Правила работы в микробиологической лаборатории реферат
Обновлено: 30.06.2024
Студенты изучают и конспектируют рекомендуемую литературу по следующим вопросам:
1. Устройство микробиологической лаборатории
2. Посуда для микробиологических анализов
3. Специальные микробиологические приборы
Литература: №№ 1, 10, 11, 15, 16.
1. Устройство микробиологической лаборатории
Микробиологическая лаборатория, как правило, размещается в специально оборудованном помещении с изолированным входом. Комнаты должны быть просторные и светлые с естественным освещением не менее 110 лк. Стены в лаборатории должны быть гладкими, нижнюю часть их на высоту 170 см окрашивают светлой масляной или эмалевой краской, верхнюю часть и потолок белят известью или известковой краской, впитывающей влагу. Полы покрывают линолеумом, пластиком или каким-либо другим легко моющимся материалом, мебель окрашивают в светлые тона.
Основные помещения оборудуют столами лабораторного типа, шкафами и полками для хранения аппаратуры, посуды, реактивов. Столы должны иметь подводку электроэнергии и снабжены газовыми горелками, лампами дневного света. В лаборатории необходимо иметь водопровод и слив.
Стол для микроскопирования располагают перед окнами на северной стороне. В солнечные дни окна в помещении завешивают белыми шторами для защиты от прямых солнечных лучей, от действия которых может выйти из строя микроскоп в связи с размягчением клея (канадского бальзама из пихтовой смолы), связывающего линзы в оптических системах, а также для защиты глаз от утомления при микроскопировании. Стол должен быть устойчивым, поэтому его лучше укреплять на кронштейнах. От окна микроскоп должен быть расположен на расстоянии около 1 м.
Кроме основного рабочего помещения лаборатория имеет бокс, стерилизационную, где размещены автоклавы и сушильные шкафы, термостаты или термостатированные комнаты для выращивания микроорганизмов, помещение для хранения культур, моечную, холодильную комнату и т. д.
При отсутствии бокса-комнаты широко используют настольные боксы разных конструкций; например, стеклянные настольные шкафы, рамы и дно которых сделаны из отполированного дерева. В среднем размеры шкафа составляют: ширина 62, высота 54 и глубина 50 см. Передняя стенка шкафа поднимается в пазах и может устанавливаться на разной высоте. Перед работой шкаф стерилизуют разбавленным водой этиловым спиртом с объемной долей этилового спирта 70-75%. Во время работы шкаф открывают настолько, чтобы руки работающего могли свободно двигаться.
2.Посуда для микробиологических анализов
Для проведения работ по культивированию микроорганизмов, приготовлению питательных сред и для других целей пользуются посудой, которая должна удовлетворять определенным требованиям и в первую очередь - не должна содержать посторонних веществ. Она должна быть тщательно вымыта и не должна выделять в среду никаких веществ, например щелочей, окислов железа, кислот и др.; лучше всего пользоваться стеклянной, эмалированной или алюминиевой посудой.
Используют посуду из стекла, выдерживающего нагревание при высокой температуре; для изучения свойств микроорганизмов применяют стеклянные приборы, стекла для микроскопирования; для извлечения микроорганизмов и пересевов - иглы и петли.
Посуда. В микробиологической практике чаще всего пользуются пробирками, чашками Петри и колбами разного вида.
В микробиологической практике чаще всего пользуются пробирками и чашками Петри.
Пробирки должны быть без ранта, из прозрачного стекла, размером 18x2,0 см и 18x1,5 см. Чтобы предохранить содержимое пробирок от попадания из воздуха микробов и культуры от высыхания их закрывают ватными пробками.
1 2 3
Заказать реферат (курсовую, диплом или отчёт) без рисков, напрямую у автора.
Похожие работы:
Воспользоваться поиском
 Похожие учебники и литература 2019:  Готовые списки литературы по ГОСТ | |
 Концепции современного естествознания ЕГЭ по биологии - справочник для подготовки История КСЕ Микробиология Философия биологии Фармацевтическая микробиология Зоогигиена и ветеринарная санитария Биология. Учебник Биология. Учебник, часть 2 Цитология и гистология лекции |
Перейти в список рефератов, курсовых, контрольных и дипломов по
дисциплине Биология, естествознание, КСЕ
- Для учеников 1-11 классов и дошкольников
- Бесплатные сертификаты учителям и участникам
Лекция №2 Микробиологическая лаборатория.
Объект изучения медицинских микробиологических лабораторий — патогенные биологические агенты (ПБА) — патогенные для человека микроорганизмы (вирусы, бактерии, грибы, простейшие), генно-инженерно модифицированные микроорганизмы, яды биологического происхождения (токсины), гельминты, а также материал (включая кровь, биологические жидкости и экскременты организма человека), подозрительный на содержание ПБА.
В зависимости от выполняемых исследований микробиологические лаборатории подразделяют на диагностические, производственные и научно-исследовательские.
В соответствии с типами микроорганизмов, изучаемых в них, выделяют бактериологические, вирусологические, микологические и протозоологические лаборатории.
Группы возбудителей инфекционных заболеваний
Регламентация условий работы с возбудителями инфекционных заболеваний проводится в соответствии со степенью опасности микроорганизмов для человека. По этому признаку выделено четыре группы возбудителей.
Группа I: возбудители особо опасных инфекций (чума, натуральная оспа, лихорадки Ласса, Эбола и др.).
Группа II: возбудители высококонтагиозных бактериальных грибковых и вирусных инфекций (сибирская язва, холера, лихорадка Скалистых гор, сыпной тиф, бластомикоз, бешенство и др.). В эту группу также включён ботулотоксин (но не сам возбудитель ботулизма).
Группа III: возбудители бактериальных грибковых, вирусных и протозойных инфекций, выделенные в отдельные нозологические формы (возбудители коклюша, столбняка, ботулизма, туберкулёза, кандидоза, малярии, лейшманиоза, гриппа, полиомиелита и др.). В эту группу также включены аттенуированные штаммы бактерий групп I, II и III.
Группа IV: возбудители бактериальных, вирусных, грибковых септицемий, менингитов, пневмоний, энтеритов, токсикоинфекций и острых отравлений, а также возбудители анаэробных газовых инфекций, синегнойной инфекции, аспергиллёза, амебиаза, аденовирусы, герпесвирусы и др.
Лаборатории разных групп риска.
В зависимости от уровня безопасности работы с микроорганизмами лаборатории подразделяют на четыре группы риска.
Первая группа риска: лаборатории особого режима (максимально изолированные) с высоким индивидуальным и общественным риском.
Вторая группа риска: режимные лаборатории (изолированные) с высоким индивидуальным и низким общественным риском.
Третья группа риска: базовые (основные) лаборатории с умеренным индивидуальным и ограниченным общественным риском.
Четвёртая группа риска: базовые (основные) лаборатории с низким индивидуальным и общественным риском.
В соответствии с выполняемыми задачами выделяют:
бактериологические лаборатории в составе ЛПУ;
бактериологические лаборатории в составе комитетов Госсанэпиднадзора;
учебные бактериологические лаборатории вузов;
проблемные и отраслевые бактериологические лаборатории научно-исследовательских институтов и предприятий по выпуску бактерийных препаратов;
специализированные бактериологические лаборатории по контролю за особо опасными инфекциями;
специализированные бактериологические лаборатории по контролю за отдельными группами бактерий: микобактериями, риккетсиями, лептоспирами и др.
Большая часть микробиологических лабораторий работает с ПБА III и IV групп, а изучением возбудителей особо опасных инфекций (группы I и II) занимаются только специализированные лаборатории.
Требования к организации работы с ПБА групп опасности III и IV.
1. Базовые лаборатории, работающие с ПБА групп III и IV, должны располагаться в отдельном здании или в изолированной части здания.
2. Они должны иметь два выхода: один для сотрудников, другой — для доставки материала для исследований (допускается передача материала через передаточное окно). В лабораториях вузов, научно-исследовательских институтов и на предприятиях по выпуску бактерийных препаратов допускается наличие одного входа.
3. Лаборатории должны иметь необходимый набор помещений в соответствии с производственной мощностью и номенклатурой выполняемых исследований.
4. В помещениях должны быть проведены водопровод, электричество, отопление и вентиляция. В системе водоснабжения должны быть предусмотрены раздельные сети подачи воды для лабораторных исследований и бытовых нужд (сеть питьевой воды). Последняя должна быть защищена от обратного тока воды из лабораторной сети.
5. Вентиляция должна быть приточно-вытяжной, при этом наиболее низкое давление вытяжной вентиляции должно быть в помещениях с наибольшей опасностью инфицирования. При необходимости вентиляцию следует оснастить фильтрами тонкой очистки воздуха.
6. Помещения должны иметь естественное и искусственное освещение.
Требования к проведению работ в микробиологической лаборатории
Работу с ПБА групп III и IV выполняют специалисты с высшим и средним специальным образованием. К ней допускают сотрудников, прошедших инструктаж по соблюдению требований безопасности работы с ПБА; последующий инструктаж следует проводить не реже одного разав год. Все сотрудники, работающие с ПБА, должны находиться на диспансерном учёте. Приборы, оборудование и средства измерения должны быть аттестованы, технически исправны и иметь технический паспорт. Их метрологический контроль и техническое освидетельствование следует проводить в установленные сроки.
Правила работы в бактериологической лаборатории:
1. К работе допускаются лица, прошедшие специальный инструктаж о правилах работы в баклаборатории.
2. Каждый сотрудник должен иметь индивидуальную спецодежду (халат, шапочку)
3. Запрещено выходить из лаборатории в спецодежде и надевать поверх неё верхнюю одежду
4. Обязательное выполнение правил личной гигиены
5. Не допускается прием пищи и курение в баклаборатории
6. Хранение личных вещей должно быть организовано в комнате для медперсонала
7. После окончания работы обязательно проводится влажная уборка всех помещений с применением дезрастворов
8. При загрязнении патогенным материалом необходимо: а) мебель обработать дезраствором, б) лабораторную посуду стерилизовать, в) руки сначала обработать дезраствором, а затем тщательно вымыть с мылом.
9. Не допускать лишних хождений, резких движений, посторонних разговоров.
Правила работы с культурой патогенных микроорганизмов:
1. Доставлять инфицированный материал в лабораторию и переносить его из одной лаборатории в другую на территории учреждения нужно в специально приспособленной посуде (металлических биксах, ящиках, баках)
2. Весь материал, поступивший в баклабораторию, должен рассматриваться как инфицированный
3. При распаковке присланного заразного материала необходимо соблюдать осторожность. Банки, содержащие материал для исследования, при получении обтирают снаружи дезраствором и ставят на подносы или кюветы.
4. О случаях аварии с посудой, содержащей патогенный материал, следует немедленно сообщить зав. лабораторией и немедленно провести обеззараживание объектов и обеззараживание рук, других частей тела и спецодежду.
5. Перед работой следует проверить качество посуды, пипеток, шприцев и другого оборудования.
6. При работе с культурой патогенных микроорганизмов необходимо строго соблюдать общепринятые в бактериологической практике технические приемы, исключающие возможность соприкосновения рук с заразным материалом:
- с инфицированным материалом работают только с помощью инструментов (пинцеты, петли, корнцанги),
- прикасаться руками к исследуемому материалу и конденсату в засеянных чашках запрещается,
- перед работой тщательно проверяют целостность стеклянной посуды, проходимость игл и надежность поршней шприцев,
- при посеве материала делают надпись на пробирках, чашках Петри, колбах, флаконах с указанием номера анализа (культуры) и даты посева,
- в пробирки и чашки Петри материал высевают вблизи от огня горелки с обжиганием петли, шпателя, краев пробирки,
- растворы, содержащие патогенные микроорганизмы, набирают пипеткой с помощью резинового баллона,
- насасывать ртом и переливать растворы из сосуда в сосуд через край нельзя
- по окончанию работы запрещается оставлять на рабочих столах нефиксированные мазки, чашки Петри, пробирки и другую посуду с инфицированным материалом, все объекты, содержащие ПБА, должны быть убраны в хранилища (холодильники, термостаты, шкафы) с обязательной дезинфекцией столов. Использованные пипетки полностью (вертикально) погружают в дезинфицирующий раствор, избегая образования пузырьков в каналах. Остатки ПБА, использованную посуду и оборудование собирают в закрывающиеся ёмкости и передают в автоклавную.
-категорически запрещено сливать отходы с ПБА в канализацию без предварительного обеззараживания.
- после окончания работы с ПБА и заражёнными животными, а также после ухода из лаборатории следует тщательно вымыть руки.
7. Заразный материал и отработанные культуры подлежат обязательному уничтожению. Инструменты, используемые в работе с заразным материалом и рабочее место дезинфицируют, руки после дезинфекции моют с мылом
8. Работники баклаборатории подлежат обязательной вакцинации против тех заболеваний, возбудители которых могут встречаться в исследуемых объектах.
К основным методам микробиологии относятся:
• микроскопический — изучение морфологии микробов с использованием специальной микроскопической техники;
• бактериологический (культуральный) — получение чистых культур микробов и изучение их биологических свойств, позволяющие провести идентификацию, т.е. определение, вида микроба;
• серологический — выявление антител к возбудителям в биологических жидкостях организма больного (чаше в сыворотке крови; от лат. serum — сыворотка);
• аллергологический — оценка аллергических феноменов, возникающих в организме человека (на коже, слизистых оболочках или в крови) под действием компонентов или цельных клеток микроба-возбудителя;
• биологический — моделирование инфекционных процессов на лабораторных животных или куриных эмбрионах;
• молекулярно-биологический — изучение состава микробных нуклеиновых кислот с помошью полимеразной цепной реакции, сиквенирования и гибридизации ДНК.
Реферат
На Тему:Устройство микробиологической лаборатории. Правила
работы в лаборатории. Мир микробов. Структура бактериальной
клетки. Методы окраски. Техника микроскопирования. Методы
исследований бактерий в живом состоянии.
Выполнила:Дунзурова Карина
208А стом группа
только патогенные, но и сапротрофные бактерии. Иногда процесс дезинфекции оказывает стерилизующее действие.
Обработка помещений микробиологической лаборатории
Пол, стены и мебель в микробиологической лаборатории протирают раствором различных дезинфицирующих веществ. В качестве дезинфицирующих растворов чаще всего пользуются двух-, трехпроцентным раствором бикарбоната натрия, трех-, пятипроцентным водным раствором фенола (карболовой кислоты), лизола
(препарата фенола с добавлением зеленого мыла) или трехпроцентным водным раствором хлорамина и некоторыми другими дезинфектантами.
Воздух в лаборатории очищают проветриванием – это наиболее простой способ.
Продолжительная вентиляция помещения через форточку (не менее 30 - 60 минут) резко снижает количество микроорганизмов в воздухе, особенно при значительной разнице в температуре между наружным воздухом и воздухом помещения. Более эффективный и наиболее часто применяемый способ дезинфекции воздуха – ультрафиолетовое облучение лучами с длиной волны от 260 нм. Эти лучи обладают высокой антимикробной активностью и могут вызывать гибель не только вегетативных клеток, но и спор микроорганизмов.
В зависимости от степени загрязнения воздуха для его стерилизации требуется облучение от тридцати минут до нескольких часов.
В качестве источника ультрафиолетового излучения используются бактерицидные лампы. Излучателем в них служит электрическая дуга, возникающая в парах ртути низкого давления. Обычно бактерицидные лампы представляют собой трубки различного диаметра и длины, изготовленные из специального стекла, пропускающего излучение с длиной волны 254 нм. Каждая трубка вмонтирована в корпус-держатель и может быть снабжена отражателем. Необходимо иметь в виду, что ультрафиолетовые лучи могут вызывать тяжелые поражения глаз, поэтому при работе с бактерицидными лампами нужно строго следить за тем, чтобы ни прямые, ни отраженные ультрафиолетовые лучи не попадали в глаза. В небольших помещениях при включенной бактерицидной лампе находиться нельзя.
Рабочее место, где непосредственно работают с культурами микроорганизмов, требует особенно тщательной обработки. Рабочий стол следует дезинфицировать не только до начала работы, но и после ее окончания. Для протирания поверхности стола можно использовать растворы лизола и хлорамина, а также 70%-е растворы изопропилового и этилового спиртов. Названные спирты можно также применять для дезинфекции рук. В тех случаях, когда поверхность стола имеет водоотталкивающее покрытие, особенно удобен лизол. Поверхность рабочего стола можно дезинфицировать и ультрафиолетовыми лучами. При этом следует учитывать, что бактерицидное действие лучей тем выше, чем ближе облучаемая поверхность к источнику излучения.
Правила по технике безопасности при работе в микробиологической лаборатории
Подготовку лаборатории к занятиям проводит лаборант.
Студенты, выполняя задания, должны соблюдать следующие правила:
1) каждый студент в микробиологической лаборатории работает на постоянном месте, выполняя задания индивидуально;
2) на рабочем месте не должно быть посторонних предметов, личные вещи студентов следует хранить в специально отведенном месте;
3) студент должен работать только в чистом халате, сменной обуви, волосы должны быть подобраны, не падать на плечи;
4) в лаборатории запрещается курение, прием пищи, лишнее хождение по лаборатории;
5) при работе с культурами микроорганизмов необходимо соблюдать все правила микробиологической техники: на пробирках, колбах, чашках Петри должна быть сделана надпись, содержащая родовые и видовые названия культуры, дату засева, фамилию студента и номер группы;
6) поскольку некоторые микроорганизмы, особенно споры грибов, являются аллергенами, не допускать их распыления – не оставлять открытыми чашки Петри, пробирки, колбы с культурами микроорганизмов;
7) строго соблюдать правила обращения с химическими реактивами и красителями;
8) с большой осторожностью пользоваться смесью спирта с эфиром, не переносить ее на столы с горелками;
9) перед тем как набирать ртом с помощью пипетки суспензии микроорганизмов или реактивы, следует убедиться, что пипетка закрыта с тупого конца ватой;
10) ни в коем случае нельзя дуть на загоревшуюся пробку, так как это только усилит горение, ее нужно быстро ввести в пробирку, где вата сама потухнет;
11) все предметы, использованные при работе с живыми культурами, должны быть обеззаражены либо обжиганием в пламени горелки (петли, иглы), либо погружением в дезинфицирующий раствор (предметные и покровные стекла, пипетки, шпатели);
12) все засеянные пробирки, чашки помещаются в термостат или сдаются лаборанту; отработанный материал (пробирки, чашки Петри) также помещается в определенные емкости по указанию лаборанта для их дальнейшего обеззараживания;
13) в конце занятия студент должен привести в порядок рабочее место, тщательно вымыть руки; необходимо иметь индивидуальное полотенце, салфетки для вытирания рук;
14) перед уходом из лаборатории дежурный должен проверить, выключены ли газ, вода, электроприборы.
Каждый студент ведет журнал лабораторных работ, являющийся документом, позволяющим контролировать правильность полученных результатов. Записи проводятся в определенной последовательности и должны содержать следующее: а) номер работы, ее название, дату постановки и окончания опыта; б) объект исследования; в) условия проведения опыта, включая методы анализов; г) полученные результаты и выводы из них.
При изучении морфологии культур делаются их зарисовки при определенных увеличениях микроскопа, что указывается в тетради; цифровые данные обобщают в таблицах, графиках, диаграммах. Каждая лабораторная работа должна заканчиваться собственными наблюдениями и выводами, записанными в журнале.
ТЕХНИКА МИКРОСКОПИРОВАНИЯ С ИММЕРСИОННОЙ СИСТЕМОЙ
При микроскопировании с помощью микроскопа со встроенным в основание осветителем необходимо:
1. Включить микроскоп.
2. На препарат, находящийся на предметном столике нанести каплю иммерсионного масла.
3. Перевести микроскоп на иммерсионный объектив (100*, белый ободок по контуру).
4. Под контролем глаза с помощью макровинта осторожно поднять предметный столик до соприкосновения объектива с каплей иммерсии на препарате.
5. Глядя в окуляр макровинтом медленно опустить предметный столик до появления изображения в поле зрения, с помощью микровинта добиться резкого изображения объекта.
6. По окончании работы опустить предметный столик, снять препарат, салфеткой осторожно удалить масло с объектива.
7. Объектив отвести в сторону, выключить свет.
Микроскопический метод исследования – это метод обнаружения и определения микроорганизмов в исследуемом материале на основании:
- морфологии микробной клетки;
- специфического расположения микробных клеток в мазке;
- наличия специфических (необязательных) органоидов в микробной клетке;
- тинкториальных свойств микробной клетки (отношение к красителям).
МИКРОСКОПИЧЕСКИЙ МЕТОД ИССЛЕДОВАНИЯ
⬇
Исследуемый материал
⬇
ПРИГОТОВЛЕНИЕ ПРЕПАРАТА
1⃣ этап
Приготовление мазка -
Высушивание мазка -
Фиксация мазка
ОКРАШИВАНИЕ ПРЕПАРАТА
2⃣ этап
В зависимости от цели исследования мазок окрашивается разными методами:
- Простые (определение формы микроорганизмов, расположения их в мазке);
- Сложные (выявление отдельных клеточных структур)
3⃣ Этап МИКРОСКОПИЯ ПРЕПАРАТА
4⃣ Этап ЗАКЛЮЧЕНИЕ ПО РЕЗУЛЬТАТАМ ИССЛЕДОВАНИЯ
ОКРАШИВАНИЕ ПРЕПАРАТОВ
Для окраски препаратов в бактериологической практике используются как основные, так и кислые красители. Из основных красителей наиболее часто применяются: нейтральный красный – сафранин, фуксин (красные); генцианвиолет, метилвиолет, кристалвиолет (фиолетовые); везувин (коричневый); метиленовый синий, малахитовый зеленый. Из кислых красителей широкое применение находят: кислый фуксин, эозин (красные), Конго, пикриновая кислота (желтые), нигрозин
(черный). Для окраски мазков пользуются растворами красок или красящей бумагой, предложенной Синевым А.И.
Различают простые и сложные методы окраски. При простом методе прокрашивается вся клетка, при сложном – определенные клеточные структуры.
Простой метод окраски позволяет быстро определить форму микроорганизмов, размеры, расположение микроорганизмов в мазке. Для этого применяют один краситель. Чаще всего пользуются фуксином или метиленовым синим.
ТЕХНИКА ПРОСТОГО ОКРАШИВАНИЯ
1. Приготовленный и зафиксированный препарат поместить на стеклянный мостик.
2. На поверхность мазка наносят раствор красителя, так, чтобы краситель равномерно покрывал мазок.
3. Время экспозиции: фуксин Пфейффера - 1-2 минуты, метиленовая синь -5 минут.
4. По окончании окраски препарат промыть водой.
5. Мазок подсушить на воздухе или с помощью фильтровальной бумаги, затем микроскопировать.
В правильно окрашенном и хорошо промытом препарате поле зрения остается светлым и чистым, а окрашенными оказываются только клетки микроорганизмов
ОКРАСКА ПО ЦИЛЬ-НИЛЬСЕНУ.
Сущность: Для окрашивания кислотоустойчивых бактерий вместо обычных красителей применяют концентрированные растворы красителей с подогревом, например карболовый фуксин Циля, который окрашивает все микроорганизмы в рубиново-красный цвет. При последующей кратковременной обработке кислотой одни микробные клетки прочно удерживают краситель и не обесцвечиваются в растворе кислот, другие - теряют цвет. Это позволяет кислотоустойчивые микроорганизмы отличить от не обладающих этим свойством. Затем при дальнейшем докрашивании красителем другого цвета (например, метиленовой синью), некислотоустойчивые микроорганизмы приобретают цвет дополнительного красителя. А кислотоустойчивые микроорганизмы сохраняют цвет основного красителя (фуксина Циля).
Вид: В препарате, окрашенном по методу Циль-Нильсена, кислотоустойчивые микроорганизмы имеют рубиново-красный цвет, некислотоустойчивые микроорганизмы, лейкоциты, элементы ткани – голубой цвет.
Читайте также: