Определение сахара в биологических жидкостях реферат

Обновлено: 05.07.2024

Постоянный уровень глюкозы в крови – важное условие нормального течения процессов жизнедеятельности. В норме содержание глюкозы в крови составляет 3,3-5,5 ммоль/л. Падение ниже 3,3 ммоль/л – гипогликемия, увеличение содержания глюкозы в крови свыше 5,5 ммоль/л – гипергликемия. Как гипо-, так и гипергликемия сопровождаются метаболическими нарушениями в тканях, что приводит к различным патологическим состояниям. Если концентрация глюкозы в крови становится выше 8,0-10,0 ммоль/л, глюкоза появляется в моче (глюкозурия). Эту величину называют порогом почечной проницаемости для глюкозы.

При нормальном рационе питания концентрация глюкозы в крови поддерживается на уровне -3,3-5,5 ммоль/л (60-100 мг/дл). А в период пищеварения её концентрация может повышаться примерно до 150 мг/дл (8 ммоль/л).

Принцип и химизм ферментативного метода определения глюкозы в крови (глюкозооксидазного).

Определение глюкозы в крови глюкозооксидазным (ферментативным) методом

П ринцип метода: глюкоза крови способна окисляться кислородом воздуха под влиянием глюкозооксидазы с образованием перекиси водорода и глюконолактона. В ходе реакции образуется перекись водорода, которая дает индофеноловую реакцию аминоантипирина с хромогеном под действием пероксидазы. Количество образовавшегося красителя определяют электрофотоколориметрически, оно пропор-ционально содержанию глюкозы в крови.

Определение проводится натощак

П ринцип колориметрического метода определения глюкозы по реакции с орто-толуидином.

Метод основан на способности глюкозы при нагревании с ортотолуидином в растворе уксусной кислоты давать сине-зеленое окрашивание, интенсивность которого прямо пропорциональна содержанию глюкозы в крови. Метод колориметрический

Принцип количественного определения сахара мочи по альтгаузену.

В основе метода лежит цветная реакция, образующаяся при нагревании раствора глюкозы с раствором едкой щелочи. В качестве стандартов используют растворы мочи с содержанием 0,5%, 1%, 1,5%, 2%, 3% и 4% глюкозы после обработки их таким же образом, как и исследуемую мочу.

РАСЧЕТ КОЛИЧЕСТВА ЕДИНИЦ ИНСУЛИНА, НАЗНАЧАЕМОГО БОЛЬНОМУ САХАРНЫМ ДИАБЕТОМ.

Исходя из процентного содержания сахара в моче и суточного диуреза, рассчитать суточную потерю больным сахара. Расчет дозы инсулина Так, если в моче 3% сахара, а суточный диурез 4 л, больной теряет в сутки:

100 мл мочи – 3 г сахара, 4000 мл (сутки) – X, Х=120г

Пример расчета дозировки инсулина: 1 единица инсулина способствует усвоению 3-5 г глюкозы (в среднем 4 г). Для усвоения 120 г нужно: 120 : 4 = 30 ед. инсулина . С учетом того, что какое-то количество инсулина вырабатывается, для предотвращения гипогликемии больному вводится 80-85% рассчитанной дозы.

Классификация:

1. Моносахариды – производные многоатомных спиртов, содержащих альдегидную или кетонную группу. В

зависимости от количества углеродных атомов моносахариды делятся на:

И стинные:

- пентозы (рибоза, дезоксирибоза)

- гексозы (глюкоза, галактоза, фруктоза) и др.

- уроновые кислоты – если вместо СН₂ОН группы в 6 положении – СООН группа (у глюкозы – глюкуроновая

кислота; у галактозы – галактоуроновая кислота). Они входят в состав гликозаминогликанов;

- аровые кислоты – если в 6 и 1 положениях – СООН группы (у глюкозы – глюкаровая, у галактозы –

- аминосахара – если во 2 положении – NН₂группа (у глюкозы – глюкозамин, у галактозы – галактозамин). Они

входят в состав гликозамингликанов;

- N-гликозиды (рибоза, дезоксирибоза, соединенные с азотистым основанием в нуклеотиде - N-гликозидной

- фосфорные эфиры моносахаридов – замещение атомов Н на остатки фосфорной кислоты: глюкозо-6-фосфат;

фруктозо-1,6-дифосфат; рибозо-5-фосфат и др.

2. Олигосахариды (в их состав входят от 2 до 10 остатков моносахаридов)

- мальтоза состоит из 2 молекул α-Dглюкозы, соединенных α-1,4-гликозидной связью. Она имеет свободный

полуацетальный гидроксил, обладает восстанавливающими свойствами;

- лактоза (молочный сахар) состоит из β-Dгалактозы и α-Dглюкозы соединенные β-1,4-гликозидной связью.

Имеет свободный полуацетальный гидроксил и обладает восстанавливающими свойствами.

- сахароза состоит из α-Dглюкозы и β-Dфруктозы, соединенные α-1,2-гликозидной связью. Свободного

полуацетального гидроксила не имеет, поэтому не обладает восстанавливающими свойствами.

- гомополисахариды (крахмал, клетчатка, гликоген);

- гетерополисахариды (гликопротеины, протеогликаны, гликолипиды).).

Тут вы можете оставить комментарий к выбранному абзацу или сообщить об ошибке.

Презентация на тему: " Методы определения глюкозы в биологических жидкостях." — Транскрипт:

1 Методы определения глюкозы в биологических жидкостях

3 1. Редуктометрические методы: титрометрическийй способ Хагедорна Йенсена 2. Колориметрические методы. ортотолуидиновый метод 3. Ферментативные методы: основанный на гексокиназой реакции глюкозооксидазы 4. Электрохимические методы,

4 Для определения глюкозы крови используют три группы методов: ферментативные, из которых наибольшее распространение получили глюкозооксидазный метод и гексокиназный редуктор метрический метод, основанный на способности глюкозы восстанавливать соли меди или нитробензола – метод Хагедорна-Иенсена; метод, основанный на цветной реакции с продуктами, образующимися при нагревании углеводов с толуидином Орто- толуидиновый метод.

5 титрометрическийй способ Хагедорна Йенсена основан на свойстве сахара восстанавливать при кипячении в щелочной среде железистосинеродистую и железосинеродистую соли калия. По степени этого восстановления титрометрический исследуют концентрацию сахара в крови. Важным преимуществом метода является дешевизна и возможность использования в любой лаборатории

7 ортотолуидиновый метод Гультмана в модификации Хиваринена-Никкила, состоящий в определении интенсивности окрашивания раствора, возникающего при взаимодействии ароматического амина ортотолуидина с альдегидной группой глюкозы в кислой среде. Этот способ точен и дает возможность более специфичного определения содержания глюкозы. Глюкоза при нагревании с ортотолудином в присутствии серной кислоты дает сине- зеленое окрашивание.

9 глюкозооксидазный метод – метод определения содержания глюкозы в крови и моче, основанный на реакции ее окисления в присутствии фермента глюкозооксидазы с образованием перекиси водорода, которая в свою очередь в присутствии пероксидазы окисляет ортотолидин с образованием окрашенных продуктов; расчет концентрации глюкозы в крови проводят фотометрическийй, сравнивая интенсивность окраски с калибровочным графиком Глюкозооксидазным методом можно определять количество глюкозы в сыворотке и плазме крови, цельной крови и спинномозговой жидкости. Принцип При окислении глюкозы кислородом воздуха при каталитическом действии глюкозооксидазы образуется эквимолярное количество перекиси водорода. Под действием пероксидазы перекись водорода окисляет 4 аминоантипирин в присутствии фенола в окрашенное соединение розово малинового цвета, определяемое фотометрическийй.

11 основанный на гексокиназой реакции. Глюкоза под действием гексокиназы фосфорилируется за счет АТФ, образовавшийся Гл 6 Ф в присутствии дегидрогеназы восстанавливает НАДФ. Количество последнего определяют по увеличению светопоглощения в ультрафиолетовой области. Метод слишком дорогостоящий для практических лабораторий.

13 4. Электрохимические методы, в которых используются электроды, содержащие иммобилизованные ферменты, в частности, глюкозооксидазу. Реакция регистрируется по количеству образованной перекиси водорода или по убыли кислорода, израсходованного на окисление глюкозы.

14 5. Диагностические полоски, использующие глюкозооксидазно пероксидазную реакцию и производные бензидина в качестве хромогена.

16 Качественные методы: с помощью индикаторных полосок с помощью индикаторных полосок; проба Гайнеса; проба Фелинга; проба Бенедиктапроба Бенедикта и др. Количественные методы: глюкозооксидантный (энзиматический) метод; ортотолуидиновый метод; унифицированный поляриметрический метод определения содержания глюкозы унифицированный поляриметрический метод определения содержания глюкозы и др.

17 Унифицированный метод определения с помощью индикаторных полосок Метод основан на специфическом окислении глюкозы с помощью фермента глюкозооксидазы; образовавшаяся при этом перекись водорода разлагается пероксидазой и окисляет краситель. Изменение окраски красителя при окислении свидетельствует о присутствии глюкозы в моче.

18 Унифицированные методы обнаружения глюкозы в моче. Проба Гайнеса Можно использовать готовый набор реактивов. Метод основан на способности глюкозы восстанавливать в щелочной среде при нагревании гидрат окиси меди (синего цвета) в гидрат закиси меди (желтого цвета) и закись меди (красного цвета). Для того чтобы из гидрата окиси меди при нагревании не образовался черный осадок окиси меди, к реактиву добавляют глицерин, гидроксильные группы которого связывают гидрат окиси меди.

19 Проба Бенедикта Реакция основана на свойстве глюкозы восстанавливать гидрат окиси меди в щелочной среде в гидрат закиси меди (желтый цвет) или закись меди (красный цвет).

20 Унифицированный поляриметрический метод определения содержания глюкозы Метод основан на использовании свойства раствора глюкозы вращать плоскость поляризованного луча вправо. Угол вращения пропорционален концентрации глюкозы в растворе.

21 Колориметрический метод Альтгаузена Принцип метода Используется цветная реакция, получаемая при нагревании раствора глюкозы со щелочью.

22 Определение уровня сахара в моче по цветной реакции с ортотолуидином Принцип метода Глюкозооксидаза окисляет глюкозу с образованием перекиси водорода, которая под действием пероксидазы окисляет ортотолидин с образованием синего хромогена. Обе реакции протекают одновременно при рН 4,8.

План
I Введение.
II Общие сведения о глюкозе.
III Методы определения глюкозы в крови.
1.Редуктометрические методы
2.Колорометрические методы.
3. ферментативные методы
IV Заболевания, связанные с изменение уровня глюкозы в крови.
V Список используемой литературы

Фрагмент работы для ознакомления

Список литературы [ всего 7]

V Список используемой литературы
1.Березов Т.Т.,Коровкин Б.Ф. Биологическая химия.Москва, “Медицина”,2005
2.Бутолин Е.Г., Иванов В.Г. Клиническая информативность показателей биологических жидкостей организма (Справочное пособие). Ижевск, Экспертиза. 1998
3.Грандберг И.И. Органическая химия. Москва, Дрофа 2005
4.Маршалл Дж. Клиническая биохимия. Москва,”Гэотар-Медиа”, 2005
5.Пропедевтика внутренних болезней под ред. Василенко В.Х..Москва, “Медицина”, 2005
6.Руководство по клиническому обследованию больного под ред. Баранова А.А.. Москва, “Гэотар-Медиа” ,2007
7.Учебное пособие по клиническим лабораторным методам исследования под ред проф Сумарокова А.В.. Москва, “Медицина”, 1998

Пожалуйста, внимательно изучайте содержание и фрагменты работы. Деньги за приобретённые готовые работы по причине несоответствия данной работы вашим требованиям или её уникальности не возвращаются.

* Категория работы носит оценочный характер в соответствии с качественными и количественными параметрами предоставляемого материала. Данный материал ни целиком, ни любая из его частей не является готовым научным трудом, выпускной квалификационной работой, научным докладом или иной работой, предусмотренной государственной системой научной аттестации или необходимой для прохождения промежуточной или итоговой аттестации. Данный материал представляет собой субъективный результат обработки, структурирования и форматирования собранной его автором информации и предназначен, прежде всего, для использования в качестве источника для самостоятельной подготовки работы указанной тематики.

От сахарного диабета в нашей стране страдает более 5% населения, при этом зачастую заболевание выявляется достаточно поздно, когда развиваются тяжелые осложнения. Поэтому анализ крови на глюкозу требуется проходить регулярно, особенно людям в группе риска (наличие диабета у родственников, избыточная масса тела).

Зачем его назначают

Главный источник глюкозы – пища богатая простыми либо сложными сахарами, их соединениями. При их разложении в пищеварительном тракте глюкоза всасывается в кровь, затем поступает в клетки организма. Баланс уровня глюкозы в крови поддерживается за счет специфического гормона – инсулина. Он вырабатывается особыми отделами поджелудочной железы – островками Лангерганса.

В ответ на повышение уровня глюкозы происходит выброс инсулина, без которого большая часть клеток тела практически не способны впитывать этот моносахарид. Чем больше глюкозы поступает в кровь – тем больше инсулина вырабатывается. Но при регулярном потреблении больших количеств сахара и по ряду других причин эта тонкая система поддержания баланса уровня углеводов нарушается.

В результате развивается тяжелое заболевание – сахарный диабет I типа. Основные симптомы:

Сильная жажда, особенно по утрам,
Частые мочеиспускания.
Запах ацетона изо рта.
Учащение сердцебиения.
Нарушения зрения.
Медленное заживление ран, развитие прыщей и фурункулов.

Любой из этих симптомов означает что нужно сдать анализ на глюкозу. Также это исследование нужно регулярно проходить всем людям старше 30 лет (1 раз в 2-3 года), после 40 лет нужно сдавать анализ не реже 1 раза в год. Это нужно для выявления заболевания на самых ранних стадиях развития, так как сахарный диабет длительное время способен протекать бессимптомно.

Статистическая информация свидетельствует, что уровень заболеваемости диабетом среди всех групп населения быстро растет. Поэтому сдавать кровь нужно хотя бы раз в несколько лет, даже если никаких симптомов болезни нет. Ранняя диагностика скрытых форм диабета позволяет значительно повысить эффективность лечения, избежать развития тяжелых осложнений.

Описание методов анализа

Для проведения анализа на глюкозу требуется кровь, в зависимости от методики берется венозная либо капиллярная. Полученный от пациента материал исследуется при помощи специального оборудования и реактивов, что позволяет определить количество глюкозы в крови. Существует достаточно много разновидностей лабораторных исследований, которые позволяют с высокой точностью определить уровень содержания сахара в крови.

Биохимическое исследование

Это универсальный метод лабораторной диагностики, который позволяет получить точные данные о наличии в крови множества веществ (до 20-30 показателей), в том числе – количестве сахара. Для анализа требуется венозная кровь которая исследуется в специализированной лаборатории.

Позволяет обнаружить скрытые нарушения обмена углеводов. Обследуемый сдает кровь из вены строго натощак. Потом выпивает один стакан раствора глюкозы в воде, сдает кровь еще четырежды на протяжении 2 часов.

Обнаружение гликированного гемоглобина

Гликогемоглобин – стойкое соединение глюкозы с гемоглобином, сохраняется в крови до 120 дней. Исследование назначается людям с уже диагностированным диабетом, позволяет достоверно оценить уровень углеводов в предыдущие несколько месяцев.

Глюкозтолерантный тест на C-пептид

Исследуется сыворотка крови больного сахарным диабетом. Основное назначение теста – контроль схемы лечения диабета, подбор правильной дозы инсулина, сахароснижающих препаратов и диеты. Это исследование позволяет оценить функциональную активность клеток, продуцирующих инсулин в островках Лангерганса.

Тест на фруктозамин

Служит для определения количества белков, соединенных с глюкозой в плазме крови. Дает информацию об уровне сахара на протяжении предыдущих 1-3 недель. Используется для точной оценки эффективности лечения диабета и корректировки лекарственных схем. Применяется для обнаружения скрытых форм диабета у больных анемией, беременных.

Тест на глюкозтолерантность для беременных

Проводится также как обычный тест на толерантность к сахару. Назначается беременным для определения скрытых нарушений обмена глюкозы, которые могут вызывать гестационный диабет. Это специфическое для беременных заболевание может приводить к усиленному росту и увеличению веса плода (макросомии), другим нарушениям течения беременности и процесса родов.

Выяснение уровня лактата

Показывает количество молочной кислоты растворенной в плазме. Она является продуктом бескислородного разложения глюкозы, высокий уровень лактата позволяет заподозрить нарушение обмена сахаров на самых ранних стадиях развития диабета.

Экспресс-тест

Позволяет быстро определить уровень глюкозы в крови, часто применяется в бытовых условиях. Позволяет пациенту самостоятельно контролировать уровень сахара. Методика обследования проста:

На специальную тест-полоску помещается капля крови.
Она вставляется в прибор – глюкометр.
За 1 минуту прибор дает достаточно точный результат.

Экспресс-методика не обеспечивает такой же точности как лабораторная диагностика, но позволяет больному проводить ежедневный мониторинг уровня сахара в крови с приемлемой точностью. Также вы можете ознакомиться с ценами на услуги нашего медицинского центра.

Показания к исследованию

Прохождение регулярной диагностики для раннего обнаружения диабета.
Наличие симптомов, характерных для повышенного либо пониженного содержания глюкозы в крови.

Подготовка к анализу

Особой подготовки перед анализами на глюкозу не требуется. Кровь для диагностики берется утром, строго натощак в зависимости от назначенной методики кровь может потребоваться из вены либо из пальца. Поэтому пациенту нет необходимости вникать во все тонкости того, как сдавать анализ крови на глюкозу, главное не употреблять пищу перед взятием крови, это может сильно исказить результаты теста.

Для экспресс-теста применяется только кровь из пальца (капиллярная). Врачи рекомендуют за сутки до исследования избегать физических и психоэмоциональных нагрузок, исключить употребление спиртного, переедание. Для экспресс-диагностики кровь можно брать в любое время суток.

Что означают результаты исследования

Точную интерпретацию данных анализа может провести только специалист, но знание норм, характерных для показателей при различных методиках обследования может помочь лучше ориентироваться в состоянии собственного организма.

Нормальные показатели для биохимического исследования:

В случае, когда проводилась нагрузочная проба нормальным считается содержание глюкозы до 7,9 ммоль/л.

Нормальный уровень глиозилированного гемоглобина одинаков у всех категорий обследуемых и составляет не более 5,7%. Допустимое количество фруктозамина составляет:

У мужчин – 117-280 мкмоль/л.
У женщин – 160-350 мкмоль/л.

Нормальные показатели для исследования на лактат составляют от 0,5 до 2,2 ммоль/л.

Развитии диабета.
Нарушениях со стороны желез внутренней секреции.
Наличии панкреатита.
Заболеваниях печени.
Отклонения от нормы в сторону понижения также свидетельствуют о различных патологиях внутренних органов:
Гипотиреоз (недостаток гормонов щитовидной железы).
Нарушения функции печени.
Отравление алкоголем, другими химическими веществами (мышьяк).

Повышение количества лактата служит признаком диабета либо преддиабетного состояния. Причиной могут быть другие болезни: гликогенозы, цирроз, множество других. Снижение показателей лактата позволяет диагностировать у пациента анемию.

Нагрузочные тесты могут свидетельствовать о преддиабетическом процессе (если уровень углеводов не выше 11 ммоль/л), большие значения указывают на развитие диабета.Повышение уровня гликированного гемоглобина свидетельствует о развитии диабета, при показателе выше 6,5%.

Повышение фруктозамина также служит маркером развития диабета, а также других заболеваний – цирроза печени, недостаточной функции почек. Слишком низкий уровень фруктозамина встречается при диабетической нефропатии, гипертиреозе, нефротическом синдроме.

Отклонение показателей от нормального уровня не всегда свидетельствует о наличии тяжелых патологий. Они могут возникать как временное явление при высоких физических либо психических нагрузках, после злоупотребления алкоголем, неправильном питании и воздействии множества других факторов.

Поэтому при выявленных нарушениях врач обязательно использует дополнительные методики диагностики, которые позволят уточнить диагноз, назначить эффективное лечение.

Анализ на глюкозу при беременности

Среди беременных достаточно широко распространен гестационный диабет, который отличается отсутствием ярко выраженной симптоматики, при этом может послужить причиной серьезных патологий плода и заболеваний матери.

Обычные биохимические анализы могут не дать достаточно надежных результатов, поэтому для выявления гестационной формы заболевания используются тесты на гликированный гемоглобин и нагрузочные пробы.

Наиболее достоверные результаты можно получить при проведении анализа на 25-28 неделях беременности. Именно в этот период поджелудочная железа матери испытывает наибольшую нагрузку.

Особой подготовки к нагрузочной пробе от беременной не требуется. Главное не употреблять пищу за 8 часов до теста и пить только воду. Для повышения достоверности анализа рекомендуется за 2-3 дня до обследования снизить уровень потребления сладостей. Если женщина принимает лекарственные препараты – необходимо обязательно сообщить об этом врачу.

Если диабет был обнаружен – потребуется корректировка рациона (снижение уровня потребления углеводов), тщательный мониторинг веса плода, более частые посещения врача. Инсулин и сахароснижающие препараты назначаются редко, только в самых тяжелых случаях. Чаще всего удается проконтролировать уровень сахара без использования лекарственных средств.

Читайте также: