого таза.

Необходимо обратить внимание на следующие факторы:

1. Возраст родителей. У женщин в возрасте 40 лет в 23 раза чаще рождаются дети с синдромом Дауна (Simpson, 1979).

2. Наличие доказанной способности к зачатию.

3. Наличие нарушений метаболизма, таких как сахарный диабет, аутоиммунный тиреоидизм и дефицит артитрипсина, предрасполагающих к появлению анэуплоидии у плода.

4. Наличие анэуплоидии. Если один из родителей является анэуплоидом, то увеличивается риск рождения детей с хромосомными нарушениями.

Все супружеские пары, отобранные для лечения по методу ЭКО, должны понимать его суть, знать о возможном риске и дать продуманное согласие на лечение.

За 2 или 3 месяца до начала активного лечения по методу ЭКО следует произвести полное исследование спермы, включающее бактериологическое исследование и посев, одновременно с исследованием влагалищных и цервикальных мазков с целью исключения патологии, вызванной гонококками, микоплазмой, грибами, трихомонадами и другими возбудителями. Лечение инфекционных заболеваний половых органов предпринимается с целью предупреждения заражения культуры, в которой производится оплодотворение, и осложнений после переноса эмбриона. Помимо этого, рекомендуется сделать мазки по Папаниколау с целью исключения рака шейки матки и поражения половых органов вирусом герпеса.

Во время предовуляторой фазы исследовательского цикла берут кровь для приготовления эмбриокультуры и проведения серологических исследований на токсоплазмоз, краснуху, цитомегаловирусы и вирусы герпеса, гепатит В и сифилис. Также следует исследовать кровь на хромосомы для идентификации лиц с повышенным риском воспроизводства анэуплоидных гамет. Сыворотку крови следует исследовать не предмет выявления спермантител и антител блестящей оболочки.

На этапе предварительного обследования необходимо измерить длину цервикального канала и полости матки с помощью маточного зонда, учитывая последующий перенос эмбриона катетером.

Хотя существует мнение, что при естественном цикле шансы на успех достаточно велики, большинство специалистов считают, что при "стимулированном" цикле частота наступления беременности выше. Хорошо известно, что с увеличением числа трансплантируемых эмбрионов возрастает вероятность имплантации. Но отмечено, что частота многоплодной беременности также увеличивается с увеличением числа внесенных эмбрионов. Рекомендовано поэтому введение не более трех эмбрионов. В целях получения наибольшего количества яйцеклеток широко и успешно применяют методы гормональной стимуляции овуляции.

Схемы стимуляции суперовуляции:

1. Кломифена цитрат назначают с 5-го дня менструального цикла в течение 5 дней в дозе 50 мг/сут. Не рекомендуется применять при низкой эстрогенной насыщенности, избытке массы тела, гипертензии, гиперволемии, отечности.

2. Тамоксифен (зитазониум) наиболее показан при бесплодии с НЛФ. Препарат назначают в дозе 10 мг/сут в течение 5 дней. При отсутствии положительного результата дозу увеличивают до 20-40 мг/сут.

3. Хориогонин является препаратом выбора при исходно низком уровне эстрогенов и НЛФ. С этой целью хориогонин вводят внутримышечно на 5,7,9-й дни цикла по 750 ЕД, на 11,13,15-й дни цикла — по 1500 ЕД, на 17,19,21-й дни — по 750 ЕД.

4. Сигетин показан оперированным женщинам с болезнью поликистозных яичников с целью реабилитации менструальной и репродуктивной функции. Препарат используют в дозе 100 мг/сут с 5-го по 9-й день цикла.

5. Хумегон (прегнил) — вводят по 2 ампулы, начиная с 3-го дня цикла, с определением эстрадиола крови, цервикального цикла, УЗИ. При достижении фолликулом диаметра 18 мм и более вводят ХГ.

6. Люлиберин назначают однократно в/в в дозе 100 мг накануне предполагаемой овуляции.

7. Человеческий менопаузальный гонадотропин вводят в/м с 6-го по 10 день (6,8,10-й дни) — по 150 ЕД — для индукции и дополнительного роста нескольких фоликулов. С 3-го по 7-й день включительно возможна доза по 2 ампулы через день.

8. Парлодел — для индукции овуляции при нормопролактинемии используют по схеме: 1,25 мг (1/2 табл.) 2 раза в день в течение первой недели, со второй недели — по 2,5 мг (1 табл.) 2 раза в день, сохраняя дозировку в дальнейшем. На 21 день от начала лечения оценивают содержание эстрогенов, прогестерона в крови и по ТФД. При отсутствии овуляции дозу увеличивают до 2 раза в день, а в дальнейшем — ступенчато, используя эмпирический подход до тех пор, пока не наступит овуляция и беременность (но не более 40 мг/сут).

9. Сочетанные методы:

a) пергонал по 75-150 ЕД со 2-го дня цикла ежедневно до достижения доминантным фолликулом указанных размеров 16-18 мм. Через 24-48 часов после достижения фолликулом указанных размеров вводят внутримышечно 5000-10000 ЕД хорионического гонадотропина. Применение данной схемы стимуляции суперовуляции приводит к образованию до 20 фолликулов. В течение всего этого времени женщина находится под постоянным динамическим контролем; проводят ежедневное ультразвуковое исследование с измерением диаметра фолликулов, определение эстрадиола и лютенизирующего гормона в крови;

b) кломифена цитрат — по 50-100 мг/сут. с 3-го или 5-го дня цикла в течение 5 дн. в зависимости от длительности менструального цикла. При достижении размеров доминантного фолликула диаметром 17-18 мм в/м вводят 10000 ЕД хориогонина в 22.00. Через 35-36 ч производят аспирацию ооцитов (ультразвуковая пункция, лапароскопия);

c) кломифена цитрат — по 100 мг/сут. с 3-го по 7-й день и по 3 ампулы хумегона на 6, 8, 10 дни цикла. При возникновении доминантного фолликула диаметром 18 мм и более и уровне эстрадиола (Е₂₎ 300‑400 пг/мл на один растущий фолликул вводят в/м 1000 ЕД ХГ. Сочетанные методы обладают большей эффективностью из-за потенцирования действия друг другом.

Для стимуляции роста фолликулов чаще всего используют кломифен, менопаузный гонадотропин человека, хориогонадотропин, Фолликулостимулирующий гормон, а также их различные сочетания.

Существует несколько методов забора яицеклеток для оплодотворения . Ооциты могут быть получены при лапароскопии, минилапаротомии или путем аспирации фолликулов под контролем УЗИ.

Премедикация и общая анестезия проводятся также, как и при обычной лапароскопии.

В брюшную полость вводится газовая смесь, содержащая 5% CO, 5%O, 90%N .

Аспирацию предовуляторного фолликула производят длинной иглой (24 см), изогнутой под углом 45 с наружным диаметром1,3 мм и просветом в 1,1 мм. Игла проводится через канюлю, введенную в брюшную полость в точке, расположенной на середине между лонным сочленением и пупком по средней линии живота.

Для аспирации фолликула применяется пониженное давление. Точка пункции фолликула должна располагаться в неваскуляризованной области или примыкать к стромальным элементам яичника для того, чтобы предотвратить утечку фолликулярной жидкости из переполненного фолликула. Собранная фолликулярная жидкость может быть сразу исследована на содержание в ней яйцеклетки

Предовуляторная яйцеклетка человека может быть обнаружена невооруженным глазом по наличию в аспирате массивных и клейких хлопьев размером до 5 мм и более. Однако важно убедиться, что яйцеклетка действительно находится в этих хлопьях путем их просмотра в препарационном микроскопе.

Яйцеклетка 2 раза обмывается оплодотворяющей средой, которая удаляет большую часть фолликулярной жидкости. Затем она переносится в капле равновесной оплодотворяющей Среды под стерильное парафиновое масло. В качестве оплодотворяющей среды применяется раствор Тироде, содержащий пируват, альбумин, антибиотики.

Для получения свежей спермы, мужа больной просят собрать свой эякулят в стерильный контейнер в отдельной комнате. Сперму с учетом ее разжижения при комнатной температуре разводят в 2 смывах оплодотворяющей среды. Удаление семенной плазмы производят следующим образом. Небольшое количество спермы разводят в 4-кратном объеме оплодотворяющей среды, затем суспензию сперматозоидов центрифугируют, удаляют надсадочную жидкость, ресуспензируют комочек сперматозоидов и повторяют эту процедуру. Полученный таким образом комочек сперматозоидов вновь ресуспендируют, определяют их концентрацию и подвижность и доводят эти параметры до значений, которые считаются стандартными для процедуры оплодотворения яйцеклетки.

Затем сперматозоиды переносят в специальный термостат, где уже находятся яйцеклетки. При осеменении на 1 яйцеклетку добавляют 200000-300000 сперматозоидов.

Процесс культивирования происходит в специальной среде с абсолютной влажностью, при температуре 37 о С в растворе с рН, равным приблизительно 7,6, в атмосфере, содержащей 5% СО₂ , 5% О₂ и 90% N₂ . Яйцеклетку оставляют в суспензии сперматозоидов на 6‑18 ч.

Следующие морфологические особенности яйцеклетки, большинство которых может быть выявлено с помощью микроскопа, могут определить признаки произошедшего оплодотворения:

1. Выталкивание второго полярного тельца в желточное пространство.

2. Цитоплазма яйцеклетки сжимается, отступая от оболочки.

3. В ранней стадии оплодотворения в цитоплазме яйцеклетки может наблюдаться головка, срединный сегмент и хвост сперматозоида. Эти признаки могут отмечаться только при сильном увеличении, используя фазово-контрастную методику.

4. В более поздние стадии (около 12‑18 ч после инсеминации) в цитоплазме могут быть мужские и женские проядра.

После завершения периода инсеменации яйцеклетку переносят в равновесную каплю среды по парафиновое масло. Среда состоит из свежеприготовленного раствора Ham F10 с добавлением 15% сыворотки крови больной. Растущий эмбрион человека культивируется при температуре 37 о С в атмосфере, содержащей 5% СО₂ , 5% О₂ и 90% в среде с рН, равным 7,3.

Если клетки развивающегося эмбриона имеют неправильную форму или отходят от блестящей оболочки, или же скорость деления клеток существенно отличается от описанной выше, то развитие эмбриона считается патологическим и он непригоден для переноса в полость матки.

Так как в большинстве случаев эмбрион переносится в полость матки на стадии 8 или 16 клеток, то это означает, что эмбрион человека перед имплантацией должен содержаться в культуре в течение 3‑4 суток.

Эмбрион в 0,05 мл культуральной среды осторожно засасывается в стерильный катетер диаметром 1,4 мм. Затем катетер проводится через цервикальный канал в полость матки, где в области дна эмбрион высвобождается из катетера. С целью облегчения проведения этой процедуры катетер следует разместить по длине для контроля положения его конца в полости матки. Помимо этого, следует очень аккуратно манипулировать шейкой матки во избежание сокращения мышц матки.

Контроль подтверждения беременности

Для контроля ранних сроков развивающейся беременности проводят динамическое определение -субъединицы хорионического гонадотропина, которое помогает определить беременность с 7-9-го дня после ТЭ. При наступлении беременности за женщинами ведется постоянное наблюдение методами, принятыми для ведения беременности и родов женщин с отягощенным акушерским анамнезом.

1. Никитин А.И. "Акушерство и гинекология", 1989, №8, с. 10–13

2. Ныркова В.И. "Акушерство и гинекология", 1991, №6

3. Малевич К.И., Русакевич П.С., "Лечение и реабилитация при гинекологических заболеваниях", Минск ,1994

4. Пшеничникова Т.Я., "Бесплодие в браке", Москва, 1991

5. Акунц К.Б., "Актуальные вопросы бесплодия в браке", Ереван, 1979

6. Пшеничникова Т.Я., "Бесплодный брак (проблемы и перспективы)", М. 1989

7. Машковский М.Д., "Лекарственные средства", М. 1993

8. Орлова В.Г., "Стимуляция овуляции гонадотропинами", Акуш. и гин. №9, 1988

9. Манушлова И.А., "Современные принципы лечения эндокринного бесплодия", Сов. мед. №6, 1986

Читайте также: