Номенклатура микробиологических лабораторий их структура и оснащение базовой лаборатории кратко

Обновлено: 05.07.2024

Задачи бактериологических лабораторий:

- выделение и идентификация возбудителей инфекционных за­болева­ний;

– определение наиболее эффективного антибактериального препа­рата;

– контроль за санитарным состоянием объектов окружающей среды (воздух, вода, почва, пищевые продукты, смывы лекарства);

– оценка состояния иммунной системы.

Лаборатории снабжены рядом обязательных приборов и аппаратов.

2. Термостаты и холодильники.

3. Приборы для приготовления питательных сред, растворов и т.ддистил­лятор, технические и аналитические весы, рН-метры, аппара­тура для фильтрования, водяные бани, центрифуги.

4. Набор инструментов для манипуляций с микробами: бак­териологические петли, шпатели, иглы, пинцеты и др.

5. Лабораторная посуда: пробирки, колбы, чашки Петри, матрацы, флаконы, ампулы, пастеровские и градуированные пипетки и т.д

В лаборатории выделено место для окраски микроскопичес­ких препаратов, где находятся растворы специальных красите­лей, спирт, кислоты, фильтровальная бумага и др. Каждое рабочее место снабжено газовой горелкой или спиртовкой и емкостью с дезинфицирующим раствором. Для повседневной работы лаборатория должна располагать необходимыми пита­тельными средами, химическими реактивами, диагностически­ми препаратами и другими материалами.

Техника безопасности в лаборатории. Мероприятия по окончании работы. Мероприятия при аварийной ситуации, журнал регистрации аварийных ситуаций.

Ответ:

1. В помещение лаборатории нельзя входить без специальной одежды – халата, шапочки, сменной обуви. Смена рабочей одежды должна проводиться по мере загрязне­ния, но не реже 1 раза в неделю. Перед сдачей в стирку защитная оде­жда должна быть обеззаражена.

2. Запрещается в помещении прием и хранение пищи, курение.

3. Нельзя использовать лабораторную спец. одежду за пределами лаборатории.

4. Зараженный материал подлежит уничтожению, инструменты и поверхность рабочего стола, дезинфицируют после окончания работ.

5. После работы с культурой, животными, перед уходом из лаборатории необходимо вымыть руки.

6. Штаммы микроорганизмов, заразный материал должны хранится в сейфе или холодильнике закрытыми и опечатанными.

7. Необходимо проводить обеззараживания предметов, одежды, стола, комнаты, в случае если разбился сосуд с инфицированным материалом или произошел неосторожный разлив заразного материала.

8. Сотрудники лаборатории подлежат обязательной вакцинации против тех инфекционных заболеваний, с возбудителями которых возможна работа в лаборатории.

9. В лаборатории должна быть инструкция по технике безопасности, которую персонал должен знать и строго выполнять. Необходимо обязательно немедленно сообщить руководителю лаборатории обо всех аварийных ситуациях, создающих угрозу биологической безопасности и проводить все мероприятия для предотвращения последствий.

Мероприятия по окончании работы.

По окончании работы все объекты, содержащие ПБА, должны быть убраны в холодильники, термостаты; в обязательном порядке проводится дезинфекция рабочих поверхно­стей столов.

Остатки ПБА, использованная посуда, твердые отходы из "заразной" зоны лаборатории должны собираться в закрывающиеся емкости и передаваться в автоклавную или дезинфицироваться на месте.

Перенос ПБА и использованной посуды для обеззаражи­вания должен осуществляться в закрывающихся емкостях с соответст­вующей маркировкой.

После завершения работы помещение "заразной" зоны лаборатории запирается и опечатывается.

Мероприятия при аварийной ситуации, журнал регистрации аварийных ситуаций.

На случай аварии, при которой создается реальная или потенци­альная возможность выделения патогенного биологического агента должен быть план ликвидации аварии, запас дезинфицирующих средств, активных в отношении возбудителей, с которыми проводят исследования.

В подразделении, проводящем работу с ПБА, в специально отве­денном месте хранят гидропульт (автомакс), комплекты рабочей (для переодевания пострадавших) и защитной (для сотрудников, ликвиди­рующих последствия аварии) одежды, аварийную аптечку.

Во всех подразделениях, работающих с ПБА, не реже одного раза в год проводят плановые тренировочные занятия по ликвидации аварий.

При проливе или разбрызгивании биоматериалов о происшествии необходимо поставить в известность зав. КДЛ, который определяет вид и объем дезинфекционных мероприятий. Все случаи аварий в КДЛ любого профиля подлежат обязательной регистрации во внутрилабораторном журнале по технике безопасности. Дальнейшие действия сотрудников зависят от типа ЧС.

7. Нормативные документы, регламентирующие работу микробиологической лабо­ратории. Правила работы с биологическим мик­роскопом

Основные документы:

• СанПиН Безопасность работы с микроорганизмами III-IV групп патогенности (опасности) и возбудителями паразитарных болезней.

Кроме того, руководствуются различными приказами, стандартами, распоряжениями, МУК.

Правила работы с биологическим мик­роскопом

Микроскоп – точный оптический прибор, требующий бережного обращения. При работе с ним нельзя применять большие усилия.

Нельзя касаться пальцами поверхности линз, зеркал, светофильтров.

С поверхности линз удаляют пыль мягко беличьей кисточкой, промытой в эфире.

С зеркал сдувают пыль резиновой грушей. Протирать их нельзя.

Снаружи микроскоп протирают мягкой тряпкой, слегка пропитанной бескислотным вазелином, затем сухой чистой тряпкой.

Ответ:

Задачи бактериологических лабораторий:

- выделение и идентификация возбудителей инфекционных за­болева­ний;

– определение наиболее эффективного антибактериального препа­рата;

– контроль за санитарным состоянием объектов окружающей среды (воздух, вода, почва, пищевые продукты, смывы лекарства);

– оценка состояния иммунной системы.

Лаборатории снабжены рядом обязательных приборов и аппаратов.

2. Термостаты и холодильники.

3. Приборы для приготовления питательных сред, растворов и т.ддистил­лятор, технические и аналитические весы, рН-метры, аппара­тура для фильтрования, водяные бани, центрифуги.

4. Набор инструментов для манипуляций с микробами: бак­териологические петли, шпатели, иглы, пинцеты и др.

5. Лабораторная посуда: пробирки, колбы, чашки Петри, матрацы, флаконы, ампулы, пастеровские и градуированные пипетки и т.д

В лаборатории выделено место для окраски микроскопичес­ких препаратов, где находятся растворы специальных красите­лей, спирт, кислоты, фильтровальная бумага и др. Каждое рабочее место снабжено газовой горелкой или спиртовкой и емкостью с дезинфицирующим раствором. Для повседневной работы лаборатория должна располагать необходимыми пита­тельными средами, химическими реактивами, диагностически­ми препаратами и другими материалами.

Техника безопасности в лаборатории. Мероприятия по окончании работы. Мероприятия при аварийной ситуации, журнал регистрации аварийных ситуаций.

Ответ:

1. В помещение лаборатории нельзя входить без специальной одежды – халата, шапочки, сменной обуви. Смена рабочей одежды должна проводиться по мере загрязне­ния, но не реже 1 раза в неделю. Перед сдачей в стирку защитная оде­жда должна быть обеззаражена.

2. Запрещается в помещении прием и хранение пищи, курение.

3. Нельзя использовать лабораторную спец. одежду за пределами лаборатории.

4. Зараженный материал подлежит уничтожению, инструменты и поверхность рабочего стола, дезинфицируют после окончания работ.

5. После работы с культурой, животными, перед уходом из лаборатории необходимо вымыть руки.

6. Штаммы микроорганизмов, заразный материал должны хранится в сейфе или холодильнике закрытыми и опечатанными.

7. Необходимо проводить обеззараживания предметов, одежды, стола, комнаты, в случае если разбился сосуд с инфицированным материалом или произошел неосторожный разлив заразного материала.

8. Сотрудники лаборатории подлежат обязательной вакцинации против тех инфекционных заболеваний, с возбудителями которых возможна работа в лаборатории.

9. В лаборатории должна быть инструкция по технике безопасности, которую персонал должен знать и строго выполнять. Необходимо обязательно немедленно сообщить руководителю лаборатории обо всех аварийных ситуациях, создающих угрозу биологической безопасности и проводить все мероприятия для предотвращения последствий.

Мероприятия по окончании работы.

По окончании работы все объекты, содержащие ПБА, должны быть убраны в холодильники, термостаты; в обязательном порядке проводится дезинфекция рабочих поверхно­стей столов.

Остатки ПБА, использованная посуда, твердые отходы из "заразной" зоны лаборатории должны собираться в закрывающиеся емкости и передаваться в автоклавную или дезинфицироваться на месте.

Перенос ПБА и использованной посуды для обеззаражи­вания должен осуществляться в закрывающихся емкостях с соответст­вующей маркировкой.

После завершения работы помещение "заразной" зоны лаборатории запирается и опечатывается.

Мероприятия при аварийной ситуации, журнал регистрации аварийных ситуаций.

На случай аварии, при которой создается реальная или потенци­альная возможность выделения патогенного биологического агента должен быть план ликвидации аварии, запас дезинфицирующих средств, активных в отношении возбудителей, с которыми проводят исследования.

В подразделении, проводящем работу с ПБА, в специально отве­денном месте хранят гидропульт (автомакс), комплекты рабочей (для переодевания пострадавших) и защитной (для сотрудников, ликвиди­рующих последствия аварии) одежды, аварийную аптечку.

Во всех подразделениях, работающих с ПБА, не реже одного раза в год проводят плановые тренировочные занятия по ликвидации аварий.

При проливе или разбрызгивании биоматериалов о происшествии необходимо поставить в известность зав. КДЛ, который определяет вид и объем дезинфекционных мероприятий. Все случаи аварий в КДЛ любого профиля подлежат обязательной регистрации во внутрилабораторном журнале по технике безопасности. Дальнейшие действия сотрудников зависят от типа ЧС.

7. Нормативные документы, регламентирующие работу микробиологической лабо­ратории. Правила работы с биологическим мик­роскопом

Основные документы:

• СанПиН Безопасность работы с микроорганизмами III-IV групп патогенности (опасности) и возбудителями паразитарных болезней.

Кроме того, руководствуются различными приказами, стандартами, распоряжениями, МУК.

Правила работы с биологическим мик­роскопом

Микроскоп – точный оптический прибор, требующий бережного обращения. При работе с ним нельзя применять большие усилия.

Нельзя касаться пальцами поверхности линз, зеркал, светофильтров.

С поверхности линз удаляют пыль мягко беличьей кисточкой, промытой в эфире.

С зеркал сдувают пыль резиновой грушей. Протирать их нельзя.

Снаружи микроскоп протирают мягкой тряпкой, слегка пропитанной бескислотным вазелином, затем сухой чистой тряпкой.


Организация стока поверхностных вод: Наибольшее количество влаги на земном шаре испаряется с поверхности морей и океанов (88‰).


Опора деревянной одностоечной и способы укрепление угловых опор: Опоры ВЛ - конструкции, предназначен­ные для поддерживания проводов на необходимой высоте над землей, водой.


Папиллярные узоры пальцев рук - маркер спортивных способностей: дерматоглифические признаки формируются на 3-5 месяце беременности, не изменяются в течение жизни.

Поперечные профили набережных и береговой полосы: На городских территориях берегоукрепление проектируют с учетом технических и экономических требований, но особое значение придают эстетическим.

Свидетельство и скидка на обучение каждому участнику

Зарегистрироваться 15–17 марта 2022 г.

Лекция №2 Микробиологическая лаборатория.

Объект изучения медицинских микробиологических лабораторий — патогенные биологические агенты (ПБА) — патогенные для человека микроорганизмы (вирусы, бактерии, грибы, простейшие), генно-инженерно модифицированные микроорганизмы, яды биологического происхождения (токсины), гельминты, а также материал (включая кровь, биологические жидкости и экскременты организма человека), подозрительный на содержание ПБА.

В зависимости от выполняемых исследований микробиологические лаборатории подразделяют на диагностические, производственные и научно-исследовательские.

В соответствии с типами микроорганизмов, изучаемых в них, выделяют бактериологические, вирусологические, микологические и протозоологические лаборатории.

Группы возбудителей инфекционных заболеваний

Регламентация условий работы с возбудителями инфекционных заболеваний проводится в соответствии со степенью опасности микроорганизмов для человека. По этому признаку выделено четыре группы возбудителей.

Группа I: возбудители особо опасных инфекций (чума, натуральная оспа, лихорадки Ласса, Эбола и др.).

Группа II: возбудители высококонтагиозных бактериальных грибковых и вирусных инфекций (сибирская язва, холера, лихорадка Скалистых гор, сыпной тиф, бластомикоз, бешенство и др.). В эту группу также включён ботулотоксин (но не сам возбудитель ботулизма).

Группа III: возбудители бактериальных грибковых, вирусных и протозойных инфекций, выделенные в отдельные нозологические формы (возбудители коклюша, столбняка, ботулизма, туберкулёза, кандидоза, малярии, лейшманиоза, гриппа, полиомиелита и др.). В эту группу также включены аттенуированные штаммы бактерий групп I, II и III.

Группа IV: возбудители бактериальных, вирусных, грибковых септицемий, менингитов, пневмоний, энтеритов, токсикоинфекций и острых отравлений, а также возбудители анаэробных газовых инфекций, синегнойной инфекции, аспергиллёза, амебиаза, аденовирусы, герпесвирусы и др.

Лаборатории разных групп риска.

В зависимости от уровня безопасности работы с микроорганизмами лаборатории подразделяют на четыре группы риска.

Первая группа риска: лаборатории особого режима (максимально изолированные) с высоким индивидуальным и общественным риском.

Вторая группа риска: режимные лаборатории (изолированные) с высоким индивидуальным и низким общественным риском.

Третья группа риска: базовые (основные) лаборатории с умеренным индивидуальным и ограниченным общественным риском.

Четвёртая группа риска: базовые (основные) лаборатории с низким индивидуальным и общественным риском.

В соответствии с выполняемыми задачами выделяют:

бактериологические лаборатории в составе ЛПУ;

бактериологические лаборатории в составе комитетов Госсанэпиднадзора;

учебные бактериологические лаборатории вузов;

проблемные и отраслевые бактериологические лаборатории научно-исследовательских институтов и предприятий по выпуску бактерийных препаратов;

специализированные бактериологические лаборатории по контролю за особо опасными инфекциями;

специализированные бактериологические лаборатории по контролю за отдельными группами бактерий: микобактериями, риккетсиями, лептоспирами и др.

Большая часть микробиологических лабораторий работает с ПБА III и IV групп, а изучением возбудителей особо опасных инфекций (группы I и II) занимаются только специализированные лаборатории.

Требования к организации работы с ПБА групп опасности III и IV.

1. Базовые лаборатории, работающие с ПБА групп III и IV, должны располагаться в отдельном здании или в изолированной части здания.

2. Они должны иметь два выхода: один для сотрудников, другой — для доставки материала для исследований (допускается передача материала через передаточное окно). В лабораториях вузов, научно-исследовательских институтов и на предприятиях по выпуску бактерийных препаратов допускается наличие одного входа.

3. Лаборатории должны иметь необходимый набор помещений в соответствии с производственной мощностью и номенклатурой выполняемых исследований.

4. В помещениях должны быть проведены водопровод, электричество, отопление и вентиляция. В системе водоснабжения должны быть предусмотрены раздельные сети подачи воды для лабораторных исследований и бытовых нужд (сеть питьевой воды). Последняя должна быть защищена от обратного тока воды из лабораторной сети.

5. Вентиляция должна быть приточно-вытяжной, при этом наиболее низкое давление вытяжной вентиляции должно быть в помещениях с наибольшей опасностью инфицирования. При необходимости вентиляцию следует оснастить фильтрами тонкой очистки воздуха.

6. Помещения должны иметь естественное и искусственное освещение.

Требования к проведению работ в микробиологической лаборатории

Работу с ПБА групп III и IV выполняют специалисты с высшим и средним специальным образованием. К ней допускают сотрудников, прошедших инструктаж по соблюдению требований безопасности работы с ПБА; последующий инструктаж следует проводить не реже одного разав год. Все сотрудники, работающие с ПБА, должны находиться на диспансерном учёте. Приборы, оборудование и средства измерения должны быть аттестованы, технически исправны и иметь технический паспорт. Их метрологический контроль и техническое освидетельствование следует проводить в установленные сроки.

Правила работы в бактериологической лаборатории:

1. К работе допускаются лица, прошедшие специальный инструктаж о правилах работы в баклаборатории.

2. Каждый сотрудник должен иметь индивидуальную спецодежду (халат, шапочку)

3. Запрещено выходить из лаборатории в спецодежде и надевать поверх неё верхнюю одежду

4. Обязательное выполнение правил личной гигиены

5. Не допускается прием пищи и курение в баклаборатории

6. Хранение личных вещей должно быть организовано в комнате для медперсонала

7. После окончания работы обязательно проводится влажная уборка всех помещений с применением дезрастворов

8. При загрязнении патогенным материалом необходимо: а) мебель обработать дезраствором, б) лабораторную посуду стерилизовать, в) руки сначала обработать дезраствором, а затем тщательно вымыть с мылом.

9. Не допускать лишних хождений, резких движений, посторонних разговоров.

Правила работы с культурой патогенных микроорганизмов:

1. Доставлять инфицированный материал в лабораторию и переносить его из одной лаборатории в другую на территории учреждения нужно в специально приспособленной посуде (металлических биксах, ящиках, баках)

2. Весь материал, поступивший в баклабораторию, должен рассматриваться как инфицированный

3. При распаковке присланного заразного материала необходимо соблюдать осторожность. Банки, содержащие материал для исследования, при получении обтирают снаружи дезраствором и ставят на подносы или кюветы.

4. О случаях аварии с посудой, содержащей патогенный материал, следует немедленно сообщить зав. лабораторией и немедленно провести обеззараживание объектов и обеззараживание рук, других частей тела и спецодежду.

5. Перед работой следует проверить качество посуды, пипеток, шприцев и другого оборудования.

6. При работе с культурой патогенных микроорганизмов необходимо строго соблюдать общепринятые в бактериологической практике технические приемы, исключающие возможность соприкосновения рук с заразным материалом:

- с инфицированным материалом работают только с помощью инструментов (пинцеты, петли, корнцанги),

- прикасаться руками к исследуемому материалу и конденсату в засеянных чашках запрещается,

- перед работой тщательно проверяют целостность стеклянной посуды, проходимость игл и надежность поршней шприцев,

- при посеве материала делают надпись на пробирках, чашках Петри, колбах, флаконах с указанием номера анализа (культуры) и даты посева,

- в пробирки и чашки Петри материал высевают вблизи от огня горелки с обжиганием петли, шпателя, краев пробирки,

- растворы, содержащие патогенные микроорганизмы, набирают пипеткой с помощью резинового баллона,

- насасывать ртом и переливать растворы из сосуда в сосуд через край нельзя

- по окончанию работы запрещается оставлять на рабочих столах нефиксированные мазки, чашки Петри, пробирки и другую посуду с инфицированным материалом, все объекты, содержащие ПБА, должны быть убраны в хранилища (холодильники, термостаты, шкафы) с обязательной дезинфекцией столов. Использованные пипетки полностью (вертикально) погружают в дезинфицирующий раствор, избегая образования пузырьков в каналах. Остатки ПБА, использованную посуду и оборудование собирают в закрывающиеся ёмкости и передают в автоклавную.

-категорически запрещено сливать отходы с ПБА в канализацию без предварительного обеззараживания.

- после окончания работы с ПБА и заражёнными животными, а также после ухода из лаборатории следует тщательно вымыть руки.

7. Заразный материал и отработанные культуры подлежат обязательному уничтожению. Инструменты, используемые в работе с заразным материалом и рабочее место дезинфицируют, руки после дезинфекции моют с мылом

8. Работники баклаборатории подлежат обязательной вакцинации против тех заболеваний, возбудители которых могут встречаться в исследуемых объектах.

К основным методам микробиологии относятся:

• микроскопический — изучение морфологии микробов с использованием специальной микроскопической техники;

• бактериологический (культуральный) — получение чистых культур микробов и изучение их биологических свойств, позволяющие провести идентификацию, т.е. определение, вида микроба;

• серологический — выявление антител к возбудителям в биологических жидкостях организма больного (чаше в сыворотке крови; от лат. serum — сыворотка);

• аллергологический — оценка аллергических феноменов, возникающих в организме человека (на коже, слизистых оболочках или в крови) под действием компонентов или цельных клеток микроба-возбудителя;

• биологический — моделирование инфекционных процессов на лабораторных животных или куриных эмбрионах;

• молекулярно-биологический — изучение состава микробных нуклеиновых кислот с помошью полимеразной цепной реакции, сиквенирования и гибридизации ДНК.

Работа на кафедре микробиологии и в бактериологической лаборатории требует соблюдения специальных правил, так как исследования проводятся с использованием культур патогенных микроорганизмов и заразного материала от больных и экспериментальных животных. Соблюдение этих правил необходимо для обеспечения не только личной безопасности, но и безопасности окружающих.

Микроорганизмы по степени опасности заражения работающих с ними лиц подраз­ деляют на 4 групп (Классификация, действующая на территории Российской Федерации. В России приняты Санитарные Правила, устанавливающие требования к организационным, санитарно-противоэпидемическим (профилактическим) мероприятиям, направленным на обеспечение личной и общественной безопасности, защиту окружающей среды при работе с патогенными биологическими агентами (Г.Г. Онищенко Санитарно-эпидемиологические правила СП 1.3.2322-08. — ПОСТАНОВЛЕНИЕ РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ, 2008):

СП 1.3.2322-08 регламентирует работу с III - IV группой патогенности в соответствии с классификатором патогенов

СП 1.3.1285-03 для работы с I-II группой патогенности

I. Возбудитель чумы, возбудители геморрагических лихорадок Эбола и Марбург (филовирусы), Ласса, Хунин, Мачупо, Себиа, Гуанарит (аренавирусы), натуральной оспы человека и обезьян (поксвирусы).

Ш. Возбудители коклюша, возвратного тифа, столбняка, дифтерии, лепры, ботулизма, брюшного тифа, дизентерии, некоторых микозов, гриппа, полиомиелита, гепатитов А, Е, хламидиозов (трахомы, урогенитального хламидиоза, пневмонии).

IV. Возбудители пневмонии, ОРВИ, конъюнктивитов, пищевых токсикоинфекций, газовой гангрены, септице­мии, кандидозов; микробы - показатели санитарного состояния объектов окружаю­щей среды.

Работа с особо опасными микроорганизмами регламентируется специальной инструкцией и проводится в режимной лаборатории.

Работа с возбудителями З и 4 групп проводится в соответствии с правилами устройства, техники безопасности, производственной санитарии в лабораториях СЭС и других бактериологи­ческих лабораториях.

Классификация, принятая в США, Канаде, Японии, а также используемая Всемирной организацией здравоохранения, отличается от существующей в России обратным порядком: микроорганизмы наиболее высокой степени патогенности у них отнесены к IV группе.

Группа риска I. Отсутствие или низкая индивидуальная и общественная опасность. Микроорганизмы, потенциально не являющиеся возбудителями заболеваний человека или животных.

Группа риска II. Умеренная индивидуальная опасность, низкая общественная опасность. Патогенные микроорганизмы, которые могут вызвать заболевание, но не представляют серьёзного риска для персонала, населения, домашнего скота или окружающей среды. Неосторожность в лаборатории может вызвать инфекцию, однако существуют доступные лечебные и профилактические меры. Риск распространения ограничен.

Группа риска III. Высокий индивидуальный и низкий общественный риск. Патогенный агент, который обычно вызывает серьёзное заболевание человека или животных, но, как правило, не распространяется от больного к здоровому. Существуют эффективные лечебно-профилактические процедуры.

Группа риска IV. Высокий индивидуальный и общественный риск. Патогенный агент вызывает обычно серьёзное заболевание у человека или животных и легко распространяется от больного к здоровому или опосредованно. Эффективных мер в большинстве случаев не существует.

В структуру любой бактериологической лаборатории входят:

· производственные помещения с ламинарными шкафами или боксами для работы с патогенным биологическим материалом в асептических условиях;

· специально оборудованное помещение для стерилизации питательных сред, посуды, обеззараживания отработанного инфицированного материала;

· моечная, оборудованная для мытья посуды;

· помещение для приготовления питательных сред;

· виварий – помещение, предназначенное для содержания лабораторных животных.

Все помещения лаборатории должны иметь высоту не менее 3 м, быть обеспечены вентиляцией, водопроводом, канализацией, электроэнергией и, по возможности, газом. Стены должны быть окрашены масляной краской или покрыты кафельной плиткой, пол – линолеумом или кафельной плиткой.

Оборудование рабочего стола бактериолога:

· емкость с водой и ванна для промывки препаратов

· предметные стекла и салфетки

· штатив для пробирок с культурами

· пинцет для извлечения стекол

· фильтровальная бумага для высушивания препаратов

· банка для отработанных стекол

· дезинфицирующий раствор (3% хлорсодержащий или др. растворы)

На рабочем месте не допускается наличие посторонних предметов!

Внимательно прочитать!

Студент обязан соблюдать правила работы с инфицированным материалом!

Категорически запрещается:

• находиться в учебной, микробиологической лаборатории без спецодежды (халат, шапочка, сменная обувь); выпускать из-под одежды волосы, воротнички; класть на столы портфели, сумки;

• принимать пищу в учебных лабораториях кафедры;

• оставлять открытыми чашки Петри с культурами микроорганизмов;

• оставлять открытыми пробирки с инфицированным материалом;

• переливать исследуемый материал из одной ёмкости в другую;

• насасывать жидкость в Пастеровскую пипетку ртом;

• разводить дезинфицирующие растворы без перчаток и маски;

• выносить из лаборатории микробные культуры.

Во время работы необходимо:

• при проведении посевов – не разговаривать и не ходить по лаборатории;

• на всех пробирках и чашках с посевами написать название культуры и дату.

По окончании работы необходимо:

• привести в порядок рабочее место;

• использованные пипетки, предметные и покровные стекла, шпатели, ватные тампоны поместить в сосуд с дезинфицирующим раствором;

• пинцеты, бактериологические петли, иглы после работы с исследуемым материалом прожигать в пламени горелки;

• все засеянные пробирки и чашки сдать по счету дежурному студенту для помещения в термостат;

• отработанный материал (культуры, микробный материал) сдать дежурному лаборанту для стерилизации;

• привести в порядок микроскоп.

В случае загрязнения заразным материалом поверхности стола и других предметов, кожи рук и лица – обработать дезинфицирующим раствором, вымыть руки с мылом и немедленно сообщить о случившемся преподавателю.


Все микробиологические, биохимические и моле-кулярно-биологические исследования микроорганизмов про¬водят в специальных лабораториях, структура и оборудование которых зависят от объектов исследования (бактерий, вирусов, грибов, простейших), а также от их целевой направленности (научные исследования, диагностика заболеваний). Изучение иммунного ответа и серодиагностика заболеваний человека и животных осуществляют в иммунологических и серологичес¬ких (serum — сыворотка крови) лабораториях.
Бактериологические, вирусологические, микологические и серологические (иммунологические) лаборатории входят в со¬став санитарно-эпидемиологических станций (СЭС), диагнос¬тических центров и крупных больниц. В лабораториях СЭС выполняют бактериологические, вирусологические и серологи¬ческие анализы материалов, полученных от больных и контак¬тировавших с ними лиц, обследуют бактерионосителей и про¬водят санитарно-микробиологические исследования воды, воз¬духа, почвы, пищевых продуктов и т.д.
В бактериологических и серологических лабораториях боль¬ниц и диагностических центров проводят исследования с целью диагностики кишечных, гнойных, респираторных и дру¬гих инфекционных заболеваний, осуществляют микробиологи-ческий контроль за стерилизацией и дезинфекцией.
Диагностику особо опасных инфекций (чума, туляремия, сибирская язва и др.) проводят в специальных режимных ла¬бораториях, организация и порядок деятельности которых строго регламентированы.
В вирусологических лабораториях диагностируют заболева¬ния, вызванные вирусами (грипп, гепатит, полиомиелит и др.), некоторыми бактериями — хламидиями (орнитоз и др.) и риккетсиями (сыпной тиф, Ку-лихорадка и др.). При организации и оборудовании вирусологических лабораторий учитывают спе¬цифику работы с вирусами, культурами клеток и куриными эмбрионами, требующую строжайшей асептики.
В микологических лабораториях проводят диагностику за¬болеваний, вызываемых патогенными грибами, возбудителями микозов.
Лаборатории обычно размещаются в нескольких помещени¬ях, площадь которых определяется объемом работ и целевым назначением.

В каждой лаборатории предусмотрены:
а) боксы для работы с отдельными группами возбудителей;
б) помещения для серологических исследований;
в) помещения для мойки и стерилизации посуды, приготов¬
ления питательных сред;
г) виварий с боксами для здоровых и подопытных живот¬
ных;
д) регистратура для приема и выдачи анализов.
Наряду с этими помещениями в вирусологических лабора¬ториях имеются боксы для специальной обработки исследуе¬мого материала и работы с культурами клеток

Оборудование микробиологических лабораторий
Лаборатории снабжены рядом обязательных приборов и аппаратов.
1. Приборы для микроскопии: биологический иммерсион¬ный микроскоп с дополнительными приспособлениями (ос¬ветитель, фазово-контрастное устройство, темнопольный кон¬денсор и др.), люминесцентный микроскоп.
2. Термостаты и холодильники.
3. Приборы для приготовления питательных сред, растворов и т.д.: аппарат для получения дистиллированной воды (дистил¬лятор), технические и аналитические весы, рН-метры, аппара¬тура для фильтрования, водяные бани, центрифуги.
4. Набор инструментов для манипуляций с микробами: бак¬териологические петли, шпатели, иглы, пинцеты и др.
5. Лабораторная посуда: пробирки, колбы, чашки Петри, матрацы, флаконы, ампулы, пастеровские и градуированные пипетки и др., аппарат для изготовления ватно-марлевых про¬бок.
Крупные диагностические комплексы имеют автоматичес¬кие анализаторы и компьютеризированную систему оценки полученной информации.
В лаборатории выделено место для окраски микроскопичес¬ких препаратов, где находятся растворы специальных красите¬лей, спирт, кислоты, фильтровальная бумага и др. Каждое рабочее место снабжено газовой горелкой или спиртовкой и емкостью с дезинфицирующим раствором. Для повседневной работы лаборатория должна располагать необходимыми пита¬тельными средами, химическими реактивами, диагностически¬ми препаратами и другими материалами.
В крупных лабораториях имеются термостатные комнаты для массового выращивания микроорганизмов, постановки се¬рологических реакций. Для выращивания, хранения культур, стерилизации лабораторной посуды и других целей используют следующую аппаратуру.

1. Термостат. Аппарат, в котором поддерживается постоян¬ная температура. Оптимальная температура для размножения большинства патогенных микроорганизмов 37 "С. Термостаты бывают воздушными и водяными.
2. Микроанаэростат. Аппарат для выращивания микроорга¬низмов в анаэробных условиях.
3. С02 -инкубатор. Аппарат для создания постоянной тем¬пературы и атмосферы определенного газового состава. Пред¬назначен для культивирования микроорганизмов, требователь¬ных к газовому составу атмосферы.
4. Холодильники. Используют в микробиологических лабора¬ториях для хранения культур микроорганизмов, питательных сред, крови, вакцин, сывороток и прочих биологически актив¬ных препаратов при температуре около 4 °С. Для хранения препаратов при температуре ниже О °С применяют низкотем¬пературные холодильники, в которых поддерживается темпе¬ратура —20 °С или —75 "С.
5. Центрифуги. Применяют для осаждения микроорганиз¬мов, эритроцитов и других клеток, для разделения неоднород¬ных жидкостей (эмульсии, суспензии). В лабораториях исполь¬зуют центрифуги с различными режимами работы.
6. Сушилъно-стерилизационный шкаф (печь Пастера). Пред¬назначен для суховоздушной стерилизации стеклянной лабо¬раторной посуды и других жаростойких материалов.
7. Стерилизатор паровой (автоклав). Предназначен для сте¬рилизации перегретым водяным паром (под давлением). В ми¬кробиологических лабораториях используют автоклавы разных моделей (вертикальные, горизонтальные, стационарные, пере¬носные).

Автор: Алшериева Куралай Курманалиевна
заведующая бактериологической лабораторией
Областного медицинского центра.15.02.2019г

Принципы организации и назначение микробиоло-гических лабораторий.

Оснащение лаборатории и рабочего места.

Правила работы в микробиологической лаборатории.

Порядок работы с различными группами микроорганизмов.

Исследования, которые проводят микробиологические лаборатории, определяются их назначением.

Клинико- диагностические лаборатории проводят микробиологическую диагностику инфекционных болезней. Лаборатории санитарно-эпидемиологических станций (СЭС) выполняют бактериологические, вирусологические и серологические исследования материала от больных, носителей возбудителя инфекции и здоровых, работающих в системе здравоохранения, торговли и общественного питания. Бактериологические лаборатории исследуют бактериальную загрязненность объектов окружающей среды: воздуха, воды, почвы, продуктов питания. Специальные лаборатории контролируют безвредность и эффективность вакцин, сывороток и других бактерийных препаратов.

В структуру любой микробиологической лаборатории входят:

лабораторные комнаты и боксы для работы в асептических условиях;

специально оборудованное помещение для стерилизации питательных сред, посуды, обеззараживания отра-ботанного инфицированного материала;

моечная, оборудованная для мытья посуды;

виварий — помещение, предназначенное для содержания лабораторных животных.

Все помещения лаборатории должны иметь высоту не менее 3 м, быть обеспечены вентиляцией, водопроводом, канализацией, электроэнергией и по возможности

газом. Стены должны быть окрашены масляной краской

или покрыты кафельной плиткой, пол — линолеумом.

Лабораторные столы с подводкой к каждому рабочему месту электричества, газа, воды покрывают пластиком, линолеумом или стеклом, что облегчает их дезин-фекцию. Рабочее место оборудуется микроскопом с осветителем, набором красителей и реактивов для окраски препаратов, бактериальными петлями, крючком, иглой, шпателями, пастеровскими и градуированными пипетками, предметными и покровными стеклами, пинцетами, ванночкой и перекладинами для приготовления и окраски мазков, промывалкой с водопроводной водой, сосудом с дезинфицирующим раствором, ватой в стеклянном сосуде, фланелевой салфеткой, карандашом по стеклу, фильтровальной бумагой.

В лаборатории всегда должен находиться набор лабораторной посуды — пробирки, чашки Петри, флаконы Ру или матрацы, ампулы и т. д.

С первого дня работы в микробиологической лаборатории студенты обязаны помнить, что они имеют дело с микроорганизмами, которые могут быть возбудителями болезней, поэтому необходимо строго соблюдать следующие правила:

входить в лабораторию и работать в ней только в белом халате, косынке (шапочке) и сменной обуви;

в помещении лаборатории не принимать пищу и воду, не курить, не допускать излишних разговоров и ненужных переходов;

работать сидя, преимущественно на одном и том же месте, соблюдать чистоту и аккуратность в работе, по окончании работы руки тщательно вымыть, а при необходимости — обработать дезинфицирующим раствором;

использованные пипетки, предметные и покровные стекла, шпатели, ватные тампоны помещать в сосуд с дезинфицирующим раствором. Пинцеты, бактериальные петли, иглы прожигать в пламени горелки;

отработанные культуры, использованный микробный материал, трупы зараженных животных сдавать для обеззараживания в автоклаве;

стол, одежду, обувь и другие предметы, случайно загрязненные потенциально опасным зараженным материалом, подвергать немедленной дезинфекции.

Микроорганизмы по степени опасности заражения работающих с ними лиц подразделяют на четыре группы.

I. Возбудитель чумы.

II. Возбудители холеры, сибирской язвы, туляремии, бруцеллеза, сапа, Ку-лихорадки, бластомикоза, кокцидиоидоза, гистоплазмоза.

Возбудители коклюша, возвратного тифа, столбняка, ботулизма, дифтерии, лепры, брюшного тифа, дизен-терии, некоторых микозов.

Возбудители пневмонии, пищевых токсикоинфекций, газовой гангрены, септицемий, кандидозов; микробы — показатели санитарного состояния объектов окружающей среды.

Работу с культурами возбудителей I и II групп можно проводить только в специальных лабораториях с разрешения органов здравоохранения СССР или союзных республик. Работа с возбудителями, отнесенными к III—IV группам, проводится в соответствии с правилами устройства, техники безопасности, производственной санитарии в лабораториях СЭС и других бактериологических лабо-раториях.

Аппаратура, используемая в микробиологической лаборатории

В термостате, находящемся в лабораторной комнате, постоянно поддерживается стабильная температура, необходимая для культивирования микроорганизмов.

Термостаты бывают суховоздушными и водяными. Оптимальная температура для роста большинства патогенных и условно-патогенных микроорганизмов 37°С.

Аиаэростаты — приборы для выращивания микроор-ганизмов в анаэробных условиях.

Стерилизатор сухожаровой (печь Пастера, сушильный шкаф) представляет собой металлический шкаф с двойными стенками, асбестовой или стекловатной теплоизоляцией, электрообогревателем и терморегулятором. Пред-назначен для стерилизации при температуре 160—200°С стеклянных, металлических и фарфоровых предметов и термостойких веществ (тальк, белая глина, оксид цинка), а также минеральных и растительных масел, жиров, ла-нолина, вазелина, воска.

Рис. 1. Автоклавы.

Стерилизаторы паровые (автоклавы, кипятильники Коха) широко используются для стерилизации паром под давлением или текучим паром питательных сред, перевязочного материала, воды, ряда лекарственных средств, не изменяющих своих свойств при высоких температурах, а также для обезвреживания отработанного зараженного материала (рис. 1).

Приборы для стерилизации фильтрованием применяются для стерилизации веществ, не выдерживающих нагревания (белковые препараты или среды, некоторые антибиотики, витамины и др.).

Водяная терморегулируемая баня применяется для тиндализации (дробной стерилизации).

Холодильники и холодильные камеры служат для хранения культур микроорганизмов, питательных сред, крови, вакцин, сывороток и других биологически активных веществ при температуре 4°С и —20°С (соответственно).

Центрифуги применяют для осаждения микробных клеток, разделения на фракции их дезинтегратов, биохимических исследований и т. д.

Читайте также: